[충남대] 유전발생생물학실험 - Immunifluorescence

소개

충남대 유전발생생물학실험 보고서 입니다! (A+)

목차

I. 서론
II. 재료 및 방법
III. 결과
IV. 논의
V. 참고문헌

본문내용

면역형광법(Immunofluorescence)은 항원에 대한 항체의 특이성을 원리로 사용하여, 형광 염료를 세포 내의 특정한 생체 분자를 표적시켜 그 분포를 시각화하는 기술이다. 주로 형광단백질을 사용하여 항체의 위치를 보여주며, 형광현미경을 통해 그 결과를 확인할 수 있다.[1] 직접면역형광법은 형광 물질이 붙은 항체를 사용하여 표적 항원에 직접 결합하는 방식이다. 빠르고 특징적인 장점이 있지만 특정 표적 항언에 결합할 수 있는 항체의 수가 제한되어 있다. 간접면역형광법은 표지되지 않은 1차 항체, 1차 항체에 결합하는 형광 물질이 표지된 2차 항체를 이용하는 방식이다. 직접면역형광법보다 복잡하고 시간이 많이 소요된다.[2]
세포가 스트레스를 받으면 그 결과로 RNA 과립(RNA granules)의 하나인 스트레스 과립(stress granules, SG)을 형성한다. 스트레스 과립은 세포질의 mRNA를 함유하는 입자이다. 스트레스 과립에 존재하는 대표적인 단백질로는 RasGAP SH3-부위 결합단백질 1 (G3BP1) 등이 있다.[3] G3BP1은 스트레스 과립 형성을 유도하며, 일반적으로 스트레스 과립의 marker로써 사용된다.[4] 스트레스 과립과 관련된 많은 단백질은 배양된 세포에 일시적으로 스트레스를 가하고, 형광 단백질에 융합된 단백질 또는 세포를 고정시킨 뒤 항체 등을 사용하여 형광현미경으로 검출할 수 있다.[5]

참고자료

· Mandrell, R. E. et al. 1988. Lipooligosaccharides (LOS) of Neisseria gonorrhoeae and Neisseria meningitidis have components that are immunochemically similar to precursors of human blood group antigens. Carbohydrate sequence specificity of the mouse monoclonal antibodies that recognize crossreacting antigens on LOS and human erythrocytes, Journal of Experimental Medicine, 168 (1): 107–126.
· Ian D. Odell. 2013. Immunofluorescence Techniques, Journal of Investigative Dermatology (2013) 133, e4.
· 김경민. 2012. RNA Granules and Stress Granules in Virus Systems, Journal of Bacteriology and Virology 2012. Vol.42, No.3 p.247–254.
· Mahboubi et al. 2017. "Cytoplasmic stress granules: Dynamic modulators of cell signaling and disease, Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis of Disease. 1863 (4): 884–895.
· Aulas A et al. 2017. Methods to Classify Cytoplasmic Foci as Mammalian Stress Granules, Journal of Visualized Experiments(123).
· 김기광. 2017. 우유섭취를 통한 세포노화 억제 유효성 관련 연구, 충남대학교.
· Omer, A. et al. 2018. Stress granules counteract senescence by sequestration of PAI-1, EMBO reports, 19(5), e44722.
· Yidong Ge et al. 2022. The roles of G3BP1 in human diseases, Gene, Volume 821.
· Kapuscinski, J. 1995. DAPI: a DNA-specific fluorescent probe, Biotech, Histochem, 70 (5): 220–233.
· Fletcher MA et al. 1998. Human diploid cell strains (HDCS) viral vaccines, Developments in Biological Standardization. 93: 97–107.
· 박정수. 2004. 세포노화, 세포자연사, 발암, Journal of The Korean Geriatrics Soci 2004:8(1):1-7.