실험4 예비레포트 Lowry protein assay (단백질 정량 분석)

목차

1. 실험 목적
2. 바탕 이론
3. 실험 기기 및 시약
4. 실험 방법
5 참고문헌

본문내용

단백질 정량 분석이란 무엇인지 알아보고 Lowry법, UV법, BCA법, Bradford법 등 다양한 단백질 정량 분석 방법에 대해 이해하고 실험에서 Lowry법을 이용하여 다양한 농도의 단백질 시료를 정량해본다. 또한 UV/vis spectrophotometer의 이용방법을 숙지하여 미지의 단백질 시료의 흡광도를 측정한 후 주어진 단백질 검량선과 비교하여 미지 시료 속의 단백질 농도를 구해본다.
◇ 단백질 정량 분석 : 단백질 정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양 또는 농도를 구하는 것을 말한다. 일반적인 분석하는 방법에는 목적에 따라 정성분석과 정량분석으로 나눌 수 있는데 정성분석은 시료가 어떤 성분으로 구성되어 있는지 알아내거나 시료 내의 특정 화학 물질의 유무를 확인하기 위한 경우에 하는 분석이고, 정량 분석은 이름에서도 알 수 있듯이 어떤 성분의 양 혹은 농도를 측정하는 경우를 말한다. 그러므로 주로 정성분석이 정량 분석보다 먼저 시행되는 경우가 많다.
단백질 정량분석 할 수 있는 방법으로는 UV method, biuret method, Lowry method, BCA method, Kjeldahl method가 있다.
◇ UV method : 물질 자체의 분광학적 특성인 자외선 흡광 현상을 이용하는 단백질 정량법이다. 이방법의 원리는 단백질을 구성하는 아미노산중 방향족 아미노산인 Phe(페닐알라닌), Tyr(티로신), Trp(트립토판)(그 외 아미노산은 자외선 흡수율이 낮다)은 280nm의 자외선을 흡수하는 성질을 가지는데, 그 280nm에서의 흡광도와 단백질의 농도가 비례하는 특성을 이용한 것이다. 주어진 단백질을 구성하는 Tyr, Phe, Trp잔기의 개수를 알면 자외선 흡광계수를 구할 수 있다.

참고자료

· 농촌진흥청, 국립식량 과학원, 비색법, 1p
· 김대원 교수,method for protein concentration determination, ppt자료, 모든 page
· 아이에서에스(www.insungscienc.com ,bsa)
· www.thermofisher.com, Pierce™ Modified Lowry Protein Assay Kit(상품설명서)
· 화공기초이론 및 실험2, 실험노트
· 홍정일,김현정,김지윤, 2011년, 다양한 페놀성 물질과 Folin-Ciocalteu 시약의 반응성에 미치는 영향 요인 평가,2p~4p
· www.kocw.net ,2010년4월, 분광광도계를 이용한 혈액 단백질 농도측정, 2p~3p