Gram staining 결과

최초 등록일
2018.07.11
최종 저작일
2017.05
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Purpose
A. 그람염색에 대한 그람 양성균과 그람 음성균의 반응을 관찰한다.
B. 저번 실험에서 배양한 미생물의 그람 반응 여부를 확인해본다.

3. Method
A. 그람 양성균 관찰
1. 슬라이드 글라스를 70% 에탄올로 소독한 후 알코올램프에 말린다.
2. 증류수를 슬라이드 글라스에 두세방울 떨어뜨린 후 슬라이드글라스를 기울여서 증류수가 골고루 퍼지게 한다.
3. 백금이로 배지의 Staphylococcus 콜로니를 콕 찍어 슬라이드 글라스 위 물에 푼다
4. 슬라이드 글라스가 마를 때까지 알코올램프로 가열해 미생물을 고정시킨다.
5. 크리스탈 바이올렛 용액을 스포이드로 채취, 세포 접종부위를 살짝 피해 2-3방울 얹은 후 고르게 바른다.
6. 1분 후 증류수로 씻어낸다.
7. 아이오딘 용액을 새로운 스포이드로 채취, 세포 접종부위를 살짝 피해 2-3방울 얹은 후 고르게 바른다
8. 1분 후 증류수로 씻어낸다.
9. 100% 에탄올 용액을 새로운 스포이드로 채취, 세포 접종부위를 살짝 피해 2-3방울 얹은 후 고르게 바른다
10. 정확히 10초 후 증류수로 씻어낸다.
11. Safranin 용액을 새로운 스포이드로 채취, 세포 접종부위를 살짝 피해 2-3방울 얹은 후 고르게 바른다
12. 30초 후 증류수로 씻어낸다
13. 커버글라스를 얹는다
14. 광학현미경으로 관찰한다

B. 그람 음성균 관찰
A의 1~14를 E.coli 콜로니를 사용해 반복한다
C. 조별 샘플 관찰 (2조-정수기)
A의 1~14를 조별로 배양한 미생물의 콜로니를 사용해 반복한다

4. Materials
Staphylococcus 배양 LA평판배지, E.coli 배양 LA평판배지, 조별 미생물 배양 LA배지 (2조-정수기), 알코올램프, 라이터, 라텍스 장갑, 슬라이드 글라스, 70% 에탄올, 증류수, 백금이, 스포이드 4개, 크리스탈바이올렛 (CV)용액, 아이오딘 용액, 100% 에탄올 용액, safranin용액, 커버글라스, 광학현미경

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