[병원미생물학실험]그람염색 예비레포트

목차

1. 실험 제목

2. 실험 소개

3. 개요
(1). 염색이란?
(2). 단순 염색
(3). 매질 염색
(4). 항산성 염색
(5). 포자 염색
(6). 그람 염색
(7). 현미경의 종류와 정의

4. 실험에 사용하는 시약과 도구

5. 실험방법

본문내용

⑹ 그람염색(Gram staining)
⑹-1. 그람염색의 목적
세균의 동정, 분류의 중요한 지표인 그람 양성균과 음성균을 구분하고 동시에 분별염색의 원리와 조작법을 습득한다.
⑹-2. 그람염색의 원리
분별염색은 열고정된 도말표본에 적어도 세 가지 이상의 염색시약을 사용하여 이루어진다. 먼저 1차 염색시약으로 균체를 염색하고 2차 염색시약과의 대비를 보이기 위해 탈색제를 쓴다. 이때 세포구조물질의 성질차이에 의해 1차 염색시약이 제거되기도 하고 되지 않기도 한다. 그리고 2차 염색시약 혹은 대응 염색시약으로 염색하여 1차 염색시약과 대비되는 색을 나타낸다. 즉 1차 염색 후 탈색된 균체는 2차 염색시약에 의해 염색이 되지만 탈색되지 않는 균체는 2차 염색시약을 흡착하지 못하고 그대로 1차 염색시약의 색을 유지하게 된다. 이러한 분별염색을 세균에 응용한 가장 중요한 염색법이 그람염색법인데 이는 1884년 Christian Gram에 의해 고안되어 명명되었다. 이는 세균 세포벽의 성분 조성에 따라 그람 양성균과 음성균으로 나누어지고 그람 양성균에는 대부분의 구균과 유표자 간균이, 그람 음성균에는 대부분의 간균이 속하고 있다.
그람염색에는 4가지 시약이 사용되고 그 원리는 다음과 같다. 먼저 1차 염색시약으로 Crystal Violet의 염기성 시약을 사용하며 이에 의해서 모든 세포는 보라색으로 염색된다. 그 다음 Crystal violet 시약을 세포에 강하게 고정시키기 위해 매염제로 Gram’s iodine 시약을 사용한다. 이는 1차 염색시약과 결합하여 불용성 화합물인 Crystal violet-iodine complex를 형성하여 세포에 더욱 강하게 고정시키며 모든 세포는 짙은 자줏빛을 띠게 된다. 특히 그람 염성균은 세포벽 중의 Magnesium-ribonucleic acid가 CVI complex와 결합하여 Mg-RNA-CVI-complex가 형성되는데 이것은 CVI complex보다 세포에 더욱 강하게 결합되어 제거하기가 더욱 어렵다.

참고자료

· 한국미생물학회 저, 미생물학 실험서, 을유문화사, 1998년, p.27~56
· Michael T. Madigan 외 3명, 오계현 역, Brock의 미생물학 , 바이오사이언스, 12판, p.78~79
· 오계현 외 4명 공저, 최신미생물실험, 신광문화사, p.45~51
· 늴니리, Carpe diem, 그람염색의 원리, 2005.04.13., 2013.04.02.,
· http://blog.naver.com/minjaya?Redirect=Log&logNo=60011824393