Protein purification

소개

단백질의 정제는 유전자 재조합 기술을 이용하여 원하는 유전자 sequence 앞 또는 뒤에 특정 ligand에 affinity를 갖는 carrier를 보유한 Tag (fusion partner) 삽입, 발현하여 고순도로 정제를 하는 방법이다.

목차

● 실험원리
1. Tag의 종류
2. GST 의 expression

3. GST-Recombinant Protein Purification
4. Determine points -Quality of Proteins
● 실험재료

● 실험방법

본문내용

● 실험원리
단백질의 정제는 유전자 재조합 기술을 이용하여 원하는 유전자 sequence 앞 또는 뒤에 특정 ligand에 affinity를 갖는 carrier를 보유한 Tag (fusion partner) 삽입, 발현하여 고순도로 정제를 하는 방법이다.

※ 단백질을 purification하는 방법 3가지
① Genetic recombinant technology : 가장 많이 쓰이는 방법. 세포배양을 통한 것으로, 유전자 재조합 기술에 의해 원하는 유전자를 박테리아에 삽입시켜 transformation을 시키고 이것을 배양하여 원하는 단백질만을 분리 정제하여 얻는 방법이다.

② amino acid polymer : 화학합성에 의한 방법. 인위적으로 solid peptide 합성 기술을 이용하여 아미노산 중합체(amino acid polymer)을 만드는 것이다. 이 방법은 유기용매등 유해한 물질을 사용한다는 단점이 있다.
③ 무세포 단백질 합성 시스템(or In vitro Transcription/Translation Proteins) : 장점은 단시간에 효율적으로 합성할 수 있으며, 분리, 정제 과정도 최소화 할 수 있는 것이 있으나, 가격이 매우 비싸고, 민감한 실험조건을 조절해 주어야 하는 문제점.
1. Tag의 종류

참고자료

· 없음