[분자생물학실험]Gene Cloning

소개

Gene cloning으로 DNA를 자르고 붙이고 변형시켜서 실험에 필요한 재조합 DNA를 제조하고, 기본적인 효소의 처리와 DNA의 분리 및 조작방법 이용하여 분자생물학의 기본을 배우기 위한 실험이다.

목차

1. 실험 목적

2. 실험 이론 및 원리
1) Gene cloning
2) Gene cloning 목적
3) Gene cloning의 역사
4) Gene cloning방법
5) Gene cloning 기술의 이용성

3. 실험 방법
1) 염분 노출
2) 해부
3) RNA 추출하기
4) RNA 정제단계 & PCR
5) 전기영동 & 겔 정제
6) Pick up : 파란색, 흰색 콜로니 중 흰색 콜로니에 원하는 유전자가 들어 있으므로 흰색 콜로니를 따는 과정.
7) 집균

4. 주의 사항

5. 실험 결과

본문내용

1. 실험 목적
가. Gene cloning으로 DNA를 자르고 붙이고 변형시켜서 실험에 필요한 재조합 DNA를 제조하고, 기본적인 효소의 처리와 DNA의 분리 및 조작방법 이용하여 분자생물학의 기본을 배우기 위함이다.

2. 실험 이론 및 원리
가. Gene cloning
동식물의 한 개체에서 수정을 거치지 않고, 무성생식에 의하여 양친과 똑같은 유전자 조성을 가진 개체를 얻는 기술이다. 그 개체군을 클론이라고 하며, 꺾꽃이, 접붙이기, 포기나누기 등으로 증식시킨 개체도 클론이라고 일컫는다. 클로닝은 암수의 유전자가 서로 섞이지 않으므로 우수한 품종을 보존하기 위한 가장 좋은 방법이다. 당근, 담배 등과 같은 식물에서는 성공사례가 많으며, 육종에 효과적으로 이용하고 있다. 동물의 경우도 양서류에서 성공하고 있다. 1963년 J.B 가든은 아프리카 개구리의 체세포에서 핵을 꺼내어, 그것을 핵을 빼낸 알에 이식해서 새로운 개체를 만드는 데 성공하였다. 포유류에서는 스위스의 K.이르멘제 등이 흰쥐를 사용해서 실험에 성공하였다. 수정한 지 얼마 안 되는 태아기 세포로부터 핵을 꺼내고, 갓 수정한 다른 알의 아직 합체되지 않은 알과 정자의 핵을 꺼내어 이 핵을 빼낸 수정란에, 먼저 채취한 핵을 이식해서 4일간 배양시킨 후, 다른 흰쥐의 자궁에 옮겨서 3마리의 클론 마우스를 만들어 내었다. 분자유전학적 관점에서 Cloning이란 DNA를 조작하여 조작된 DNA를 증식시켜 원하는 DNA를 다량으로 얻어내는 것이다. 조작된 DNA를 실은 vector를 bacteria에 넣으면 조작된 DNA가 bacteria의 핵 내에 삽입되는 과정을 이용하여 박테리아가 증식할 때 조작된 유전자가 함께 복제되도록 하거나, PCR을 이용하여 DNA를 증폭시킨다. Cloning에 과정에 의해 재조합 된 개체의 모임을 clone이라 부른다.

나. Gene cloning 목적
1) 제한된 DNA량으로부터 대량의 재조합DNA를 얻을 수 있다.

참고자료

· Gene Cloning & DNA Analysis An Introduction 7th Ed. by T A Brown.