단백질 분리 및 확인 리포트

소개

- 전기영동을 이용해 단백질을 분리하고 분리된 단백질을 확인해서 단백질의 정량적 분석을 함.
<첫째 주> 분리할 단백질 sample 만들기
<둘째 주> gel 만들기
<셋째 주> gel을 전기영동해서 staining한 다음 정량적 분석함.

일반 생물학 실험에서 A+받은 레포트입니다! 정말 열심히 작성했어요!

목차

1.subject
2.object
3.introduction
4.material
5.method
6.result
7.discussion

본문내용

1. Subject
- 전기영동을 이용해 단백질을 분리하고 분리된 단백질을 확인해서 단백질의 정량적 분석을 함.
<첫째 주> 분리할 단백질 sample 만들기
<둘째 주> gel 만들기
<셋째 주> gel을 전기영동해서 staining한 다음 정량적 분석함.

2. Object
- 단백질을 크기에 따라 전기 영동으로 분리하는데 이 과정에서 전기 영동의 원리를 알고 SDS와 polyacrylamide의 역할을 이해하며 분리된 단백질을 Coomassie blue 염색액으로 염색하여 분자량을 확인한다.

3. Introduction
- 단백질 : 단백질은 단백질의 구성 성분인 아미노산의 R부분에 따라 양성 또는 음성의 전하를 가진다. 반면의 DNA는 음성의 전하를 가지고 있기 때문에 전기영동을 할 경우 모두 양극 쪽으로 이동하지만, 단백질은 총 전하에 따라 다른 방향으로 이동하게 된다.

-SDS-PAGE란?
: sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis의 약자로 생화학과 유전학 및 분자 생물학에 이용되는 단백질 분리 기술로, 그들의 전기 영동 이동성(polypeptide chain의 길이 또는 분자량 뿐만 아니라 Protein folding, Posttranslational modification과 다른 인자들에 의한)을 이용한 기술이다.

- SDS-PAGE에서 단백질이 분리되는 원리
: 처음 단백질의 solution은 SDS를 첨가한 후에 분석된다. 이 비 이온화 detergent는 2차 구조와 disulfide bond에 의한 4차 구조를 변성 시킨다. 또한 단백질의 질량에 따라 일정 비율로 각 단백질을 – charge를 띠게 한다. SDS가 없이는 분자량이 비슷한 다른 단백질들이 protein folding의 차이로 인해서 다르게 이동하는데, folding 방식의 차이에 따라 어떤 단백질들은 겔에서 다른 단백질보다 크기가 더 잘 맞아서 빠르게 이동할 수도 있다. SDS를 첨가함으로 이러한 문제점들을 해결하고 선형으로 단백질을 만들어 분자량(일차구조 또는 아미노산 수)의 크기에 따라 분리할 수 있게 된다

참고자료

· -http://kin.naver.com/detail/detail.php?d1id=11&dir_id=110205&eid=mpcXmWmMGHopuKbnQZGkdAV4gcakvnFj&qb=cnVubmluZyBidWZmZXI=&pid=fsh4NloQsDZsstL1QRwsss--001402&sid=SAYH-GXABUgAAHkQfCQ
· - http://en.wikipedia.org/wiki/SDS_PAGE
· - http://blog.naver.com/kaykong?Redirect=Log&logNo=130025402893
· -http://www.fhcrc.org/science/labs/breeden/Methods/SDS-PAGE.html
· -http://krdic.naver.com/detail.nhn?kind=korean&docid=36134000