DNA 증폭- PCR 실험 보고서

최초 등록일
2008.12.20
최종 저작일
2008.12
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본문내용

1. PCR

PCR은 특정 DNA 부위를 특이적으로 반복 합성하여 시험관내에서 원하는 DNA분자를 증폭시키는 방법으로서, 아주 적은양의 DNA를 이용하여 많은 양의 DNA 합성이 가능하다.
중합효소 연쇄반응을 통하여 invitro 상에서 특정 부위의 DNA를 105~108배 까지 수 시간 내에 증폭시킬 수 있다.
PCR은 DNA polymerase의 성질의 이용하는데 DNA polymerase가 단일가닥 DNA 를 주형으로 해서 상보적인 DNA를 합성한다. 단일가닥 DNA 는 두 가닥의 DNA 를 끊음으로서 예전에는 매 cycle마다 DNA polymerase를 첨가해야 했지만 Thermus aquaticus의 DNA polymerase 가 발견되면서 이런 문제를 해결하였다.

2. PCR의 구성요소

(1) Primer
PCR의 가장 중요한 요소이며, 정확도를 결정한다. Primer의 길이는 너무 길어도 안되며 너무 WKfq아도 안된다. 너무 짧다면 인간의 genome처럼 많은 양의 nucleotide로 구성 된 DNA molecule을 대상으로 할 경우, Primer가 인식할 수 있는 site가 너무 많아서 원하는 부분만을 증폭하는 것이 불가능해진다. 반대로 너무 길다면 PCR 과정에서 DNA가 hydridizing 할 때의 시간이 많이 걸려, 그 효율이 떨어진다. 일반적으로 17~30mer가 Primer의 크기로 적당하다.

참고 자료

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Bio medical Workshop
연세대학교 의과대학 생화학 분자생물학 교실

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