[분자유전학실험] Genomic DNA isolation-main

목차

없음

본문내용

4. Purpose : bacteria의 genomic DNA를 정제하는 방법을 습득하고 그 원리를 이해한다.

5. Introduction :
DNA를 얻는 가장 손쉬운 방법은 박테리아로부터 추출하는 것이다. 몇 방울의 박테리아 배양액은 대부분 목적에 충분한 양의 DNA를 제공한다. 첫째로, 박테리아 세포벽은 세포벽의 구성성분인 펩티도글리칸층을 분해하는 효소인 라이소자임에 의해 쉽게 분해된다. 이어지는 계면활성제의 처리는 세포막의 지질을 녹인다. EDTA와 같은 킬레이트제는 외막 구성성분과 결합한 금속이온을 제거하기 위하여 특별히 그람음성 박테리아에 사용된다. 이러한 시료에서 DNA를 포함한 세포질 함유물은 그때 용액으로 방출되고 이어지는 일련의 단계에서 정제된다.
두 가지 일반적인 과정인 원심분리와 화학적추출이 DNA 정제를 위해 이용된다. 원심분리의 원리는 다음과 같다. 시료를 고속으로 회전시키고, 원심력은 비교적 크고 무거운 성분을 튜브의 바닥에 침전하도록 한다.

참고 자료

*분자생물학(유전혁명의 이해)/ David P. clark(역자: 안정선 외)/ 월드 사이언스/2006년/p568-570
*http://www.bmbreports.org/bnews/bnews/pdf.php?data=MTMwMTI4MTVAcGRmX3JhaW50cmFjZV9sZWV5c0AyMDAxMDYzMV83XzA4LlBERg== (BMB reprts Vol.46 No.9 [September 2013])
*http://www.intronbio.com/product/View.asp?pIdx=471&pageno=1&MainItem=A&SubItem=B (iNtRON BIOTECHNOLOGY 홈페이지 main product)
*GENE CLONING & DNA ANALYSIS(AN INTRODUCTION)6th / T.A.BROWN/WILEY-BLACKWELL/2011년/ p33