Transformation

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본문내용

1.
- Transformation이란 유전자 재조합 기술 중 하나로써 외부 DNA 분자가 해당 세포 안에 들어가 그 세포의 유전적인 정보를 바꾸는 것을 말한다. 이 때 자신이 원하는 DNA를 재조합하여 플라스미드를 통해 충분한 양으로 증폭이 가능하다고 한다. 대표적인 예로는 대장균 세포가 있다.

2.
- Competent Cell(DH 5a), DNA solution, Water bath or heat block(42C, 90s), 1.5ml tube, 액체 & 고체 배지 등을 준비하고 우선 Comptent Cell을 50ul씩 멸균시킨 1.5ml tube에 주입한다. (이 때 알코올 램프를 통해 멸균을 시킨다.) 그리고 DNA sample을 각각 2ul씩 tube에 첨가한다. 그 후 sample을 잘 섞고 나서 10분 가량 ice에 방치하고 나서 (기존의 4~7 순서는 생략) Antibiotics가 들어있는 고체배지 위에 적당히 도말한 후 plate를 뒤집어 상온에서 12시간 가량 낮둔다.

참고 자료

Campbell Biology 9th edition, Chap 20, 2011.
Molecular Cloning: A Laboratory Manual (3rd edition). 2001.
New England BioLab website (www.neb.com)
Wikipedia