Biofilm assay

소개

polystyrene plates를 이용하여 효모균인 Candida albicans와 세균인 Staphlyococcus aureus가 biofilm을 형성하는지 측정해본다.

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials & Methods
4. Results & Discussion
5. Reference

본문내용

1. Abstract
이번 실험에서는 polystyrene plates를 이용하여 효모균인 Candida albicans와 세균인 Staphlyococcus aureus가 biofilm을 형성하는지 측정해보는 것이 실험목적이다. 실험방법은 먼저 1x107 cfu/mL 균수로 배양된 C. albicans와 S. aureus를 96well plate에 100㎕ 넣고 새로운 배지 100㎕도 넣어준다. 그 다음 다른 well에는 대조군으로 fresh media(YPD, BHI) 200㎕를 넣어준다.(3반복) 24시간 후 균 배양액을 제거하고 PBS를 통해 washing해주고 그 다음 0.1% ctystal violet solution 200㎕를 넣고 상온, 암실에서 30분간 염색과정을 거친다. 염색 후 PBS를 통해 다시 washing 해주고 용해 용액 200㎕를 넣고 plate reader 기기로 OD 값을 측정한다. 우리조의 실험결과, OD 평균값은 YPD 200㎕:0.115 / YPD 100㎕+C. albicans 100㎕:0.196 / BHI 200㎕:0.105 / BHI 100㎕+S. aureus100㎕:0.145 으로 측정되었다. C. albicans와 S. aureus 모두 대조군에 비해 더 큰 OD값을 나타낸 것으로 보아 biofilm이 형성된 것을 알 수 있었으나 그 차이가 미비하였는데 따라서 고찰을 통해 Biofilm형성이 제대로 되지 않았거나 실험 중 Biofilm이 제거 되었을 가능성에 대해서 살펴보았다.

2. Introduction
(1) Biofilm 형성에 있어서 각 stage별 특징
미생물 세포가 고체 표면과 접촉 할 때의 일반적인 경향은 공간 및 영양 공급을 위해 다른 미생물 세포와 효율적으로 경쟁하고 불리한 환경 조건에 저항하기 위해 표면에 부착하는 것이다. 고체 표면은 육류, 과일 등과 같은 생물학적 또는 바닥, 벽, 파이프, 배수구, 장비의 비생물학적 표면 또는 음식 접촉 표면(컨베이어 벨트, 저온 살균기, 가스켓)으로 구성될 수 있다.

참고자료

· 조규성. 식품미생물학 실험. 2012. 문운당, p.161-164.
· 강인수 외 6명. 식품미생물학. 2000. 훈민사, p.145-157.
· 이나리. 미생물의 쿼럼센싱과 식품안전. 2013. 한국식품연구원 식품안전연구단, p.49-53.
· [논문] 김수경. 녹농균(Pseudomonas aeruginosa)에서 쿼럼 센싱 저해와 생물막 이산에 의한 생물막 제어. 2011. 부산대학교 약학과, p.37-38.