미생물수 세기(흡광도)

소개

흡광도를 이용하여 미생물수 세기

목차

Theme
Date&name
Abstract
Method
Principle
-spreading
-Pour plate
-counting chamber
-spectrophotometer
Results
Discussion
References
질문

본문내용

원액을 10-2, 10-4, 10-6, 10-8로 희석하여 spreading, pour plate, counting chamber, 흡광도 측정을 하여 미생물의 수를 측정하고 관찰된 미생물의 다수의 싱글 콜로니를 얻기 위하여 실험을 하였다. spreader 2개를 만들고 배양액을 멸균된 증류수 4.95ml가 들어있는 test tube 5개 중 한 tube를 이용하여 원액을 만들고 나머지 4개 튜브에 원액을 희석 하여 각각 10-2, 10-4, 10-6, 10-8를 만든 다음 0.1ml 씩 LB plate에 각각 spreading하여 37℃에서 하루 동안 배양하여 미생물의 수를 측정하였고 5ml LB top agar가 들어있는 test tube 5개를 준비하여 clean bench에서 원액과 희석한 10-2, 10-4, 10-6, 10-8튜브에서 각각의 시료 0.1ml식 채취하여 test tube에 넣어 LB plate에 붓고 골고루 펼친 후 하루 동안 배양하였고 counting chamber에 10-2와 10-4로 희석한 액을 넣어 위상차 현미경으로 관찰하였다. 마지막으로 원액과 1/2, 10-1, 10-2로 희석하여 분광광도계로 흡광도를 측정하였다.
method
spreading
spreading하기 위해 유리봉에 열을 가하여 spreader 2개를 만들고 배양액을 멸균된 증류수 4.95ml(pipette-4ml, micropipette1000-900ul, micropipette200-50ul)가 들어있는 test tube 5개 중 한 개를 이용하여 원액 tube을 만들고 vortex를 이용해 충분히 섞은 다음 원액에서 micropipette200을 이용하여 50ul 를 채취하여 10-2 tube에 넣고 vortex로 섞은 후 10-2 tube에서 50ul 를 채취하여 10-4 tube에 넣고 또 vortex로 섞은 후 10-4 tube에서 50ul 를 채취하여 10-6 tube에 넣고 다시 vortex로 섞은 후 10-6 tube에서 50ul 를 채취하여 10-8 tube에 넣고 또 다시 vortex로 섞는다. 그리고 원액, 10-2, 10-4, 10-6, 10-8에서 opipette200으로 100ul 식 채취하여 5개의 LB plate에 각각 넣어 spreading를 하여 37℃ 인큐베이터에서 하루 동안 배양하여 콜로니 수를 세어보았다.

참고자료

· 없음