[연세대] 공학생물학및실험(2) 형질전환(Transformation) 결과 레포트

목차

1. Purpose

2. Result

3. Discussion

4. Further Studies
1)Replication origins of DNA

5. References

본문내용

Purpose
본 실험에서는 고리 형태의 플라스미드(plasmid) DNA를 대장균 표본에 주 입하는 과정을 이해하고, 이를 통해 대장균의 형질 전환을 관찰하고 이해한다.

Result
[그림 1]을 보면 모든 배지에서 colony가 성공적으로 자란 것을 확인할 수 있 다. 이때 정상적인 colony와 satellite colony가 존재하는데, 이를 더 보기 쉽게 나타내면 다음과 같다.
[그림 2]에서 흰색으로 자라나 있는 것들은 모두 E. coli의 colony에 해당하 는데, 그 중에 붉게 색칠되지 않은 것을 satellite colony라고 한다. 이러한 satellite colony들은 정상적인 것들에 비해 좁쌀처럼 그 크기가 매우 작은데, 이는 DNA 플라스미드가 의도한 것처럼 주입되지 않아 항생제에 대한 저항성 이 없는 표본들이다. 즉, 형질 전환이 일어나지 않은 E. coli colony이므로 전 체적인 실험 결과에서 배제해도 무방하다. 정상적인 colony(이하 colony)가 분포된 양상은 각 조의 표본마다 상이하다. 이는 E. coli를 고체 배지 위에 펴 바르는 과정에서 완전히 고르게 퍼지지 않 았기 때문이다. 2조를 제외한 나머지 조들은 colony의 평균적인 크기가 비슷하 나, 2조 표본의 colony는 비교적 작아 satelite colony와 구분하기 어렵다. 배지 에 colony가 나타난 개수를 비교하면 1조와 2조가 가장 많고, 3조와 4조의 표 본이 가장 적다. 조교의 표본은 놀랍게도 3·4조의 표본보다는 비교적 colony의 개수가 많다.

Discussion
이번 실험 과정에서 competent cell을 도말할 때에는 너무 센 힘을 주지 않 도록 조심해야 한다. [그림 3]과 같이 1조는 E. coli를 펴 바르는 과정에서, 과 한 힘을 주어 agar가 일부 찢어졌다. 그럼에도 불구하고 배양은 순조롭게 진행 되었기 때문에 실험 결과에 큰 영향을 주지는 않았다.

참고 자료

Neil A. Campbell et al. (2017). Biology: A Global Approach (11th ed.). New York, NY: Pearson. Leonard, A. C., & Méchali, M. (2013). DNA replication origins. Cold Spring Harbor perspectives in biology, 5(10), a010116. doi:10.1101/cshperspect.a010116 Mott, M. L., & Berger, J. M. (2007). DNA replication initiation: mechanisms and regulation in bacteria. Nature Reviews Microbiology, 5(5), 343-354. doi:10.1038/nrmicro1640