[유전학 실험][서울대] CEF cell isolation and culture

소개글

[서울대학교]
유전학 실험 레포트로서, 실험목적은 CEF(Chicken Embryo Fibroblast) cell을 분리하여 in vitro상태에서 배양하는 것이다.

레포트에는 CEF cell이 뭔지, in vitro 상태에서의 동물세포 배양이란 무엇인지, 혈청배지와 무혈청 배지의 차이점을 기입했습니다.

또한, 실험도구들의 설명과 함께 실험에 쓰인 시약들, 배지들에 대한 자세한 설명을 적어놨습니다.

목차

1. Introduction and Abstract

2. Materials and Method
Equipments >
Material and Media >
Method >

3. Results and Discussion

4. Reference

본문내용

유전육종학 실험 Report.
- CEF cell isolation and culture
1. Introduction and Abstract
오늘 실험의 목적은 6일령 embryo에서 CEF(Chicken Embryo Fibroblast) cell을 분리하여 in vitro상태에서 배양하는 것이다. 이를 위해서 배아에 Trypsin처리 및 37℃에서 incubation을 반복한 후 single cell만 걸러내고 원심분리기로 cell을 pellet 형태로 가라앉힌다. 이후 상층액을 버리고 media로 suspension시킨 후 media가 7ml 담겨있는 culture dish에 넣어서 현미경으로 관찰함으로써 이번 실험을 마치게 된다.
Fibroblast(섬유아세포)는 섬유성 결합조직의 중요한 성분을 이루는 세포이다. 조직절편으로 관찰하면 편평하고 길쭉한 외형을 가지며 흔히 불규칙한 돌기를 보인다. 세포질은 미토콘드리아, 골지체, 중심체, 소지방체 등을 포함하고 그 밖에 특수한 분화는 나타내지 않는다. 핵은 염색성이 약하고 타원형이며 인을 함유한다. 교원섬유에 밀접해 있는 경우가 많고, 그 형성에 관계가 있다고 생각되므로 이런 이름이 붙여졌다.
섬유아세포는 in vitro 상태에서 매우 잘 자라는 성질을 가지고 있어서 세포배양시 많이 사용 된다. 이외에도 인공적인 배양이 가능한 세포는 골격을 이루는 골아조직(osteoblast), 연골아세포(chondroblast)나 결체조직(connective tissue)을 이루는 섬유아세포(fibroblast) 등이 있다. 또한 췌장(pancreas)의 랑게르한스섬세포(Langerhans islet cell)나 간세포(hepatocyte)와 같은 대사조절 기능을 갖는 물질을 분비하는 복잡한 세포의 배양도 가능하다. 최근에는 인간배아의 간세포(stem cell)의 배양도 가능하다고 보고되었다.
동물세포 배양이란 체외(in vitro)에서 인공적으로 체내(in vivo)와 유사한 조건을 제공하여 세포를 대량 증식시키는 방법이다. 이때 동물세포는 현탁(suspension) 상태나 단층부착(monolayer attachment) 상태로 생장한다.
동물세포를 배양할 때 다음 사항을 고려해야 한다.

참고 자료

① 화학공학연구정보센터 (http://www.cheric.org)
② Cell culture, 동물유전육종학 및 실험 실습자료.