Animal cell culture, cell counting, and calculation of doubling time 실험 결과보고서

최초 등록일
2018.09.24
최종 저작일
2017.05
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'Animal cell culture, cell counting, and calculation of doubling time' 라는 주제의 생물공학실험을 진행한 후, 직접 작성한 실험 결과보고서입니다.

내용이 잘 정리되어 있어서 관련 실험을 하시는 분들께 많은 도움이 될 것입니다^^

목차

1. Cell counting과 Cell suspension 희석
2. Cell viability 계산
3. Doubling time 계산
4. Trypsin-EDTA가 하는 역할과 Trypsin-EDTA를 처리하기 전에 dPBS로 2-3번 washing을 해주는 이유 서술
5. 세포를 배양할 때 배양기에 5% CO_2를 공급하는 이유 서술
6. 고찰

본문내용

1. Cell counting과 Cell suspension 희석
Cell suspension 농도 [cells/ml] = (총 cell 수) X (Dilution factor) X 0.5 X 〖10〗^4
여기서 0.5를 곱해주는 이유는 cell pellet을 1ml로 희석시킨 것이 아니라, 0.5ml로 희석시켰기 때문이다. Dilution factor는 3/2 인데 그 이유는 suspension 10㎕에 trypan blue 용액을 5㎕ 첨가하였기 때문이다.
따라서 Cell suspension 농도 [cells/ml] = 115 X (3/2) X 0.5 X 〖10〗^4 = 862500 cells/ml 이다.
이번 실험에서는 seeding cells number를 30000으로 정했기 때문에 seeding시 첨가한 cell suspension 양은 862500 : 1 = 30000 : y , y=0.035, 즉 0.035ml 이다.

참고 자료

없음

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