동물실험기술론 과제실험동물의 유전Mouse를 유전학적으로 분류하면 근교계(inbred strain), 폐쇄군(Outbred, Closed colony), 변이계(Mutant strain), 교잡종(Hybrid), 잡종(Mongrel)으로 분류 할 수 있다. 근교계는 극도의 근친교배에 의해서 확립된 계통으로 형매교배를 20대이상 계속하고 있는 계통을 말하며 유전학적 동질성이 매우 높고 실험처치에 대해 균일한 반응이 나타낸다. BALB/c, C57BL.6, C3H, DBA 등이 있다. ICR같은 폐쇄군은 근교계에서 유래하여 일정한 집단 내에서만 번식이 계속되고 있는 군으로 형매교배의 계속을 중지한 군과, 외부로부터 반입 없이 일정한 집단내에서만 5년 이상 번식하고 있는 군으로 구분된다. 변이계는 유전자 기호를 가지고 특정한 계통을 표현할 수 있다. 변이계의 표시법은 근교계와의 혼동을 피하기 위하여 로마자의 대문자를 피해서 표시한다. 실험동물로서 변이계가 중요한 이유는 유전적 특징이 특정 표현형으로 나타나기 때문이다. 교잡종은 서로 다른 종간 교잡종으로 F1, F2, 환원교잡종, 3원잡종, 4원잡종 등이 있다. 잡종은 유전적 컨트롤이 안되어 있는 일반적인 동물로 야생동물이나 야견, 들고양이 등이 있다. 근교계와 변이계는 유전적 검토가 되어 있어 여러 연구분야에 사용되고 있다. 폐쇄군은 바이러스, 기생충에 대한 약제 연구에 사용되고, 장기간에 걸친 실험에 이용된다.Rat의 경우 mouse처럼 근교계, 변이계, 폐쇄군으로 분류할 수 있다. ACl, BN, NUF, LEW, F344 등이 근교계에 속한다. 주로 사용되는 Rat은 폐쇄군으로 SD, Wistar, wistar-King 등이 있다. 변이계에는 nude, Brattleboro 등이 있다. 각각의 계통의 기원이 된 종에 비교하면 우전적 특성에 차이가 있다.해부생리Mouse의 수명은 2~3년이며 계통별로 다르다. 번식기는 7~18개월이며 평균산자수는 6~10마리이다. mouse의 폐는 좌측 폐는 단엽이고, 우측 폐는 4엽[전엽(superior), 중엽(middle), 후엽(inferior), 대정맥후엽(postcaval)]으로 나뉜다. 대부분의 수컷이 암컷보다 무거우며, 사구체(glomeruli)의 지름은 74㎛이다. 농축된 오줌을 배설하며, 다량의 단백질과 taurine, tryptophan. creatine 등이 배출된다. 하악 타액선에서 타액(seromucoid)만 분비한다. 흉선은 성성숙 시기에 최대로 커지고 줄어든다. 혈압은 93~138mmHg, 심장박동은 310~840beats/min 이다. 치아는 계속 자라나는 하나의 절치(incisor)와 세 개의 후구치(molar)로 구성되어 있다.Rat은 출생시 털이 없고 눈과 귀가 막혀있는 상태이며 체중은 5-6g정도이다. 폐는 5엽으로 구성되어 있다. 우측 폐가 4엽[전엽,중엽,부엽,후엽]으로 나뉜다. 왼쪽 신장이 오른쪽 신장보다 뒤에 있다. 수컷은 기존의 정낭선,요도구선,포피선와 아울러 응고선이 있어 사정된 정자가 역류되지 않도록 하는 질전의 성분을 분비한다. 땀샘과 편도가 없다. 담낭이 없어 담즙이 바로 십이지장으로 분비되며, 췌장은 십이지장에서 위비장대망막까지 퍼져있다. 간은 좌엽과 오른쪽은 3엽으로 구분되어 있다. 계속 영구치가 자라는 일생치형(monophyodont)으로 생후 10일이면 절치가 나온다.번식Mouse 수컷의 생식기는 정소, 정소상체, 정관, 정낭, 응고선, 전립선, 요도구선, 포피선, 음경 등으로 되어있다. 정낭 내측에 부착되어 있는 응고선으로부터의 분비물은 교미 후에 질내에서 정낭의 분비물을 응고시켜 질전(vaginal plug)을 형성한다. 암컷의 생식기는 난소, 난관, 자궁, 질 및 음핵선 등으로 되어있다. 마우스의 자궁은 중복자궁으로 1쌍이 존재한다. 5쌍의 유선을 갖고 있다. 난포발육은 3주부터 시작되어 30일에 성숙된다. 수컷은 성성숙이 약간(약 2주) 늦다. 성주기는 4~5일이며, 교배, 발정, 배란은 보통 야간에 일어난다. 교배의 확인은 질전(vaginal plug)으로 확인할 수 있다. 임신기간은 21일이다. 암컷의 가임기간은 1년 정도이며 산자수는 10~12마리 정도이다.Rat의 수컷의 교미 가능 시기는 60일령경이다. 암컷은 6쌍의 유선을 가지고 있으며, 임신은 60-70일령부터 가능하다. 성주기는 4-5일이며 임신기간은 21-23일로 짧은 편이고 산자수는 8-14마리이며 포유기간은 21일이다.영양사료실험동물의 사료(feeds/feedstuffs)는 실험의 정확성 및 재현성 구현뿐만 아니라 생명과 건강 유지, 성장 번식 등 생리적 기능과 관계있는 물질이다. 동물에 필요한 영양소는 수분, 탄수화물, 단백질, 무기질, 비타민이 있다. 실험동물 사료는 NRC(National Research Council) 사양 표준 실험동물 영양소 요구량 기준으로 만들어진다.사료의 종류에는 일반 사료, 정제 사료, 화학적 정제 사료가 있다. 일반 사료는 정제되지 않은 여러 물질들이 동물의 요구량에 맞추어 제조하며, 불균질성으로 화학적 구성 성분이 다를 수도 있다. 정제 사료는 정제된 원료 서분을 이용하여 배합된 사료로 casein, starch, cellulose등으로 구성되어 있다. 화학적 정제 사료는 순도가 높은 정제된 영양소를 이용하며 사료의 오염 방지, 성분의 정확성 및 사료 균질성 유지가 좋으나, 가격이 비싸다.실험동물의 일반적인 식이 급여량계통사료종류사료 섭취량 (g/day)Mouse고형사료2~5Rat고형사료15~30G.P고형사료/야채25~50Hamster고형사료10~20Rabbit고형사료100~150Dog고형사료250~450Cat고형사료170~250사료를 선택할 때 사육 목적과 종, 계통, 성별, 연령, 성장 시기뿐만 아니라 연구 목적, 동물의 기호, 보존성을 고려하여 배합과 형태 등을 고려해야한다. 뿐만 아니라 ‘일정 원료, 일정 배함’ 원칙에 따라 선택해야한다. 좋은 사료는 동물이 이용 가능한 모든 영양소가 풍부하며 무독하고 쉽게 변질되지 않으며, 구입과 저장이 용이한 것을 의미한다.
동물실험기술론 과제Transgenic mouse와 Knock-out mouse는 specific gene을 gene editing을 통하여 인위적으로 변형시킨 GEM (genetically modifiable) models로 변형된 gene이 다음 세대에 전달된다는 특징을 가지고 있다. Oncogene, dominant-negative tumor suppressor gene 연구에 많이 사용된다.▶ Transgenic mouse (TG mouse)과거에 단순한 overexpression을 의미하였다(gain of function). Overexpression, gene expression profiles, dominant negative mutant, insertional/point mutant, complementation 연구에 주로 사용된다. 하나 혹은 더 많은 foreign genes이 chromosome DNA에 인위적으로 들어가 있으며, Fertilized egg나 blastocyst의 pronucleus에 foreign genes을 injection한 후 foreign genes은 chromosome DNA에 랜덤하게 들어간다. 그로 인해 어디가 transgenic 되었는지 알기 어려우며, 다른 copy number의 insert가 생긴다. 이것이 transgenic mouse에 randomly, multiple copies라는 특징이 생기는 이유이다. 종류로 크게 2가지가 있다. Classical transgenic mouse는 모든 조직에서 target gene을 overexpression시킨 것이고, Conditional transgenic mouse는 장기, 조직, 시기 specific하게 overexpression되도록 control할 수 있는 것이 있다.Transgenic mouse 제조에 이용되는 DNA vector Design 시 prokaryotic vector sequence를 주로 사용한다. Interest gene, 발현 위치제작 과정을 간단히 정리하면 DNA vector construction하고 gene을 purification 한 다음 Microinjection을 한다. Transgene이 injection된 fertilized egg를 Pseudopregnant female에 transfer 시키 나온 새끼의 PCR, western blot을 genomic DNA를 이용하여 insert를 확인한다.▶ Knock-out (KO) mouseSpecific gene의 발현을 제거한 mouse를 말한다(loss of function). TG와 동일하게 Classical knock-out mouse와 Conditional knock-out mouse로 나눌 수 있고 TG mouse와 달리 target gene을 제거하여 발현되지 않게 한다. Gene의 15%가 KO 실행 시 mouse가 출산 전에 죽거나, 성장 시 문제가 생겨 성체로 자랄 수 없다는 단점이 있다.KO mouse 제작을 위해 Targeting vector를 만들고 이를 ES cells에 injection하여 HR(Homologous recombination)을 통해 chimeric mouse을 얻는다. 이 mouse를 brother-sister mating을 통해 KO mouse로 만들고 유지한다. Insertional mutagenesis를 이용한 gene trap을 이용하여 KO mouse를 대량 제작하기도 한다. 최근 gene editing(ZFN, TALEN, CRISPR-Cas9, CRISPR-Cpf1 등)을 이용하여 mutation된 embryo를 만든다. 이를 통해 chimeric mice를 만들고 그 mouse를 교배한다. ES cell를 사용하는 이유는 다량의 ES cell를 쉽게 얻을 수 있고 KO mouse의 형질을 다음 세대에 전달할 수 있기 때문이다.Conditional knock-out mouse의 경우 site-specific recombination system(Cre-loxP, Flp-F1 and Rag 2 KO, NOD/SCID, NSG, NOG 등이 있으며 주로 nude, SCID, NOD/NSG를 많이 선택한다.- Nude : ectopic에서 많이 사용하는 종으로 작고 털이 없으며 상대적으로 순하다. 흉선이 없어 mature T cell이 없으나, macrophage와 NK cell activity가 높으며, SPF에서 2~18 months 생존한다.- NOD/SCID(Non-Obese Diabetic/Severe Combined Immune Deficiency) : MHCⅠ과 Prkdcscid gene이 deficit 있다. Mature T cell과 B cell이 없고 NK cell, macrophage, granulocyte activity가 떨어져 있으며 Cytokine signaling pathway의 deficit 되어 있다. 그로 인해 선천적(Innate Immunity), 후천적(Acquired Immunity) 면역 모두 떨어져 있기에 immune therapy는 어렵다. 또한 NOD는 상대적으로 사나워서 handing에 어려움이 있을 수 있다. SPF에서 ~37weeks이면 대부분 사망하며, 흉선림프종이 주된 사망 원인이다.- NSG : 면역력이 가장 떨어져 있는 종이다. Mature T cell, B cell, NK cell 이 없으며, Cytokine signaling pathway의 deficit가 되어 있다. SPF에서 ~89weeks이면 대부분 사망한다.▶ Transplantation cancer modelXenograft model (Xenogeneic) : 아종을 이식하며 주로 human cancer를 이식한다. Immune compromised mice에 human/patient’s tumor를 주로 이식한다. Tumor immunology, micro-environment 연구엔 사용이 적으며 비정상적인 vascularization을 보인다.Syngeneic model (Syngenic) : Spont가 생기지 않을 수 있다. Cell의 size 측정 시 시각적으로 확인하면 실험자의 주관이 들어가고 보이지 않는 곳에서 cancer가 생기게 되면 측정이 어렵기에 lucifer를 이용해 측정하는 것이 보다 정확하다.-Metastasis xenograft model→ experimental(intravenous, intracardiac) metastasis : metastasis에서 drug 효과 확인에 주로 사용되며 ovary cancer을 주로 사용한다. Intracranial은 bone, liver, brain에 주로 사용된다.→ orthotopic metastasis : orthotopic metastasis xenograft model : colon, ovary cancer을 주로 사용한다. experimental(intravenous, intracardiac) metastasis와 마찬가지고 metastasis에서 drug 효과 확인에 주로 사용된다.-Orthotopic xenograft model : tumor growth의 mimic micro-environment 연구에 주로 사용된다.-Metastasis syngeneic tumor models→ experimental(intravenous, intracardiac) metastasis : metastasis에서 drug 효과 확인에 주로 사용되며 breast cancer을 주로 사용한다. Intracranial은 bone, liver, brain에 주로 사용된다.→ orthotopic metastasis : orthotopic metastasis xenograft model : breast cancer를 주로 사용한다. 원말성 종양 절제 후 전이 모델로 사용한다.Lung metastatic model은 tail vein injection이 거의 유일하게 이용된다. 폐에 혈관이 많기에 이를 이용한다.Intraperitoneal injection은 복강에 넣어서 키우는데 단점은 복부는 3D이지만 el 수립이 되면 동일 혹은 비슷한 tumor patient 치료 시나리오를 예측할 수 있다.▶Humanized mouse modelblood tumor 연구에 주로 사용한다. tumor와 면역 세포 모두 human이여야 실험의 의미가 있다. Patient 로부터 유래한 Leukaemic/lymphoma cells 혹은 healthy donor의 blood/BM cells을 가지고 실험한다. 크게 Humanized CD34+ (huCD34) Mouse Models, Humanized PBMC (hPBMC) Mouse Models, Knock-in Humanized Mouse Models로 정리된다. 이들을 가지고 immune checkpoint inhibitors 연구를 주로 진행한다.▶ Chemically induced tumor modeltumor-specific immune response와 같은 cancer immunotherapies의 연구가 많아지면서 model 수립이 증가되고 있다. Carcinogen을 주입하여 tumor 생성을 유도한 후 vaccine 연구나 surgical resection 후 재발 확인으로 많이 사용한다. 그러나, carcinogenic mouse는 human cancer를 대변하기 어려운 경우가 많다. HCC(hepatocellular carcinoma) model의 경우 NASH, HFD를 주로 사용하고, Lung cancer model의 경우 Urethane, Aflatoxin, Tabaco 같은 carcinogenic material을 사용한다.▶ GEM (genetically modifiable) tumor model정상면역 기능 mouse에서 자생적으로 암 생성되는 model이다. 다양한 oncogene에 의해 발생하는 model을 제작할 수 있으며 발현 시기와, 위치를 조절할 수 있다. Preclinical model과 그의 치료법의 개발에 중요한 preclinical model이다. Cre/loxP recomb
자기소개서학부에서 전공하는 동안 가장 흥미가 있었던 분야는 면역입니다. 이 분야를 좀 더 심도 있게 공부하고 연구물을 내는 것이 목표입니다. 이 분야에 흥미를 느끼기 시작한 것은 대학교 2학년 무렵이었습니다. 대학교에 처음 입학하여 막막하기만 했던 실험 과목이 가장 흥미 있는 과목이 되었고, 특히 세포생물학 등의 이론 수업이 실험 수업과 연결되며 실험 내용이 이해될 때 즐거움을 느꼈습니다. 그 이후로 실험수업에서의 제한된 실험 시간이 너무 아쉬웠습니다. 실험의 모든 과정을 보고 적극적으로 참여하고 싶은 갈증이 생겼습니다. 그러던 중에 연구실에서 실험을 가까운 곳에서 보고 연구참여 조교님의 지도 아래 혼자 실험을 할 수 있는 기회를 잡았습니다. 이 때 수업시간에 하기 어려운 인슐린 투여, 실험동물 수술 등 실험들을 보고 공부할 수 있었습니다.그 이후에도 관련된 공부를 더 하고 싶었습니다. 또 다양한 실험 경험을 쌓고 싶어서 3학년 여름방학에 교내 인턴과 이번 7월에 인턴십을 하였습니다. 인턴으로서 연구참여자분들께 논문을 읽는 방법부터 연구실에서 이루어지는 기초적인 buffer 만들기, Western blot, primary cell culture, PBMC 등 실험을 배울 수 있었습니다. 이 때의 경험은 Nano drop, PCR 등 기기를 사용할 수 있는 기회들이 있었고, 그의 작동원리를 이해하는 데 도움이 되었습니다. 또한, 간단한 실험을 진행하고 결과에 대해 discussion을 받으며 실험 과정에서 생길 수 있는 차이에 따른 결과의 차이에 대해서도 이해할 수 있었습니다. 교내 인턴십을 통해 교내 포스터 대회와 발표대회에 참가하여 입상할 수 있었습니다. 인턴을 하면서 연구자로서 적성을 확인하였고, 대학원에 진학에 진학하고 싶다는 생각이 들었습니다. 그러다 교수님께서 계시는 연구실을 알게 되었고, 이 곳으로 진학을 희망하게 되었습니다.
Korean Political Economy Midterm ExamDiscuss the social, political and economic changesthat Korea has undergone since the end of World War II.Discuss the role of “Middling Grassroots”for democratization in Korea6. Discuss the overview of Korean form of government.3. Discuss the social, political and economic changes that Korea has undergone since the end of World War II.Korea is a country with a distinctive form that has been divided by the Second World War and has continued to this day. Social, political and economic changes is very unusual. Korea was liberated from Japanese colonial rule. Korea was segregated and occupied by the Soviet Union and the United States. It became difficult to establish an independent political system for the Korean people. With the nation divided and occupied by two ideologically opposing forces, a whole spectrum of political leaders appeared, and several youth, student, women's religious and cultural groups were organized with various political and socialibility that continued political instability would undermine all previous economic accomplishments. After Lee SyngMan resignation, in the second republic the economic growth was stalled by the economic uneasiness such as the social unrest of the 4.19 revolution and the increase of labor movement and demonstration.The third and fourth republics were founded by the military affairs of ‘Park ChungHee’. Capital accumulation has been achieved by the economic development plan and a few have become capital. Industrialization has increased the number of workers. And the labour movement has become more active for their rights. Dictatorship was achieved. ‘Kim DaeJung’, a politician who resisted dictatorship, was hijacked in Japan, and people did demo in large and small for liberal democracy.It is undeniable that the industry has been influenced by the Park JungHee government's initiative and has greatly influenced Korea's economic growth. However, at the time, with the help of the state, conglomrea. It has a form of democracy in which groups and individuals can express their opinions. Korean is truce. As a result, Korean politics, society, and economy can be viewed as a somewhat unstable country that maintains a situation that is changing by North Korea. The relationship between North and South Korea is improving with the April 27 North - South talks.Korea GNI-from http://mardream.tistory.com/2825. Discuss the role of “Middling Grassroots” for democratization in Korea.‘The middling grassroots’ is a composite concept of the middle class and the people. It refers to a reform-oriented groups that require a change by participating in rational social reform without compliance with the Convention and power. It is not a grassroots populist, but a "learned middle class" with a clear public identity. Explains why and how the middle class in Korea decisively joined the democratic movement in 1987 by drawing special attention to the role played by the ‘middling grassroots’. Examples are of Korea. They assert a challenge to all conventional authorities (anti-authoritarianism), respect for individual liberty and the self (individualism), the breaking of taboos (avant-gardism), more emphasis on openness and transparency (discursive culture), women's participation (gender equality), solidarity with workers and peasants (social justice) , pursuit of material comfort(materialism), commitment to principle rather than compromise (value commitment), horizontal association rather than vertical hierarchy (communitarianism), reflexive identity and cultural reinterpretation (radical hermeneutics), national autonomy and reunification (nationalism).For example, the beginning of the tie troop began in June 1987 during the democratic uprising. A reporter showed and descripted people who wearing white-shirt and tie people working in office came out and join the protesters at lunch time or after work time as tie troops. They took part in asserting their opinions at all. Finally they suour-year term, 244 members in single-seat Hyperlink "https://en.wikipedia.org/wiki/Constituency" o "Constituency" constituencies and 56 members by Hyperlink "https://en.wikipedia.org/wiki/Proportional_representation" o "Proportional representation" proportional representation. The South Korean judiciary is independent of the other two branches. The highest judiciary body is the Supreme Court, whose justices are appointed by the president with the consent of the National Assembly. In addition, the Constitutional Court oversees questions of constitutionality. Korea has implemented past cabinet system. Parliamentary is to distribute the power to check the executive and the legislature. Korea, however, became a form of separation of powers through the corruption of elections.The merit of the separation of legal, administrative, and judicial powers is to divide authority and to balance it. The president has the authority of executive power without confidence in the National Assembly durinK
담배 식물체에서에볼라 바이러스 백신 생산 방법서론본론1. 현황2. 정의2.1. 에볼라 바이러스2.2. 담배 식물체 & Agrobacterium2.3. zmapp3. 기술 및 원리3.1. 유전자 재조합3.2. 형질 전환3.3. 백신4. 팀원이 생각한 백신 계발 방법결론서론최근에 에볼라 바이러스의 감염이 서아프리카에서 큰 문제로 대두되고 있다. 그에 따라 에볼라 바이러스의 백신 개발이 시급한 상황이다. 현재 많은 연구가 진행 중에 있다. 일반적인 바이러스 백신은 계란을 이용하여 만들어 진다. 그런데 에볼라 바이러스의 백신 연구는 비용과 시간이 상당히 많이 들 뿐만 아니라 감염된 사람의 수에 따라가지 못할 만큼 적은 양이 생산된다. 그렇기에 최근 아그로박테리아와 담배 식물체를 이용하여 백신을 만들기 시작했다. 이것은 계란을 이용한 백신 생산보다 적은 양의 돈과 시간으로 많은 양의 백신을 생산할 수 있다. 아래에서 담배 식물체에서 백신을 생산하는 방법에 대해 알아보고자 한다.1. 현황에볼라 바이러스는 지역적으로 고립되어 자연 사멸했었는데 퍼져나가게 되었다. 현황은 다음 표에서 보이는 것과 같다.가봉에서는 1996년, 2001~2002년 수차례 더 에볼라 바이러스가 창궐해 총 156명이 감염됐고, 119명이 사망했다. 대규모 사상자는 에볼라 바이러스가 처음 발견됐던 콩고민주공화국에서 1995년 다시 발생했다. 이 당시 315명이 감염됐고 81%인 254명이 목숨을 잃었다. 바이러스 종류는 자이르형이었다. 2000년에는 콩고민주공화국 우측에 위치한 우간다에서 에볼라 피해를 입었다. 수단형 에볼라 바이러스가 유행해 425명을 감염시켰으며, 절반 이상인 224명의 목숨을 빼앗아갔다. 2006년과 2009년, 2010년을 제외한 모든 해에 에볼라 바이러스가 모습을 드러냈다. 콩고민주공화국을 중심으로 좌측의 콩고와 우측의 우간다 등 주로 아프리카 중부지역에서 감염 사례가 보고됐다. 특히 2007년 콩고민주공화국에서는 264명이 집단 감염돼 71%인 187명이 사망했으며, 같은 이지리아, 세네갈, 미국, 스페인 발병2. 정의2.1. 에볼라 바이러스에볼라 바이러스(Ebola Virus)는 필로바이러스과의 에볼라바이러스속 내에서 한 종에 속하는 바이러스의 총칭이다. 에볼라라고 불리는 경우에는 에볼라 바이러스를 지칭하는 것 외에도 이것이 일으키는 에볼라 출혈열(Ebola hemorrhagic fever; EHF)를 의미하기도 한다.에볼라 바이러스의 형태학적, 임상적 특성은 같은 과의 '마버그 바이러스'와 거의 같으며, 바이러스의 첫 발견 이래 지금까지 공식화된 다수 유행기록이 있다. 2014년 현재 서아프리카 전역에 바이러스가 퍼지고 있으며 이에 관해 WHO(국제보건협회)가 비상상태 선언을 고려중이다. 유니세프 등 여러 기관이 치료를 위해 돕고 있지만 임상시험이 완료된 백신은 아직 없는 상태이며 의료진까지 사망에 이르는 심각한 상황이 선언되고 있다.'에볼라'라는 이름은 처음 이 바이러스가 발견된 주변의 강 이름에서 유래한 것이다.1976년 중부 내륙 콩고민주공화국 북쪽의 작은 마을인 얌부쿠에서 처음 발견됐다. 이후 에볼라 바이러스는 약 15년간 자취를 감추다가 아프리카 서부로 옮겨와 1994년 가봉에서 52명의 감염자를 발생시켰다. 60%인 31명이 사망했다. 에볼라 바이러스는 자이르형, 수단형, 레스턴형, 코트디부아르형, 분디부교형 등 5가지 아형으로 구분되는데, 이 당시 발견된 건 1976년 콩고민주공화국 감염 때와 같은 자이르형이었다. 자이르형은 모든 아형 가운데 가장 빈번하게 발견되는 종류이기도 하다.에볼라 바이러스에 감염되면, 약 8~10일(짧게는 2일, 최장 21일) 간의 잠복기 후, 갑자기 심한 두통, 발열, 근육통, 오심, 구토가 나타난다. 발열이 지속되면서 심한 설사가 발생하고, 대개는 기침을 동반한 가슴통증도 발생한다. 전신에 기운이 없어지고, 혈압과 의식이 떨어지게 된다. 발병하고 5~7일째에 대개 구진 같은 피부발진이 나타나고, 이후에 피부가 벗겨진다. 이 시기쯤부터 피부와 점막에서 출혈경향을 확인할 수 있다. 이외에리키기도 한다. 담배속 식물은 남미와 열대지역이 원산이지만 멕시코 및 호주 원산종도 알려져 있다. N.tabacum은 열대에서는 다년생 이지만, 온대에서는 1년생초가 된다. 염색체수는 n=12를 기준으로, 2n=48의 복2배체이다. 담배의 종자는 대단히 작아 1g당 10,000~12,000립(粒)이나 된다. 또한 발아에 빛이 필요한 호광성 품종이 많다. 실험식물로도 널리사용하고 특히 식물바이러스 연구에 중요하다. 재배종으로는 황색종, 벌리(Burley)종, 오리엔트종 및 재래종 등이 있다. 실험용으로 사용하는 것은 Bright Yellow, White Burley, Xanthi, Samsun(모두 오리엔트종) 등으로, 모두 담배모자이크바이러스(TMV)에 전신 감염되어 모자이크를 생성한다. Burley21,Ky57(모두 Burley종)은 Nicotianaglutinosa의 N인자를 유전자로 보유하고 있으며, TMV저항성 품종으로 재배하여 실험용으로 사용한다. Xanthi, Samsun에 N인자를 도입한Xanthi-nc, SamsunNN은 TMV 접종으로 국부괴사병반이 생겨 TMV의 생물정량에 이용한다.Agrobacteria : 흙 속에 사는 운동성을 지닌 세균으로 그람-음성(Gram-negative)균이며, 식물뿌리에서 분비되는 영양분에 의존하여 살아가는 박테리아이다. 뿌리와 줄기의 경계부에 근두암종병(crown gall disease)을 일으키는 원인균으로 Agrobacterium spp 내에 존재하는 유전자가 식물의 게놈으로 전달되어 근두암종병을 일으킨다. 근두암종의 형성은 Agrobacterium 의 Ti plasmid에 의해 결정(tumor inducing plasmid)되며, Ti plasmid의 일부(T-DNA)가 Agrobacterium으로부터 식물세포로 전이되어 기주식물(host plant)의 게놈에 삽입된다. 유용한 유전자를 Agrobacterium을 이용하여 식물에 도입하여, 식물세포에 유전자를 삽입하는 것은 유전공학기술에 중요한 역할을 한다. 사용을 허용하였다. 최근 캐나다와 미국의 국제 연구 그룹이 ZMapp을 개량하여 붉은털원숭이에 투여한 결과 모든 개체가 회복, 곧 추가적인 임상시험에 들어갈 예정이라고 한다.3. 기술 및 원리3.1. 유전자 재조합원리① 한 생물의 DNA의 일부를 분리하고, 그 자리에 원하는 기능을 가진 다른 생물의 DNA 조직을 연결하여 재조합시킴으로써 새로운 DNA를 만들어 내는 기술.② 유전자의 합성이나 분해에 관여하는 효소가 밝혀짐으로써 서로 다른 두 종류의 유전자를 분리해서 재조합한 후 다른 세포에 집어넣어 새로운 유전자 조합을 가진 생물체를 대량으로 생산할 수 있게 되었음.③ 유전자 재조합에 관여하는 효소에는 제한 효소와DNA 결합 효소가 있음. 이들 효소를 이용하여 DNA를 끊거나 이어줄 수 있는데, 이렇게 만든 잡종 DNA를 재조합 DNA라고 하며, 이 잡종 DNA를 다루는 것을 유전자 조작이라고 함.방법플라스미드 분리(원심 분리) → 플라스미드 잘라 내기(제한 효소) → 목적 유전자 얻기(분리, 인공 합성) → 플라스미드와 목적 유전자 결합(DNA 결합 효소) → 숙주 세포에 처리 → 숙주 세포 배양특징DNA 전체를 융합하거나 조작하는 것이 아니라, 필요한 한두 개의 유전자만 골라서 재조합하는 것이므로, 종이 다른 생물체의 유전자끼리도 조합할 수 있음.기술이용① 인슐린, 인터페론 등과 같은 유용한 단백질의 대량 생산에 이용됨② 유전자 변형 생명체를 개발하는 데 이용됨③ 유전적으로 문제 있는 부분을 정상인 것으로 대체하는 유전자 치료에도 이용됨3.2. 형질 전환새로운 DNA를 삽입하거나 유전자클로닝에 필요한 숙주를 사용하기 위해서, 유전자 전달방법이 필요한데, 이를 형질전환이라고 한다.형질전환(transformation) 방법① 외래 DNA를 숙주세포가 받아들이도록 하기 위하여 즉, 형질전환 되기 위해 화학적인 처리가 필요함.② 염화칼슘과 같은 염의 용액에 세균을 처리. 재조합 DNA가 있는 가운데 열 충격을 주는 것. (단, 진핵생물은 더 복잡한 방법이 필요)되게 삽입되는 DNA를 형질전환 하는데 사용.⑥ 미세주입(microinjetion): 다세포 동물의 모든 세포로 유전자를 삽입.클로닝 벡터벡터(vector): 삽입된 DNA를 숙주세포로 운반① 숙주세포 안에서 복제될 수 있게 복제 시작점을 가져야만 함.② 정제과정에서 분해됨이 없도록 충분히 작아야 함.③ DNA 절편을 클로닝하기 위한 제한효소 부위를 여러 개 가지고 있어야만 함④ 클로닝 운반체가 세포로 들어갔는지를 알 수 있고 외래 DNA가 벡터 안으로 삽입되었는지를 알려주는 표지를 가지고 있어야 함형질전환의 선별 : 형질전환을 선별하는 방법에는 여러 가지 방법이 있다. 흔히 쓰이는 방법으로는 항체저항성이나 영양요구를 사용하는 방법이 있다. 그리고 복제기술에서 선별을 할 때에는 β-galactosidase를 암호화하는 lacZ유전자를 사용하는 blue white screen의 방법이 쓰인다. 또 다른 것으로 흔히 쓰이는 방법은 녹색형광단백질(GFP)을 사용하는 방법이 있다.3.3. 백신에볼라를 예방하기 위해 백신개발이 시급하다. 백신을 통해 면역력을 갖춘 사람은 아무리 에볼라가 공격해도 끄덕하지 않는다. 그렇다면 에볼라 백신을 빨리 만들어 주사하면 되지 않는가. 그게 그렇게 쉽지 않다. 일반적으로 많이 쓰이는 생백신은 에볼라나 에이즈 같은 치명적 질병에는 섣불리 사용하기 어렵다. 좀 더 안전한 백신이 없을까. 과학자들은 처음에 바이러스형 백신을 생각했다. 인체에 무해한 바이러스에 에볼라의 유전자 일부를 넣어 우리 몸에 넣는 것이다. 바이러스가 인체세포를 이용해 우리 몸 안에서 에볼라의 당단백질을 만들면 우리 몸은 그것을 공격하는 항체를 만들고 그 과정에서 면역력이 생긴다. 그러나 막상 해보니 바이러스가 인간의 세포에 잘 들어가지 않았다. 번번이 실패한 과학자들은 두 번째 대안을 생각해냈다. 이번에 9월부터 미국 국립보건원(NIH)이 임상시험에 들어가는 DNA형 백신, 다른 말로 플라스미드백신이다. 플라스미드는 고리 모양으로 생긴 DNA인데 다른 세포 속에 들어방법