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미생물 배양, 배지 만들기 예비보고서2025.01.121. 배지 배지는 미생물부터 동물, 식물에 이르는 배양체의 생장을 위해 필요한 영양물질을 용액 이나 고형분 형태로 조제한 것을 말한다. 어떠한 균을 배양하느냐에 따라 요구되는 물질 이 다르기 때문에, 목적에 따라 적절한 배지를 만들어야 한다. 2. 미생물 미생물(微生物, microorganism) 이란 너무 작기 때문에 인간의 눈에는 보이지 않는 생물 을 통칭한다. 원생생물, 진균, 고균, 세균, 바이러스를 모두 포함하기 때문에 미생물은 매 우 다양한 생물체들의 집합이다. 3. 배지의 종류 배지는 목적에 따라 증식배지, 증균배지, ...2025.01.12
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MTT assay를 통한 세포 viability 측정2025.01.051. MTT assay MTT assay는 살아있는 세포에서만 환원 반응이 일어나는 MTT에 의한 세포 대사 활성을 평가하는 방법입니다. 항암제를 투여하지 않은 배지와 농도별로 항암제를 처리한 배지의 UV 흡광도 값을 비교하여 세포의 생존 비율(cell viability)을 계산할 수 있습니다. 실험 결과, DOX의 농도가 증가할수록 세포 생존율이 감소하는 것을 확인할 수 있었습니다. 2. 항암제 독성 평가 항암제를 세포 배양배지에 투여한 후 배양한 암세포는 약제의 농도에 따라서 생존 세포의 비율이 줄어듭니다. MTT assay를 ...2025.01.05
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[화공생물공학기초실험 A+결과레포트] 유산균 음료로부터 미생물 분리 평판 계수법2025.01.121. 유산균 음료로부터 미생물 분리 실험을 통해 유산균 음료에서 미생물을 분리하고 평판 계수법을 사용하여 미생물 수를 측정하였다. 실험 결과 BCP Agar 배지와 MRS Agar 배지에서 다양한 미생물 콜로니가 관찰되었으며, 배지 종류에 따라 콜로니 수에 차이가 있었다. 실험 과정에서 오염 가능성이 있었으며, 정확한 결과를 얻기 위해서는 멸균 처리와 파라필름 밀봉 등의 주의가 필요하다. 2. 평판 계수법 평판 계수법을 사용하여 유산균 음료 내 미생물 수를 측정하였다. 이상적인 결과는 10배 희석 간 콜로니 수 차이가 10배 나야 ...2025.01.12
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[유전학] 세포배양 방법 및 과정 분석2025.05.031. 세포 배양 세포 배양은 일반적인 자연환경과는 다른 통제된 조건에서 세포가 성장하는 과정을 총칭한다. 세포가 살아있는 조직에서 분리가 된다면 생존할 가능성이 낮아지기 때문에 신중하게 제어된 조건을 유지해줄 필요가 있다. 이 조건은 세포의 유형에 따라 다르지만 일반적으로 아미노산, 탄수화물, 비타민, 무기질 등의 필수 영양소와 호르몬, 항생제 등이 필요하고 이를 적절하게 공급하기 위한 배지가 있는 적절한 용기로 구성 되어야한다. 2. 세포 배양 방법 세포 배양을 하기 위해서는 배양할 세포를 얻어와야 하는데 그 방법에는 크게 두가지...2025.05.03
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[충남대] 분자생물, 생화학 실험 보고서12025.01.281. 대장균 배양 실험에서는 대장균(Escherichia coli, E. coli.)을 이용하여 실험을 진행하였다. 대장균은 정온동물의 창자에서 많이 볼 수 있는 박테리아로 단백질 발현에 대해 가장 일반적인 숙주이다. 대장균은 실험실에서 보관과 배양이 용이하다는 장점이 있어 주로 사용하는 원핵생물 모델이며, 자가복제를 하는 DNA 고리인 Plasmid DNA를 가지고 있다. 이는 DNA vector(운반체)로써 유전자 재조합 기술의 중요한 재료이다. 2. 배지 제조 실험에서는 TB(Terrific broth) 배지를 사용하였다. T...2025.01.28
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Hybridoma cell and antibody purification2025.04.271. 단일클론항체 단일클론항체는 하나의 에피톱에 특이성을 갖는 항체로, 항원을 동물에 주입하고 B세포를 추출하여 골수종 세포와 융합하여 hybridoma cell을 제조하여 얻을 수 있다. 단일클론항체는 높은 표적 선택성 때문에 다양한 임상 분야에서 활용되고 있다. 2. HAT 배지 HAT 배지는 핵산 합성을 위한 salvage pathway의 전구체인 hypoxanthine과 thymidine을 포함하며, aminopterin 성분은 de novo pathway를 억제한다. 따라서 HAT 배지에서 세포를 배양하면 salvage p...2025.04.27
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마우스 종양 세포 4T1(동물세포) 배양 실험2025.01.181. 동물세포 배양 동물세포를 배양하는 것은 모든 세포생물학 실험에 있어서 가장 기초적인 실험 방법으로, qRT PCR, MTT assay, Cell Cycle Analysis 등의 In vitro(시험관 내) 수준에서 필요한 실험과 동물에 종양을 이식하는 등의 In vivo (생체 내) 수준의 연구에서도 사용되는 방법이다. 이번 실험에서는 마우스 종양 세포 4T1를 혈청 배지에 배양하는 방법으로 실험을 진행하였다. 2. 마우스 종양 세포 4T1 마우스 종양 세포 4T1은 진핵세포이자, 상피세포이며, 성장 속도가 빠른 세포이다. 마...2025.01.18
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A+[일반생물학및실험] spreading, streaking 레포트2025.05.041. Spreading LB plate에 실험한 날짜, 조 이름, 접종 균주의 이름, 희석 정도를 labelling한다. pipette을 이용하여 미생물 배양액 80ul을 따서 plate에 접종한다. 멸균된 삼각봉을 이용하여 배양액을 골고루 펴서 도말한다. 퍽퍽해지는 게 느껴질 때까지 골고루 펴준다. 도말이 끝난 배지는 뒤집어서 37℃ incubator에 24시간 배양한 후, 형성된 colony를 관찰한다. 2. Streaking single colony를 loop으로 살짝 떠서 배지의 한쪽을 지그재그로 도말한 후 120° 돌린다....2025.05.04
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병원체의 분리 및 동정 방법2025.01.251. 병원체 분리 병원체 분리는 감염된 조직이나 체액에서 병원체를 분리하여 순수 배양하는 과정입니다. 이를 위해 다양한 배양 매체와 환경 조건을 사용하며, 세균, 바이러스, 곰팡이, 원생동물 등 다양한 병원체를 분리할 수 있습니다. 병원체 분리는 질병 진단, 치료법 개발, 공중보건 정책 수립 등 다양한 분야에서 중요한 역할을 합니다. 2. 병원체 동정 병원체 동정은 분리된 병원체의 종류와 특성을 확인하는 과정입니다. 현미경 관찰, 생화학적 테스트, 분자생물학적 기법 등을 통해 병원체의 종류를 정확히 동정할 수 있습니다. 이는 적절한...2025.01.25
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아주대 생명과학실험 Plasmid DNA 추출2025.01.131. 플라스미드 DNA 플라스미드 DNA는 원핵세포의 세포질 및 진핵생물의 세포 소기관에서 발견되는 작고 원형의 이중 가닥 DNA 분자이다. 이 DNA 조각들은 자율적으로 복제할 수 있으며, 세포의 염색체 DNA와는 독립적으로 존재한다. 플라스미드는 보통 추가적인 유전 정보를 포함하고 있으며, 특정 환경 조건에서 숙주 세포에 유익할 수 있는 기능들을 부여한다. 2. 제한효소 제한효소(EcoRI)는 플라스미드 DNA를 실험실에서 조작하기 위한 주요 도구이다. 이 효소는 특정 짧은 DNA 서열을 인식하고 절단할 수 있는 능력이 있어, ...2025.01.13
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