Blotting 기법

소개

Blotting 기법인
SOUTHERN BLOTTING, NORTHERN BLOTTING, WESTERN BLOTTING에 관한 소개를 한 레포트입니다.

목차

1. SOUTHERN BLOTTING
2. NORTHERN BLOTTING
3. WESTERN BLOTTING

본문내용

사람의 유전자를 제한요소로 절단하면 여러 크기의 DNA절편이 생긴다. 다양한 절편을 전기영동하면 절편의 크기에 따라 분리된다.
한천 겔에 있는 DNA를 흡착지로 이전하면, 한천 겔에 있는 위치와 정확하게 일치하는 곳에 DNA절편이 있게 된다.
겔에서 흡착지로 이전시키는 기법이 포함되기 때문에 southern 이전을 동의어로 사용한다.
흡착지에 있는 분절은 크기에 따라 약 300만개 정도가 있기 때문에 이 중에서 원하는 한 가지의 분절을 찾아낸다는 것이 간단한 일은 아니다.
여기에 찾고자 하는 DNA의 전부 혹은 일부분을 가지고 있다면 이것을 찾고자 하는 DNA의 소식자로 사용하여 흡착지 위의 DNA와 소식자 사이의 보합되는 위치에 결합되는 DNA-DNA 보합결합의 기법을 이용하여 원하는 DNA분절의 유무를 확인할 수 있다. southern blotting을 응용함에 있어 제한효소 분절길이의 다형성(RFLP)을 이해하는 것이 필수적이다.
RFLP의 원리는 DNA를 제한효소로 절단시키면, 절단된 유전자 길이는 개인간에 다양하다는 원리를 이용한 유전자 분석법이다.

실험 용도
Southern 이전은 지놈 DNA의 분절의 확인에 널리 이용되고 있으며 플라즈미드, 코스미드, 박테리오 파아지 등의 DNA를 확인하는 데도 널리 이용되는 유전자 조작 기법이다.
southern 이전법을 지놈 DNA의 분절을 확인하는데 이용될 때는 RFLP라는 용어를 흔히 사용한다. southern blotting의 임상적 이용은 다음과 같은 예를 들 수 있다.

유전질환의 진단
southern blotting을 이용하여 DNA진단이 가능한 질환으로는 혈우병, 페닐케톤뇨증, 다낭성신장, 선천성부신증식증 등이 있다.

HLA 항원의 결정
소량의 DNA로 분석할 수 있어 필요하면 반복검사를 할 수 있고, HLA항원은 검사할 조직에 따라 발현 항원이 다르나 DNA는 항상 일정하며 혈청학적으로 발견이 안된 미세띠를 통하여 질병 표지를 확인함과 동시에, 질병 발생의 예견자로 이용할 수 있다.

참고자료

· 없음