미생물 동정 실험

소개

손에 있는 미생물을 동정하는 실험.
세균 배양하여 PCR하고
PCR 확인 위해 전기영동하고
PCR한 것으로 vector에 삽입하여 ligation하고
16s rRNA 삽입한 것 transfomation하고
엠피실린 배지와 lacZ를 이용하여 잘 삽입된plasmid 분리하고
plasmid isolation과정을 거쳐서
회사에 sequence 조사 의뢰하여
어떤 세균인지 까지 알아보는 실험


논문형식의 레폿임

목차

1. 서론
2. 실험이론
3. 실험방법 및 재료
4. 결론
5. 고찰
참고문헌

본문내용

초 록 : 손에 있는 세균을 동정하기 위해 16s rRNA를 이용한다. 세균을 고체 LB배지에서 배양하여 유전적으로 같은 균 집단(colony) 하나를 선정한다. 세균의 양이 적으므로 PCR로 원하는 16s rRNA부분을 증폭시킨 뒤 plasmid DNA에 삽입 시킨다. PCR로 증폭이 잘 일어났는지는 전기영동을 통해 확인하며, plasmid DNA에 잘 삽입되었는지는 배지의 X-gal 분해여부로 확인하였다. Plasmid DNA에 16s rRNA가 들어간 plasmid DNA를 골라 염기서열을 분석하여 손에 있는 세균이 어떤 세균인지 알아내었다. PCR은 전기영동 사진으로 보아 원하는 16s rRNA의 크기인 15000bp가 증폭되었고 plasmid DNA가 잘 삽입되어 X-gal을 분해할 수 없는 하얀 colony로 염기서열을 분석하였다. 분석 결과 내 손 세균은 wolinella속에 속하는 세균이었다.


서 론
우리는 이번 분자생물학실험 시간을 통해서 손에 있는 세균을 동정하고자 한다. 과거 세균을 동정하기 위하여 많은 방법들이 사용되었으나, 최근의 세균의 동정은 16S rRNA 유전자 분석에 크게 의존하고 있다. 현재까지 알려진 세균의 상당수는 종의 표준 균주에 대하여 16S rRNA 유전자의 염기서열이 분석되어 있다. 결과적으로 동정하고자 하는 균주의 16S rRNA 유전자를 분석하면, 이 균주가 전체 세균 중에서 어느 종에 가까운지를 알 수 있게 된다.
이번 시간에 우리가 실험한 동정방법은 16s rRNA의 염기서열을 이용한 세균동정이다.

참고자료

· http://blog.naver.com/rawww?Redirect=Log&logNo=110012928631
· http://blog.naver.com/mgbsince1982?Redirect=Log&logNo=50007152476
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