생물학 실험 7,8,9주차

목차

1. Introduction
2. Materials & Methods
3. Results
4. Discussion
5. Homework
6. Reference

본문내용

Introduction
7, 8, 9주차 실험은 미생물을 이용하여 원하는 DNA를 가진 plasmid를 복제하여 이것을 추출하고, 위의 과정이 제대로 되었는지 확인하는 것이 목적이었다. 이를 위해 우리는 먼저 competent cell 안에 plasmid를 집어넣었다. competent cell로는 대장균을 이용하였다. 대장균은 우리 몸의 장 속에 사는 세균으로, 특히 대장에 많이 존재하여 ‘대장균’이라 불린다. 대장균이 장 안에 있을 때는 문제가 되지 않지만 때때로 대장균을 숙주로 하는 바이러스를 만나면 병을 일으키기도 한다. 현대 분자 생물학에서는 대장균을 통해 원하는 물질을 대량으로 얻을 수 있다. 원하는 물질을 합성하는 DNA를 가진 plasmid를 대장균 안으로 넣으면, 대장균이 자가 복제되면서 그 안의 plasmid 역시 그 수가 증가하기 때문이다. 이러한 방법을 통해 당뇨병 치료에 효과적인 인슐린을 대량으로 생산할 수 있었다. 이번 실험 역시 이러한 원리를 이용한 것이고 이에 대해선 7주차 실험의 discussion에서 더 자세히 알아 볼 것이다.

<중 략>

그러나 200㎕ pipette으로 20㎕ 미만의 액체를 따는 것은 부정확하다. 실험 때 육안으로 봐도 차이가 날 만큼 들쑥날쑥한 양이었다. 따라서 single cut을 위해 EcoRI를 딸 때 pipette 안에 기포가 많이 들어갔거나 유난히 적은 양이 따져 sample 안에 제한효소가 거의 들어가지 않았을 수 있다. 또 다른 가능성으로는 앞의 과정이 제대로 되었지만 sample을 gel에 담을 때 실수가 있었을 경우인데, 처음 no cut과 single cut을 담을 때 많이 미숙하여 double cut 때 다른 조의 조원에게 부탁했던 기억이 난다. no cut과 single cut을 gel에 담을 때는 홈에 남아 있는 것이 거의 없을 정도였다. 특히 no cut을 담을 때 처음에 홈에 아예 들어가지 않고 위로 모두 퍼져 아래 홈에 다시 no cut을 담았다. single cut 역시 홈에 남은 것이 거의 없었는데 위로 퍼진 다량의 no cut sample이 single cut sample의 결과를 가린 것이 아닌가 하는 생각도 든다.

참고자료

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