Israel Acute Paralysis Virus (IAPV)의 Nested PCR 검출법의 개발 (Development of Nested PCR Method for the Detection of Israel Acute Paralysis Virus (IAPV))

서지정보

· 발행기관 : 한국양봉학회
· 수록지 정보 : Journal of Apiculture / 24권 / 2호 / 93 ~ 99페이지
· 저자명 : 김일욱, 유미선, 강민희, 윤병수

초록

봉군붕괴현상(CCD; Colony Collapse Disorder)의 가장 주요한 잠재적인 원인중 하나로 보고되어진 Israel
Acute Paralysis Virus (IAPV)의 nested PCR 진단법을 개발하였다. IAPV의 증폭을 위하여 GenBank database에 등록되어 있는 IAPV (accession No. EF-219380) 염기서열을 분석하여 147bp를 증폭할 수 있는 inner 프라이머 쌍(IAPV-IF와 IAPV-IR)을 설계 및 제작하였다. 프라이머의 민감도는 164IAPV 클론을 사용하여 측정되었다. 본 연구에서 설계된 프라이머를 사용하여 direct PCR을 수행하였을 때 IAPV의 검출한계는 1pg으로 확인되었다. 또한 IAPV162P_PF와 IAPV113P_PR 프라이머를 사용하여 1차 PCR을 수행한 후 IAPV-IF와 IAPV-IR 프라이머를 사용한 nested PCR에서는 10fg까지 검출 가능함을 보였다. 본 연구에서 개발된 IAPV의 nested PCR법은 기존의 진단법에 비해 높은 민감도를 가지고 있으며, 이는 IAPV의 조기 진단과 효율적인 방제에 널리 사용될 수 있을 것으로 기대되는 바이다.

영어초록

We developed the nested PCR method for the detection of IAPV that was reported as a putative marker for
colony collapse disorder (CCD). We analysed the sequence of IAPV (accession No.EF219380) to amplify
IAPV gene. A pair of IAPV specific inner primers (IAPV-IF and IAPV-IR) was used for detection of 147
bp stable region of IAPV gene. The sensitivity test was performed with 164IAPV clone. The detection limit
of direct PCR with IAPV-IF and IAPV-IR was 1pg. However, the detection limit of nested PCR with 2 pair
of IAPV specific primers was calculated as 10fg. This results showed that the nested PCR method for the
detection of IAPV were highly sensitive and applicable to the early detection and identification of IAPV.

참고자료

· 없음