[expression of GST-fusion protein] expression

*찬*
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최초 등록일
2002.10.21
최종 저작일
2002.10
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목차

1.실험목적
2.실험방법
3.실험결과
4.고찰

본문내용

이번 실험은 IPTG(isopropyl b-D-thiogalactopyranoside)을 이용하여 protein을 induction하여 expression시키는 방법을 습득하는 것이었다. 의외로 실험은 매우 간단하다고 볼 수 있다. IPTG는 isopropyl b-D-thiogalactopyranoside의 약자로 inducible promoter이다. inducible promoter는 mRNA를 expression시키는 것인데, inducible promoter로 lactose를 쓰지 않고 IPTG를 쓴다. 이유는 lactose는 효소에 의해 분해되지만 IPTG는 효소에 의해 분해가 되지 않기 때문이다. induction이란 promoter에 IPTG를 넣어주어서 mRNA를 expression시키는 과정으로 induction을 통해서 protein을 만들 수 있다. 여기에서 IPTG는 protein을 만들기 위해서 mRNA를 과발현시키는 것이다. 먼저 transform된 E. coli를 overnight culture한 것을 LB-amp와 함께 삼각플라스크에 넣을 때 반드시 가스용토치옆에서 실시하여 오염이 되지 않도록 주의를 기울여야 한다. 실험에서 induction시키기 위해서 transform된 E. coli와 LB-amp를 삼각플라스크에 넣고 shaking incubator에서 배양하여 OD를 1.0~1.2가 되도록 해야 한다.

참고 자료

없음

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