C Direct Count Method

목차

1. 이론 (Theory)
2. 목적 (Objectives)
3. 재료 (Materials)
4. 방법 (Methods)

본문내용

1.1.1. Microscopic count (현미경 측정법) 현미경 측정법은 특별히 고안된 계수기(counting chamber)를 사용하여 일정 부피에 존재하는 모든 세포의 수를 세는 방법으로, 세균, 효모 등 단세포 미생물의 수를 세는데 적합하다. 액체 배양한 시료를 직접 사용하거나 세포를 염색한 후 균수를 측정하며, 세균의 계수에는 Petroff- Hausser 계수기를 사용하고, 효모의 계수에는 Thoma의 혈구계수기(hematocytometer)를 사용한다. 현미경 측정법을 사용하면 신속하게 세포의 수를 셀 수 있으며, 세포의 크기와 형태에 관한 정보도 얻을 수 있다. 평판배양법으로는 특정한 조건에서 증식할 수 있는 미생물만 측정할 수 있으나, 현미경 계수법은 시료에 존재하는 모든 미생물을 측정할 수 있다. 그러나 배양액이 투명하고 세포로 오인할 수 있는 입자들이 없어야 하며, 측정하는 시료의 양이 매우 적으므로 세포 밀도가 낮을 때에는 사용할 수 없다. 산 세포와 죽은 세포를 구별하기 어려우나 0.1% 메틸렌 블루(methylene blue)로 염색을 한 후에 측정하면 구별하여 계수할 수 있다.
1.1.2. Counting chamber (계수기)계수기는 두꺼운 슬라이드 글라스 표면에 격자가 그려져 있고, 커버 글라스는 두 개의 마루 위에 놓이게 되어 있으며, 격자면과 커버 글라스 사이의 거리는 계수기에 따라 다르며 0.1, 0.02 또는 0.01 ㎜이다(계수기에 표시되어 있슴). 계수기의 중앙 격자는 넓이는 1 ㎜2(가로와 세로 각각 1㎜)로 25개의 큰 구획으로 나누어져 있다. 큰 구획 하나는 16개 작은 구획으로 나누어져 있으며, 작은 구획 하나의 넓이는 0.0025 ㎜2(가로와 세로 각각 0.05 ㎜)이다.

참고자료

· 미생물학실험, 고려의학
· 환경미생물학실험, 신광문화사
· Environmental Microbiology Laboratory Manual.