일반 생물학실험 The Bradford Assay

소개

일반 생물학실험 보고서 입니다. The Bradford Assay를 주제로 실험하였습니다.

목차

1. 목적
2. 실험 이론
3. 재료 및 방법
4. Results
5. Discussion
6. Reference

본문내용

1. 목적
이미 정량된 특정 단백질을 이용해 미지의 단백질을 정량해보고 단백질 정량법에 대해 알아본다.

2. 실험 이론
단백질이란?
단백질은 세포의 성분 중에서 물 다음으로 많은 양을 차지하는 것으로 탄소(C), 수소(H), 산소(O), 질소(N)로 구성되며, 황(S)을 함유하는 것도 있다.
단 백질은 생물의 세포막 등 세포 기관을 구성하는 중요한 성분으로 몸을 구성하는데 쓰이며, 효소, 호르몬 등의 성분으로 생체 내에서 일어나는 각종 화학 반응과 생리 기능을 조절하기도 한다. 또 근육, 헤모글로빈 및 항체를 구성하는 성분이기도 하다. 탄수화물이나 지방이 체내에 부족할 때는 에너지원으로 쓰이기도 하는데, 1g이 완전히 산화, 분해되면 약 4kcal의 에너지를 낸다.
단백질의 구성단위 물질은 아미노산이며, 단백질은 다수의 아미노산들이 펩티드 결합으로 연결되어 있다. 결합하는 아미노산의 순서에 의해 단백질의 종류가 결정되므로 탄수화물이나 지방에 비해 그 종류가 훨씬 많다.

Bradford assay의 원리
산성용액에서 Coomassie brilliant blue 염료는 단백질과 결합하게 되고, 이로 인해 염료의 최대 흡광도(λmax)는 465nm에서 595nm로 이동하게 된다. 따라서 595nm에서의 흡광도는 단백질의 농도와 비례하게 된다. 이 방법은 발색반응 2분 이내에 완결되며, 1시간까지 유지된다.
Bradford 방법의 감도는 Lowry 방법보다 좋으며, micro assay를 사용하면 1~20μg의 단백질량을 측정할 수 있다. Bradford방법은 빠를 뿐만 아니라 비단백질 성분들에 의한 방해도 거의 없다.

참고자료

· 없음