Measurement of vitamin C in biological samples using DNS

소개

생화학실험 중 하나인 Measurement of vitamin C in biological samples using DNS에 대한 예비보고서와 결과보고서입니다.

목차

<예비보고서>
1. 비타민 C의 성질에 대한 조사
⑴비타민 C(L-ascorbic acid)의 분자구조
⑵항산화제로서의 비타민 C
⑶천연의 비타민 C와 합성의 비타민 C에 대한 비교
⑷Vitamin C가 부족했을 때 생길 수 있는 질병
⑸하루에 필요한, 즉 권장되는 비타민 C의 하루 섭취량
⑹비타민 C를 정량하는 방법
①NBS를 이용한 정량법
②dye를 이용하는 방법
③DNP method (2,4-dinitrophenyl hydrazine 비색법)
④요오드 적정법
⑤HPLC(High Performance Liquid Chromatography)

2. DNS(3,5-dinitrosalicylic acid)에 대한 조사 - Properties of DNS

3. DNS를 이용하여 비타민 C를 정량할 수 있는 원리

4. Reference

<결과보고서>
1. Introduction
⑴실험 제목
⑵실험 목적
⑶실험의 원리

2. Materials & Procedure
⑴시약 및 초자
⑵실험 과정

3. Results
⑴standard and sample OD values
⑵standard curve(origin 7.0 사용)
⑶미지농도의 sample 내의 vitamin C의 정량

4. Discussion
⑴오차의 원인
⑵DNS 사용시의 주의할 점
⑶이번 실험에 사용된 방법 이외의, ascrobic acid(vitamin C)를 정량하는 방법들은?

5. Reference

본문내용

<결과보고서>
1. Introduction
⑴실험 제목 : Measurement of vitamin C in biological samples
⑵실험 목적 : 제조된 sample 내의 vitamin C를 정량하고, 미지의 sample 내의 vitamin C의 양을 알아낸다.

.. 중략 ..

2. Materials & Procedure
⑴시약 및 초자
- ascorbic acid
- 3,5-dinitrosalicylic acid
- potassium phosphate buffer
- (ascorbic acid oxidase)
- heat block
- potassium sodium tartrate 40% solution
- spectrophotometer
- cuvette

⑵실험 과정
①ascorbic acid로 standard solution을 준비한다.
=>ascorbic acid를 사용하여 0, 10, 20, 30, 40(mg/ml)의 다섯 가지 농도의 용액을 제조하여 standard solution을 준비한다.
②e-tube에 각각 standard solution을 50㎕씩 transfer한다.
③sample이 담긴 e-tube에 모두 450㎕의 potassium phosphate buffer를 첨가한다.
④총 500㎕인 sample(standard)를 test tube로 옮기고 여기에 1ml의 DNS를 첨가한다.
⑤heat block을 이용하여 90℃에서 5분간 incubation한다.
⑥반응시킨 용액을 잘 섞은 후, 1ml를 새 tube에 옮긴다.
⑦각 tube에 potassium sodium tartrate 40% solution을 넣는다.
=>potassium sodium tartrate solution은 stop solution으로서, ascorbic acid와 DNS간의 더 이상의 반응을 막아준다.
⑧spectrophotometer에서 563nmso의 흡광도를 측정한다.
⑨위의 결과에서 standard curve를 얻는다.

참고자료

· <예비보고서>
· - Modern Experimental Biochemistry, 3rd ed., Rodney Boyer.
· - Merck index, 12th ed., CambridgeSoft.
· - Biochemistry, 5th ed., Stryer, Berg, Tymoczko, Freeman publishing
· - http://en.wikipedia.org/wiki/Vitamin_C
· - http://www.sciencelab.com/page/S/PVAR/23051/SLD2275
· - http://www.lsbu.ac.uk/biology/enzyme/practical1.html
· - http://ptcl.chem.ox.ac.uk/MSDS/DI/3,5-dinitrosalicylic_acid.html
· - http://membres.lycos.fr/jjww/page231.htm
· <결과보고서>
· - Modern Experimental Biochemistry, 3rd ed., Rodney Boyer.
· - Merck index, 12th ed., CambridgeSoft.
· - Biochemistry, 5th ed., Stryer, Berg, Tymoczko, Freeman publishing
· - http://elchem.kaist.ac.kr/vt/chem-ed/sep/lc/hplc.htm
· - http://ptcl.chem.ox.ac.uk/MSDS/DI/3,5-dinitrosalicylic_acid.html