영양판정: 빈혈 판정

목차

1.실험날짜
2.실험목적
3.실험방법
4.실험결과
5.고찰

본문내용

실험목적 : 여러가지 빈혈 측정법을 통해 빈혈 여부를 판정한다.
3. 실험방법
3.1 Red blood cell count
적혈구의 현미경적 계수 방법으로 대상자의 혈액을 생리식염수로 200배 희석하여 현미경으로 적혈구의 수를 계산하였다. 알코올솜으로 대상자의 손가락을 닦고 멸균 lancet을 사용하여 큰 혈액 방울을 만든 뒤 흡입 고무관이 연결된 RBC pipet으로 기둥 내 0.5눈금까지 혈액을 넣었다. 그 뛰 희석액을 pipet의 101눈금까지 넣은 뒤 pipet을 흔들어 혈액을 희석액과 충분히 섞었다. Counting chamber에 cover glass를 올려 놓은뒤 RBC pipet의 희석혈액을 채운 후 수평table에 올려 놓아 안정시켰다. 현미경으로 counting chamber 를 관찰한 결과 R 구획의 적혈구세포 분포 상태가 불량하여 1R-2R-3R-4R-5R순서가 아닌 분포상태가 양호한 임의의 구획에서 적혈구세포를 셈하였다. RBC count는 혈액 1mm3 내의 적혈구 수지만 실험에서는 희석혈액의 일부를 세었기 때문에 희석배율과 계산에 사용된 용량의 수정배수를 곱해주었다. 1R 구획은 0.04mm2넓이에 0.1mm깊이로 1R구획의 부피는 0.004mm3이며 다섯 구획이므로 R의 총 부피는 5×0.004mm3=0.02mm3이며 실험에서 구하는 것은 1mm3 전혈 중의 세포수이므로, 1.0/0.02 = 50 의 용량수정 배수를 곱하였다.

3.2 Hemoglobin(Hb) 농도 측정
Mechanical pipet을 이용하여 시험관에 헤모글로빈 시약 5mL를 넣은 뒤 20μL의 혈액을 헤모글로빈 시약과 섞고 Vortex mixer로 혼합한 뒤 10분간 반응시켰다. 미리 제조된 헤모글로빈 시약을 blank로 하여 spectronic 20 기기로 540nm 파장에서 표준헤모글로빈 용액과 시료의 흡광도(O.D = optical density)를 구하였다. 표준 헤모글로빈 용액의 농도가 16.0g/dL이므로 이를 이용하여 다음과같이 시료의 헤모글로빈 농도를 계산하였다.

참고자료

· 김유리, 김지명, 이정은, 임윤숙, 황지윤, 홍경희(2016), 영양판정, 파워북, pp197-199