FACS(예비)

소개

FACS의 원리, 사용법을 익힌다.
세포의 관찰 및 형태학적 특성을 이해한다.

목차

▣ 실험 목적
▣ 실험 재료
▣ 실험 원리

본문내용

▣ 실험 목적

FACS의 원리, 사용법을 익힌다.
세포의 관찰 및 형태학적 특성을 이해한다.




▣ 실험 재료

- E.coli, Yeast, 동물세포

- PBS(0.1% BSA) buffer
․ PBS는 phosphate buffer silane으로 생리식염수에 인산을 녹여만든 buffer이다.
위에 완충액이라 하시는 게 바로 이것이지요. 이것은 세포가 자람에 있어서 생성되는 불순물(대사산물)을 제거할때 비싼 배지를 쓰지않고 이것으로 세척하는 용도로 쓰여진다.
더불어 세포의 삼투를 유지하여 세포의 파괴를 방지하는 역할을 한다.

- FACS, 원심분리기
․ 실험용 원심분리기는 실험에 사용되는 물질을 분리, 정제, 농축 할때 쓰는 원심분리기로 상대적으로 크기가 작아 미량원심분리기라고 부르기도 한다.


▣ 실험 원리


■ 유세포 분석의 배경

유세포 분석은 수많은 세포를 fluid column안에서 single flow로 형성하여 laser beam을 통과하면서 각 세포의 크기, 구조 및 과립도 등을 측정하므로 다양한 세포의 특징을 분석할 수 있는 방법이다. 극히 미량의 형광물질도 인지할 수 있어 정확도와 민감도가 높고 다양한 혼합세포군에서 소수의 아형군을 측정 혹은 분리가 가능하다.
1930년대에 capersson이 핵산측정에 처음으로 이용한 이후 오늘날은 약 0.1ul의 크기 particle 까지, 또한 하나의 염색 물질당 1000개 이상의 분자까지 측정 가능한 유세포 분석기로 발전해 왔다. 현재 임상에 이용되는 분야는 단일클론 항체를 이용한 백혈병 marker 검사 등 세포 표지자 검사, 세포의 DNA량 측정에 따른 성장 주기 분석, 망상적혈구수 측정, 호중구 기능검사, 항 혈소판 항체 검사 및 망상 혈소판수 검사, 종양단백 검출과 기타 연구목적의 검사 등 무수히 많다.

참고자료

· - 생명공학실험1, 아주대학교, pp. 12~14
· - 일반생물학, 김준호 외 공저, 鄕文社, 2005, pp. 87~89 p. 156
· - 일반생물학 실험서, 강영선, 탐구당, 1990, pp. 44~46
· - E. coli penicillin amidase 생산 및 생화학적 특성에 관한 연구, 김봉희, 숙명여자대학교, 1981, pp. 10~13