세포탁도측정(OD측정)

소개

실제로 실험을 한것으로써 원리와 방법 결과등 많은 사진들을 부착하여 도움이 되실꺼예요,

목차

없음

본문내용

② 실험 방법
a. 물 800цl 와 sample 200цl 를 넣고 희석시킨다.
b. 1의 sample를 기계에 넣고 600nm에 파장을 받아서 OD이 0.376이 나왔지만, 5번 희석 한 것 임으로 1.88이 나온 것이다. 2의 sample도 마찬가지로 해준다.
c. 다 OD를 10으로 맞춰야한다. ( OD를 10으로 만들려면 원심불리로 농축 시켜야 된다.)
1. no IPTG - 15.15ml 2. no IPTG - 15.36ml
IPTG - 10 / 1.88 = 5.32ml IPTG - 6.8ml
d. (우리가 실험할 때는 7.5ml 밖에 없어서 4를 나눔으로써 맞게 실험할 수 있다.)
1ml로 해야 되는데 7.5ml 밖에 없어서 15.15ml 와 5.32ml를 4로 나누어 그 값을 나누어 사용하여 실험한다.
e. 15.15 / 4 = 3.78 = 1.5+1.5+0.78 5.32 / 4 = 1.33 나누어서 정량을 맞춘다.
f. 원심분리를 1분 동안 13200으로 돌려준 후, 위에 남은 것들은 버리고 또다시 1.5ml를 넣어서 원심분리 해준다. 또 다시 위에 남은 것을 버리고 0.78ml를 넣어준다.
똑같이 다른 sample도 만든다.
g. 재현탁 시켜서 OD 10을 만들기 위해 water를 0.25ml 넣어줌으로써 OD가 10이 된다.
h. 재현탁된 cell을 깨기 위하여 초음파를 사용한다.
I. 10분간 원심분리 한 다음, 비가용성과 가용성을 나눈다. .sds page로 발현유무를 확인한다.

참고자료

· 없음