생명공학실험. Animal Cell culture(동물세포배양) counting plating passaging(헤마토사이토미터)

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials & Methods
4. Results
5. Discussion
6. Conclusion
7. References

본문내용

Abstract
Animal cell culture와 Hemocytometer(직접계수법)를 진행하였다. 배양 전 AsPC-1 관찰결과 중간중간 모여 있으며 모양은 구형을 보였다. Hemocytometer에 로딩 하여 세포 수를 측정한 결과 23.4 x 104 cell이었다. 2일 배양 후 세포수가 늘어났음을 관찰했다. 배양 전 fibroblast는 길쭉한 모양을 보였으며, 트립신 처리 후 원형 모양을 보였다. Hemocytometer에 로딩 하여 세포 수를 측정한 결과 23.4 x 104 cell이었다. fibroblast또한 2일 배양 후 세포수가 늘어났음을 관찰했다.

Introduction
Animal cell culture
동물 세포 배양이란 다세포 생물에서 분리한 세포를 특수한 용기 내에서 성장 및 보존, 세포의 세대를 보전하는 것을 뜻한다. 특수한 용기, 온도, 습도, 영양소 등의 배양 조건이 필요하다. 계대 배양은 세포증식을 위해 새로운 배양접시에 옮겨 세포의 대를 계속 이어서 배양하는 방법으로, 제한된 배양접시 내에서 세포가 증식을 멈추게 되므로 이것을 막고 세포가 증식할 수 있게끔 새로운 공간을 제공한다.
1) Cell culture media: 세포에 생장을 돕기 위해 만들어진 liquid나 gel 형태의 물질을 말한다. 미생물 배지와 마찬가지로 cell type에 따른 다양한 배지가 존재하며 glucose, water, salts, amino acid 및 vitamin이 포함되어 있다. pH indicator로 phenol red가 첨가되어 있다.
2) Fetal bovine serum: 동물세포 배양에 가장 널리 사용되는 혈청 보충제로 bovine serum albumin이 FBS의 주성분이다. 그 이외에 다양한 growth factor, 세포의 부착을 돕는 물질들이 함유되어 있다
3) Trypsin: 이자액에서 분비되는 단백질 분해효소로 이자에서 비활성의 전구물질인 트립시노겐이 만들어지고 소장에 운반되면 엔테로펩티데이스 또는 Trypsin 자체에 의하여 활성화된다.

참고 자료

Madian et al, 오계현, 『핵심미생물학』, 바이오사이언스출판, 2013, p1~3/ 41~50/ 122~123
Campbell et al, 전상학, 『캠벨 생명과학10판』, 바이오사이언스출판, 2016, p379~403/ 432~456