형광광도계

소개

목차
1.형광광도계란?

2.형광광도계의 사용법

3.형광광도계원리

4.형광광도계의 특징

5.분석에 영향을 주는 인자

6.이용현황

7.기타자료

8.토 의

9.참고문헌

목차

목차
1.형광광도계란?

2.형광광도계의 사용법

3.형광광도계원리

4.형광광도계의 특징

5.분석에 영향을 주는 인자

6.이용현황

7.기타자료

8.토 의

9.참고문헌

본문내용

빛의 흡수에 의해 들뜬 상태에 도달한 분자는 에너지를 잃고 다시 안정한 바닥 상태로 되돌아 온다.
이 에너지를 잃는 과정은 분자의 충돌 등에 의해 열 또는 에너지를 방출하는 무방사 전이 또는 분자간 에너지 이동에 의한 것이 일반적이다.
그러나 어떤 일정한 구조를 갖는 분자에 있어서는 에너지를 다시 빛으로 방출하는 방사과정을 갖는 경우가 있다.
이러한 전이가 같은 다중도 사이에서 일어날 경우 이런 물질을 형광물질이라고 하고 방출된 빛을 형광이라고 한다.
이 방사광의 스펙트럼 형태에 의해 각물질의 정성분석을 또는 강도에 의해 정량분석을 할수 있다.
형광광도법은 흡광광도법에 비해 응용범위는 제한되지만 그 감도는 흡광광도법보다 한자리에서 세자리는 높기 때문에 극저농도의 물질의 분석에 이용되어진다.유산균은 1857년 프랑스 화학자인 파스퇴르에 의해 발견되었다.
2. 구성
형광계
기본적으로 두 가지 형태의 형광계가 시판되고 있다. 하나는 고정된 들뜸파장과 방출파장에서 보통 작동되는 비교적 값싼 필터형 형광계이다. 다른 하나는 파장을 주사할 수 있고 필터형보다 분해능이 더 좋은 값이 비싼 회절발 기기이다.
형광계는 보통 여섯 가지 부분장치로 구성되어 있다. 첫째 부품은 복사선원이다.
자외선 영역까지 확장되는 비교적 넓은 연속선을 내기 때문에 크세논아크램프가 보통 회절발용 형광계의 복사선원으로 좋다. 그러나 선정한 파장에서 더큰 들뜸에너지를 얻는 데는 수은아크램프를 흔히 사용한다.
수은아크는 연속선에 겹치는 좁은 수은선으로 구성되어 있기 때문에 들뜸스펙트럼은 보통 이 램프를 사용하면 심히 일그러진다. 그림 1는 제조회사가 제공한 크세논램프와 수은아크램프의 출력을 비교한 것이다. 어떤 형광계는 이 두 램프의 정점을 결합시키기 위하여 크세논/수은아크 혼합램프를 사용한다.
이 램프는 크세논 기류에 전류를 통하여 센 복사선을 얻는데, 이것은 250~600nm범위의 넓은 파장영역에 걸쳐서 강한 연속 스펙트럼의 빛을 얻을 수 있지만 가시선영역(~470nm)과 근적외선 영역(~770nm)부근에서는 예민한 밝은 선이 있으므로 들뜬 스펙트럼을 측정할때에는 주의 해야한다.
수은 아아크 램프는 센 선스펙트럼을 방출한다.
고압램프(~8atm)는 366,405,436,546,577,691 및 773nm에서 선이 나타나며 낮은 압력램프에서는 석영창을 끼워야 하고 254nm의 센 선이 하나더 나타난다.
최근에는 들뜨기 광원으로 각종 레이저광을 사용하고 있다.
그중에서 일차광원으로 펄스 질소 레이저를 이용하는 조절할 수 있는 색소 레이저이다.
이것은 360nm에서 650nm 사이의 복사선을 얻을 수 있다.
이런 경우에는 들뜨기 단색 장치가 필요없다.
형광계의 두 번째 부품은 들뜸복사선과 방출복사선을 효율적으로 전달해주는 렌즈계이다. 석영렌즈는 200~380nm의 자외선 파장영역에 사용되며 유리렌즈는 가시선 영역(380~700nm)에서 사용될 수 있다.
복사선원에서 파장을 선택하여 분리하는 장치는 형광계에서 두 번째로 필수적인 부품이다. 이와 같은 분리는 들뜸파장 선택장치라고 하는 제 3의 부분장치에 의해 이루어진다. 이 장치의 기능은 시료들뜨기에 사용할 단색복사선 또는 좁은 띠 복사선을 골라 내는 것이다. 들뜸파장 선택장치로는 필터 또는 회절발 단색화장치를 쓸 수 있다. 필터는 투과광량이 많은 반면, 회절발 단색화장치는 파장선택범위가 넓은 장점이 있어서 넓은 띠 들뜸으로 인해 방해가 일어날 가능성이 큰 필터보다 발광연구에 더 좋다.
254nm에서 들뜨게 할 때는 300nm 이하의 복사선만 투과하도록 필터를 조합해서 사용한다. 예를들면 7-54필터와 특수 플라스틱 필터를 조합하면 그림 2에서 보듯이 300nm이하의 복사선만 투과하게 할 수 있다.
플라스틱 필터는 점차 분해되기 때문에 교환해야하는 단점이 있으므로 플라스틱 필터대신 수은선 간섭필터를 사용할 수 있다. 이 필터는 저압 수은아크에서 방출되는 313nm와 다른 선을 투과하지 않고 254nmtjs을 분리하는 단일 영구필터이다.
긴 파장의 들뜸복사선에 사용할 수 있는 필터는 7-60필터이며 그 투광도는 그림 2에 나타낸 것과 같다. 이 필터는 보통 필터기기에 사용되는 저압 인피막 수은광원이 방출하는 복사선의 거의 모든 센 띠를 투과한다.
시료용기는 네 번째 부품으로써 시료를 담아 균일한 조사면을 제공해 준다. 이 큐벳은 자외선을 통과시키는 석영으로 만들어져 있다. 이 용기는 1cm자외선 흡수용기와 비슷하나, 흡수분광광도계에서 흔한 180 배치방식 대신 형광계가채용하는 그림 3에 나타낸 90 배치방식에 사용될 수 있도록 사면으로 광이 투과될 수 있게 되어 있는 것이 다르다.

참고자료

· 없음