동물세포 계대배양(subculture)

소개

동물세포 계대배양 A+리포트입니다. 자연대, 의대 실험과정중에 세포배양시에 꼭 필요한 리포트입니다. 대학4학년 세포배양실험과 대학원 동물세포배양 전공시간에 배운 내용을 토대로 작성하였습니다. 실제로 쓰이는 실험순서와 세포사진들이 포함되어 있습니다.

실험조교들이 물어볼 만한 내용들을 discussion에 담았으니 참고하시면 많은 도움이 되실 거에요. 실험리포트서식을 모르시는 분은 그대로 적으시면 됩니다.

목차

1)Title 동물세포 계대배양(subculture)

2)Date

3)Purpose

4)Introduction
♦Trypsin 설명과 사진
♦EDTA 설명
♦HeLa Cell 설명과 사진

5) Materials 준비물

6) 실제 실험실에서 사용되는 동물세포계대배양 프로토콜(protocol)

7) Result
♦관찰기록표
♦성장곡선(growth curve)
♦trypsin처리전과 처리후 세포모양사진
♦관찰일지

8) Discussion 실험조교들이 자주 물어보는 요소들 설명, 주의사항, 실험tip 등

9) Reference

본문내용

) Title 동물세포 계대배양(subculture)
2) Date 2011.00.00
3) Purpose 부착세포 중 하나인 자궁경부암세포인 HeLa cell을 Trypsin-EDTA를 사용하여 dish와 떨어뜨려 hemocytometer로 cell 숫자를 측정하고 계대배양하여 보자.
4) Introduction
♦Trypsin
부착세포의 계대배양시 세포(cell)의 기질(matrix)과 부착단백질(attachment protein)을 분해(degradation) 시키는 단백질분해 효소(proteolytic enzyme)이다. Trypsin을 처리시 dish에 부착된 세포가 떨어져 나와 세포를 모을 수 있게 도와준다. Trypsin은 1874년에 독일의 생리학자인 W.퀴네가 명명한 것으로 이자에서 비활성의 전구물질(precursor)인 트립시노겐이 만들어지고 이자액 속에 분비되어져 소장에 운반된다. 이 소장에서 효소인 엔테로키나아제 또는 트립신 자신에 의하여 활성화되어 트립신이 만들어진다. 이때에 트립시노겐의 N말단(terminal)의 6개의 아미노산으로 구성되는 펩티드(peptide)가 유리되어진다. 단백질의 분해에 펩신과 함께 가장 큰 역할을 하는 효소이다. Trypsin은 또한 펩티드사슬을 끊어주는 endopeptidase의 하나로 특이성이 높다. L-아르기닌 또는 L-리신의 peptide, 에스테르의 카르복시기 쪽을 가수분해(hydrolysis)시켜준다.

참고자료

· 1.세포공학개론, Murakami외 1명, 경문사,2010, p108~117
· 2.조직배양, 김승업, 민음사, 2004, p65~78
· 3.신경조직배양, 김승업, 민음사, 2006, p73~80
· 4.General techniques of cell culture, Mauree A. Harrison외 1명, CAMBRIDGE, 1996, p69~88
· 5.Culture of animal cells, R.Ian Freshney, WILEY, 199~216
· 6.세포배양노트, 정출이헌, 월드사이언스, 1998, p63~76, 115~143
· 7.http://microscopy.org