HPLC 이론

목차

1. 크로마토그래피
2. HPLC
3. HPLC 기기시스텀의 구성
4. 실험과정
5. 결과

본문내용

◆ 크로마토그래피
혼합물의 시료에서 매질내에서의 이동도 차이를 이용해서 그 성분을 분리, 분석하는방법. 고정상 한 끝에 시료를 흡착시키고 여기에 적당한 용매(이동상)를 흘리면 시료의 성분은 고정상의 내부를 용출과 흡착을 반복하면서 이동한다. 그 동안에 흡착되기 쉬운 것과 어려운 것과의 사이에 이동도의 차이가 생겨서 혼합물의 분리가 가능해진다. 이때 극성이 큰 고정상과 이것보다 극성이 작은 이동상 용매를 조합시킬 경우, 즉 순상크로마토그래피와 이것과는 반대로 이동상보다 극성이 낮은 고정상을 쓰는 경우, 즉 역상크로마토그래피가 있다. 크로마토그래피는 고정상과 시료 간에 작용하는 친화력의 본성에 따라 흡착형, 분배형, 이온교환형으로 분류한다. 고정상으로는 실리카겔, 활성탄, 산화알루미늄이나 이온교환체(이온교환크로마토그래피) 등을 사용한다. 다공질미립자상의 이러한 고정상을 가늘고 긴 원통에 넣어서 사용하는 것이 칼럼크로마토그래피이고 칼럼의 한 끝에 흡착된 물질은 용매와 같이 흡착대를 형성하면서 이동하여 다른 끝에서 분별 용출된다. 용매의 이동을 기계적으로 빠르게 하여 고감도의 검출기로 성분의 신속한 분석을 할 수 있도록 한 것이 고속액체크로마토그래피이다. 여과지크로마토그래피는 여과지 그 자체를 고정상으로 하는 것으로 가늘고 긴 여과지의 한쪽 끝 가까이에 시료를 묻혀서 용매를 그 끝에 스며들게 하면, 각 성분은 여과지 위를 각각 독자적인 위치로 이동하기 때문에 그 이동률 즉Rf값을 측정함으로써 그 동정이 가능해진다. 만약 그 물질을 육안으로 감지할 수 없는 경우는 적당한 발색시약을 사용하든지 자외선조사 등에 의해 검출한다. 박층 크로마토그래피는 이것과 거의 같은 방법으로 분석을 하는 것으로, 유리판 위에 얇고 균일하게 펼친 고정상을 쓴다. 이러한 것들은 이동상이 액체인 액체크로마토그래피이다.

참고자료

· 없음