단백질 기술

목차

1. 분리 기술
2. 정제
3. 크로마토그래피(Chromatography)
4. 전기영동(electrophoresis)
5. 단백질의 초기 분석
6. 아미노산 성분
7. 아미노산서열 분석
8. 분자량 결정
9. X-선 결정학

본문내용

▷ 분리 기술
단백질은 일반적으로 수백 개의 유사한 분자들이 들어있는 세포나 생물체로부터 추출되기 때문에 확인 방법이 특이적이어야 한다. 뿐만 아니라 사용하는 실험 방법들이 편리해야 한다. 단백질이 효소인 경우 기질(반응물)의 소모 또는 생성물의 형성을 측정한다. 즉, 특정 파장의 광흡수 차이를 측정하는 분광광도계를 사용한다. 항원과 특이적으로 결합하는 항체는 그 가시도를 증강시키기 위해 방사성 또는 형광성 ‘태그(tag)’에 연결되어 있다. 단백질 추출은 세포 파쇄와 균질화로부터 시작한다. 흔히 이 과정 다음에는 분획원심분리가 이어지고 단백질이 세포소기관의 성분일 경우에는 밀도구배 원심분리가 이어진다.

▷ 정제
단백질 정제를 위해 여러 미숙한 방법이 사용된다. 그 한 예로 같은 고농도의 염을 단백질 용액에 첨가하여 단백질을 침전시키는 염석(salting out)이 있다. 각 단백질은 특징적인 염석점(salting-out point)을 갖고 있기 때문에 이 방법으로 많은 불순물을 제거할 수 있다. 단백질이 세포막에 단단히 붙어 있을 경우 유기용매 또는 세척제를 사용하여 추출한다. 보통 투석은 염, 용매와 세척제 같은 저분자량의 불순물을 제거하는 데 사용된다.
그러나 단백질이 점점 더 정제될수록 더욱 더 정교한 정제 방법이 동반되는데 이에는 크로마토그래피와 전기영동 등이 있다.

▷ 크로마토그래피(Chromatography)
크로마토그래피는 단백질 정제에 매우 소중한 방법으로 그 기술이 다양하다.

참고자료

· Trudy McKee & James R. McKee(박인국 역). 생화학 길라잡이. 라이프사이언스. 2009. 108~113