DNA 제한효소

목차

1. 실험제목
2. 실험날짜
3. 실험이론
4. 시약
5. 실험결과
6. 고찰
7. 참고문헌

본문내용

1.실험제목: COD 측정

2.실험날짜: 2021/04/19

3.실험 이론
실험에서 사용될 제한효소란 세균이 박테리오파지의 공격을 받으면 생산하는 효소로 이중 나선의 DNA의 특정한 염기서열을 인식해 그 부분의 절단에 있어 촉매작용을 하는 효소를 말한다. 대부분의 제한효소는 인식자리(recognition site) 또는 제한 자리(restriction site)라는 특정한 염기서열이 있는 자리에서 DNA를 절단한다. 제한효소는 회문이라는 양 사슬의 5’부터 3’ 방향으로 똑같은 서열을 가진 DNA의 부위를 인식해 작용한다. 제한효소가 DNA를 절단하면 이중 가닥 중 한 가닥이 돌출된 형태를 띠는데 이를 점착 말단(sticky end)이라 하며 이중 가닥을 수직으로 자르면 평활 말단(blunt end)이라고 한다. 또한 제한효소마다 인식하는 염기서열의 개수는 보통 4,6,8,12개의 염기를 인식한다. 이는 일반적인 원핵생물 게놈에서 평균 4000개마다 한번, 혹은 원핵생물 유전자당 1번 나타난다. 제한효소가 각기 다른 인식서열을 가지고 있기 때문에 DNA를 원하는 대로 자를 수 있으며 만약 세포에서 제한효소를 생성할 때 자신의 DNA를 절단하는 것을 막기위해 메틸화효소를 활성화시켜 자신의 DNA가 복제 될 때 제한자리에 있는 특정 염기에 메틸기를 첨가하면 그 부분을 절단하지 않는다. 그리고 제한효소는 소단위체의 구성형태, 절단 위치, 절단 서열의 모양, 필요한 조효소의 유무에 따라 크게 3가지로 나뉜다.

Ⅰ형 제한효소
분자량이 30만인 효소로 제한효소와 메틸화효소가 뭉쳐져 있고 인식자리와 제한자리가 서로 다르다.

참고자료

· Roberts RJ , "Restriction and modification enzymes and their recognition sequences", Nucleic Acids Res. 8 , January 1980, p 63–80.
· Polisky, B.; 외. “Specificity of substrate recognition by the EcoR I restriction endonuclease”, PNAS 72 (9): 3310–3314. (1975).