Hybridoma cell and antibody purification
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[면역학실습] Hybridoma cell and antibody purification
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2023.01.25
문서 내 토픽
  • 1. 단일클론항체
    단일클론항체는 하나의 에피톱에 특이성을 갖는 항체로, 항원을 동물에 주입하고 B세포를 추출하여 골수종 세포와 융합하여 hybridoma cell을 제조하여 얻을 수 있다. 단일클론항체는 높은 표적 선택성 때문에 다양한 임상 분야에서 활용되고 있다.
  • 2. HAT 배지
    HAT 배지는 핵산 합성을 위한 salvage pathway의 전구체인 hypoxanthine과 thymidine을 포함하며, aminopterin 성분은 de novo pathway를 억제한다. 따라서 HAT 배지에서 세포를 배양하면 salvage pathway을 통해서만 핵산을 합성해야 하므로, HGPRT 또는 TK 결손 골수종세포와 B세포를 융합하여 hybridoma cell을 선택적으로 배양할 수 있다.
  • 3. PC61 hybridoma cell
    PC61은 CD25에 결합하는 단일클론항체를 생산하는 hybridoma cell이다. CD25는 IL-2 receptor의 α chain이며, PC61 항체는 CD25와 결합하여 IL-2 receptor와 IL-2 사이의 결합을 방해함으로써 T세포의 IL-2 의존성 생장을 억제할 수 있다. 이를 응용하면 만성 염증 자가면역질환자에게 T-reg 세포를 선택적으로 증식시키는 치료가 가능할 것으로 기대된다.
  • 4. 항체 정제
    항체 정제를 위해 affinity chromatography를 사용하며, protein A resin과 protein G resin이 충진제로 자주 사용된다. 이들 resin은 pH가 중성일 때 항체의 Fc 부위와 결합하지만, pH가 산성이나 염기성 환경이 되면 항체와 더 이상 결합하지 않고 분리된다.
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  • 1. 단일클론항체
    단일클론항체는 면역학 및 생물학 분야에서 매우 중요한 도구입니다. 이는 단일 B 세포로부터 생산되는 균일한 항체로, 특정 항원에 대한 높은 특이성과 친화도를 가지고 있습니다. 단일클론항체는 진단, 치료, 연구 등 다양한 분야에서 활용되고 있습니다. 예를 들어 암 치료, 자가면역질환 치료, 감염성 질환 진단 등에 사용되고 있습니다. 또한 단일클론항체는 항체 공학 기술의 발전과 함께 지속적으로 개선되고 있어, 향후 의학 및 생명과학 분야에서 더욱 중요한 역할을 할 것으로 기대됩니다.
  • 2. HAT 배지
    HAT 배지는 하이브리도마 세포 선별 및 유지에 중요한 배지입니다. HAT 배지에는 hypoxanthine, aminopterin, thymidine이 포함되어 있어, 정상 세포는 성장할 수 없지만 하이브리도마 세포는 성장할 수 있습니다. 이를 통해 하이브리도마 세포를 선별하고 순수하게 유지할 수 있습니다. HAT 배지는 단일클론항체 생산 과정에서 필수적인 요소이며, 항체 개발 및 생산 기술 발전에 큰 기여를 해왔습니다. 향후에도 하이브리도마 기술 발전과 함께 HAT 배지의 중요성은 지속될 것으로 보입니다.
  • 3. PC61 hybridoma cell
    PC61 hybridoma 세포는 CD25(IL-2 receptor alpha chain)에 대한 단일클론항체를 생산하는 세포주입니다. CD25는 T 세포 활성화의 중요한 지표이므로, PC61 항체는 면역 반응 조절 및 자가면역질환 연구에 널리 사용됩니다. PC61 hybridoma 세포주는 안정적이고 높은 항체 생산성을 가지고 있어, 관련 연구 및 진단/치료 분야에서 매우 유용하게 활용되고 있습니다. 향후에도 PC61 hybridoma 세포주는 면역학 및 생물의학 분야에서 중요한 도구로 활용될 것으로 기대됩니다.
  • 4. 항체 정제
    항체 정제는 단일클론항체 생산 과정에서 매우 중요한 단계입니다. 항체 정제를 통해 목적하는 항체를 순수하게 분리하고 농축할 수 있습니다. 다양한 크로마토그래피 기술, 친화성 크로마토그래피, 전기영동 등의 방법이 사용되며, 각각의 장단점이 있습니다. 최근에는 단백질 A/G 친화성 크로마토그래피가 가장 널리 사용되고 있습니다. 항체 정제 기술의 발전은 단일클론항체의 순도와 수율을 높여 의학 및 생명과학 분야에서의 활용도를 높이는데 기여하고 있습니다. 향후에도 항체 정제 기술의 지속적인 발전이 기대됩니다.