내동제의 종류와 농도, PVP 첨가가 돼지 수정란의 Vitrification 동결 융해 시 생존율에 미치는 영향

서지정보

· 발행기관 : 사단법인 한국동물생명공학회
· 수록지 정보 : 한국동물생명공학회지 / 20권 / 2호 / 129 ~ 135페이지
· 저자명 : 임정훈, 이규승, 김상근, 전연화

초록

본 연구는 돼지 수정란의 동결에 있어서 vitrification 동결 융해 후 내동제의 종류와 농도, PVP 및 sucrse와 trehalose의 첨가가 생존율에 미치는
영향을 조사하고자 수행하였다.
1. Vitrification 동결에 이용된 각 발생단계의 체외수정란은 1,063개 중 2세포기는 245 (23.0 %)개, 배반포는 256 (24.1%), 초기 배반포는 234 (22.0%), 확장 배반포는 221개 (20.8%), hatching 배반포는 107개 (10.1%)이었다. 상실배, 초기 배반포 및 확장배반포를 EDS와 ETS로 희석 후 vitrification 동결 융해했을 때 생존율은 각각 69.1%, 70.3%, 69.8% 및 62.5%, 61.7%, 63.6%로서 EDS군에서 확장 배반포군에서 가장 높은 생존율을 나타냈다.
2. 각 발생단계의 수정란을 vitrification 동결 융해했을 때 생존율은 초기 배반포는 61.1%, 확장 배반포는 27.8%, hatching 배반포는 16.7%로서 대조군의 92.3%, 71.2%, 55.8%에 비해 낮았지만 높은 생존율을 나타냈다.
3. 수정란을 EDS와 EDT 내동제에 10% 및 20% PVP 액을 첨가하여 희석 후 vitrification 동결 융해했을 때 정상적 발생을 나타내는 수정란은 74.3%, 77.5% 및 79.4% 및 71.1%였다. 동결 융해한 수정란을 24~48시간 배양했을 때 37.1%, 40.0% 및 35.3%, 31.6%로서 생존율이 현저하게 감소하였다. 수정란에 EDS와 EDT와 10% 및 20%의 PVP를 첨가한 내동제를 이용하여 동결 융해했을 때 PVP 농도간의 생존율은 유의한 차이가 없었다.
4. 각 발생단계의 수정란을 EDS 내동제로 vitrification 동결 융해 후 배양했을 때 발생율은 상실배는 58.2%, 36.4%, 14.5%였고, 초기 배반포는 62.5%, 45.8%, 20.8%였고, 확장 배반포는 74.1%, 61.1%, 29.6%였고, hatching 배반포는 60.0%, 40.0 %, 14.0%였다.

참고자료

· 없음