[생화학실험]단백질 분리정제 및 기능분석 - buffer 만들기

소개

"[생화학실험]단백질 분리정제 및 기능분석 - buffer 만들기"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론 및 원리
3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 토의 사항
7. 참고 문헌

본문내용

본 실험에서는 다음 실험에서 column chromatography를 하기 위해 완충용액(buffer)을 제조했다. 고농도 Stock solution인 1M의 Tris-HCl(pH7.4)을 우선 제조하는데, 고농도의 용액을 먼저 제조하면 나중에 고농도 용액을 이용해 여러 가지의 저농도의 buffer를 만드는 게 더 쉽기 때문이다. 1M의 Tris-HCl(pH7.4) 50㎖를 제조하기 위해서 필요한 Tris(MW = 121.14g/㏖)의 질량은 6.06g(소수점 둘째자리까지 반올림)으로, 전자저울을 이용해 덜어낸다. 비커에 증류수 30㎖와 함께 넣고 마그네틱 바와 stirrer을 이용해 충분히 섞어주는데, 최종 부피가 50㎖인데, 증류수를 30㎖만 넣는 이유는 HCl도 첨가해야 하기 때문에 여유를 줘야 하기 때문이다. 염기성인 Tris용액을 pH미터기로 측정하는데 그 전에 두 가지 기준용액을 통해 pH미터기를 calibration 해주고 pH미터기를 사용할 때는 사용법을 숙지하고 주의사항을 지켜야 한다.

참고자료

· 줌달의 일반화학, Steven S. Zumdahl, Susan A. Zumdahl, 2010, 8th edition p.98,153,691, 694-696
· 레닌저 생화학 상, David L Nelson, Michael M.Cox, 2014 제 6판, p90-91