단백질 정량 결과보고서

최초 등록일
2020.04.14
최종 저작일
2020.04
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목차

Ⅰ 실험제목과 실험날짜
Ⅱ 실험 목적
Ⅲ 실험 결과
Ⅳ Discussion
Ⅴ Further study
Ⅵ Reference

본문내용

Ⅱ 실험 목적
Objective
세포를 구성하는 거대분자에 대해 알아보고 그 중 하나인 단백질에 대해 구체적으로 학습한다. 이후 단백질의 양을 측정하는 방식인 Bradford method의 원리와 과정을 익히고, 이를 이용해 임의의 시료에 포함된 단백질을 정량한다.

Ⅳ Discussion
실험1
R^2의 값이 0.99이상일 때 추세선이 정확하지만 R^2의 값이 0.986으로 0.99에 살짝 못 미치는 값이 나왔다. 이는 standard solution이나 증류수를 마이크로 피펫팅 할 때 시료의 양 측정에 있어 약간의 오차가 발생한 것으로 추정된다. 하지만 0.99에 가까운 값이므로 비교적 믿을만한 값임을 알 수 있다.

실험 2
우유를 희석할 때 그 비율에 따라 단백질의 양이 거의 정비례할 것이라고 생각했으나 실제 결과를 보면 그렇지 않음을 알 수 있었다. 그 이유를 추론한 결과 우유는 콜로이드상태이므로 단백질이 균일하게 들어있지 않아서 비율에 따른 단백질의 양이 정비례하지 않았음 을 알 수 있었다.
0.000일 때 단백질이 0에 가까운 양의 값을 지녀야 그 값을 신뢰할 수 있음을 직관적으로 알 수 있지만 추세선 함수식에 보정된 흡광도값을 대입했을 때 단백질의 양이 음의 값을 가진다고 나왔다.
이를 통해 0.0686 이하의 흡광도값을 가지는 샘플의 단백질 양을 신뢰할 수 없다는 한계를 발견하게 되었다.
또한 우유에는 major protein인 caseins 말고도 beta-lactoglobulin과 alpha-lactalbumin등이 포함되어 있어 특정 단백질에 의한 농도 결정이 이루어지지 않는다. 또한 standard solution에 들어있는 BSA는 다른 단백질보다 흡광도가 우수하다.

참고 자료

https://m.blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=withcoffee67&logNo=70157521263&proxyReferer=https%3A%2F%2Fwww.google.co.kr%2F
https://www.labome.com/method/Protein-Quantitation.html
https://m.blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=summerh_&logNo=221122051482&proxyReferer=https%3A%2F%2Fwww.google.co.kr%2F
https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/life-science/protein-biology/protein-biology-learning-center/protein-biology-resource-library/pierce-protein-methods/overview-protein-assays.html
캠벨 생명과학 11판

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