아가로스겔(Agarose Gel)을 이용한 전기영동

소개글

아가로스겔(Agarose Gel)을 이용한 전기영동의 순서와 방법을 프리젠테이션과 동영상으로 준비하였습니다. 또한 발표용 한글자료도 준비하였습니다.
함께 올린 자료들과 한 세트입니다.

목차

전기영동이란?

순서
1. Agarose Gel 만들기
2. Gel 붓기 / well 만들기
3. 완충용액 붓기
4. 시료 넣기
5.자외선 조사
6. 사진 찍기

본문내용

전기영동이란?
*전기장의 영향을 받아 하전 된 물질들이 유동성 매체 내에서 이동하는 것을 이용한 물질 분리법
*DNA : 인산기의 음전하로 인해 매질을 타고 양전하 방향으로 움직이게 된다.
-이때 움직이는 속도는 DNA의 크기 모양에 따라 다르다.

순서
1. Agarose Gel 만들기
*아가로스(agarose) 파우더를 유산지를 이용해서 1g 을 준비한다.
*아가로스 파우더를 삼각플라스크에 넣는다.
*1X TAE buffer 100ml 를 부어 넣습니다. 잘 흔들어 섞은 후 2 분간 방치한다.
-TAE 완충용액 만들기: Tris base 242g, 아세트산 57.1mL, 0.5M EDTA 100ml를 넣는다. 그런 다음 증류수를 넣어 1L가 되도록 하면 50X의 완충용액이 만들어지고, 사용할 때는 이것을 1X로 희석하여 사용한다
TAE; Tris-acetate-EDTA
TBE; Tris-borate-EDTA
둘다 DNA 전기영동에 사용
일반적으로 알려져 있기로는 TBE가 TAE 보다
buffering capacity(수용력)가 더 좋아 전기영동을 길게 할 경우 TBE가 더 적합
TAE는 긴 DNA (>12kb)를 전기영동할 때, TBE는 보다 짧은 크기의 DNA를 전기영동할 때 (<1 kb) 좋다고 합니다.
TAE는 4kb 이하라고 전기영동이 되지 않는 것은 아니고, 그 이상의 크기일 때 해상도가 TBE보다 좋다.

참고 자료

없음