[실험] PCR을 이용한 DNA 증폭

최초 등록일
2002.11.30
최종 저작일
2002.11
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목차

1. Title
2. Name, Group
3. Date
4. Principle & Purpose
5. Materials
6. Procedure & Observation
7. Result & Discussion
8. Reference

본문내용

1. Title
Polymerase Chain Reaction(PCR)

2. Name, Group


3. Date
2002.11.25 (Mon)

4. Principle & Purpose

Purpose :
DNA의 변성, Primer의 결합과 DNA 합성 과정을 이해하고, PCR을 이용한 DNA 증폭 과정을 안다.

Principle :
1) PCR의 정의
특정 DNA 부위를 특이적으로 반복 합성하여 시험관 내에서 원하는 DNA 분자를 증폭시키는 방법으로서, 아주 적은 양의 DNA를 이용하여 많은 양의 DNA 합성이 가능

2) 응용분야
중합효소 연쇄반응을 통하여 in vitro 상에서 특정 부위의 DNA를 105∼108배까지 수시간 내에 증폭시킬 수 있으며, 이렇게 증폭된 DNA를 다음과 같이 여러 가지 실험에 이용할 수 있고, 실험결과를 토대로 여러 의학적인 연구에 응용 가능함
ex) 법의학에서 특정인의 유전자 검출, 암 유전자의 검출, 유전성 질병의 진단, 감염성 질병 의 진단

3) PCR의 원리
(1) DNA의 변성(denaturation)
90℃∼96℃로 가열하여 double strand DNA(dsDNA)를 single strand DNA(ssDNA) 로 분리시킨다. 높은 온도일수록 ssDNA로 잘 이행되지만, Taq DNA polymerase도 온도 가 아주 높은 상태에서는 활성도가 낮아질 수 있으므로 보통 94℃로 쓴다. Cycle의 처음 은 확실한 변성을 위하여 약 5min간 시간을 주어야 한다.
(2) Primer의 결합(annealing)
50℃∼65℃에서 진행되며, 염기간에 G와 C는 세 군데에서 수소결합이 일어나고, A와 T는 두 군데에서 결합이 일어나므로 G+C 비율에 따라 결합온도에 변화를 주어야 한다. (3) DNA의 합성

참고 자료

없음

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