[생명공학실험] 키틴조직에서 키틴분해효소의 분리

소개

닭 근위조직에서 키틴을 분해하는 효소인 키티네이즈를 분리하는 6주간에 걸친 실험을 정리한 결과 보고서입니다
여러 크로마토그래피에 대한 설명과 단백질 정량법, 전기영동법에 대해 비교적 자세히 설명해 놓았습니다
윈도우 98에서 작업했습니다 그림은 미리보기 화면에서 보입니다
많은 참고가 되시길 바라구요,, 진솔한 평가도 부탁드립니다^^

목차

서 론

(1)키틴,키토산이란
(2)키틴과 키토산의 다른점
(3)키토산의 제조
(4)키토산의 물질특성
(5)키토산 사용시 기대효과

각 실험별 방법 및 원리 요약 & 결과 분석

(1) Ion exchange Chromatography
(2) HIC (hydrophobic interaction chromatography)
(3) protein 정량 (by Lorry and Folin method at mg level)
(4) SDS Page & Chitinase Activity measurment
(5) 전기영동

결론

참고문헌

본문내용

이번 실험의 주된 목적은 실험 manual에 나와있는 대로 닭근위(모래주머니)에서 protein 과의 복합체로서 함유되어 있는 다당류인 chitin의 β(1,4) 결합을 가수 분해하여 절단, pro
tein으로부터 chitin을 분해하는 효소인 chitinase를 효율적으로 분리해내는 기작을 찾아보는
실험이었다. 더불어 chitin이 함유되어 있는 protein의 특성을 파악하기 위한 다양한 과정을
실험해보았다.
위의 여러 결과를 종합해보자. 우린 2.3주차때 행했던 Ion exchanger chromatography와
마지막 6주차에 행했던 chitinase의 Activity를 측정하는 실험을 통해 (-)charge를 띄는 pro
tein에서 Activity가 크다는 것을 알 수 있었다. Anion에서 bind된 protein은 (-)charge를 띄는 protein이고 Cation에서 unbind된 protein은 (+) charge 혹은 중성 charge를 띄는 pro tein이다. 그렇다면 효율적인 chitinase의 분리를 위해서는 (-)charge의 protein을 효과적으 로 분리해낼 수 있는 과정이 선행되어야 한다는 결론이 나온다. (-) charge의 protein을 잡아내는 것은 Anion exchanger chromatography이다. 여기서 쓰인 것은 column의 충진제
는 Source-Q 이다. 따라 Source-Q에서 효과적인 적정 농도의 NaCl로 gradient를 걸어준 다면 chitinase를 보다 효율적으로 분리해 낼 수 있는 protein을 잡아낼 수 있게 될 것이다.

참고자료

· 키틴 키토산 및 키틴 키토산-올리고당
· → 미성교역(주) 정태진 http://wellife.netian.com/chitosan/chitex/data/datamain.htm
· 생화학 → 김명순·김종화 외 11인, 형설출판사 (1999)
· 생화학 (상) → 채범석 역, 서울외국서적 (1996)
· http://www.naver.com → 문서검색, 두산 encyber 백과사전
· http://nmr.kaist.ac.kr/chae/lecture_note/index.htm
· http://bric.postech.ac.kr/topic/63.html
· http://labbank.co.kr/labbank/analyzer/use/chro/chro.htm