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pH and buffer2025.05.031. pH pH는 물의 산성이나 알칼리성의 정도를 나타내는 수치로서 수소 이온 농도의 지수이다. pH가 낮으면 산성, pH가 높으면 염기성이 된다. pH는 산해리상수 지수로 나타내며, 산의 강도를 나타내는 데 사용된다. 2. Buffer 완충액은 산이나 염기의 첨가에도 공통 이온 효과에 의해 pH가 거의 변하지 않는 용액으로, 약산과 그의 짝염기 또는 약염기와 그의 짝산으로 이루어진 혼합용액이다. 완충작용의 핵심은 첨가된 산이나 염기의 양에 비해 약산과 짝염기의 양이 크다는 점이다. 3. Methyl Orange 메틸오렌지는 아조기...2025.05.03
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Column Chromatography용 Tris-HCl Buffer 제조2025.12.161. Buffer 용액 Buffer는 약산과 그의 켤레염기로 이루어진 혼합물로, 소량의 산이나 염기가 첨가될 때 pH 변화에 저항하는 경향을 가진다. Henderson-Hasselbalch 방정식으로 pH를 계산할 수 있으며, Buffer가 평형 상태일 때 pH는 약산의 pKa와 같다. Buffer 용액은 실험 환경의 재현성을 유지하고 단백질의 원하는 pH를 조성하기 위해 사용된다. 2. pH meter 사용법 pH meter는 용액의 수소이온 활동도를 측정하는 전기 장치로, 전압계와 pH 반응 전극, 기준 전극으로 구성된다. 사용...2025.12.16
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[생화학실험]단백질 분리정제 및 기능분석 - buffer 만들기2025.05.051. 단백질 분리정제 및 기능분석 이 실험에서는 단백질 분리정제 및 기능분석을 위한 준비 과정으로 buffer를 제조하는 방법을 다룹니다. Buffer는 pH 변화에 영향을 받지 않는 용액으로, 생체반응에서 생성되는 산과 염기를 흡수할 수 있습니다. 실험에서는 1M Tris-HCl (pH 7.4), NaCl, MgSO4 stock solution을 제조하고, 이를 이용해 다양한 NaCl 농도의 elution buffer를 만드는 과정을 설명합니다. 또한 pH 미터기 사용법과 주의사항, 그리고 alkaline phosphatase 정...2025.05.05
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[일반화학실험]Phosphate Buffer 만들기2025.05.111. Phosphate Buffer 만들기 Phosphate Buffer는 해리단계가 다른 두 물질을 혼합하여 제조한다. 예를 들어 Sodium Phosphate Buffer는 Sodium Phosphate Monobasic과 Dibasic을, Potassium Phosphate Buffer는 Potassium Phosphate Monobasic과 Dibasic을 섞어서 제조한다. 그러나, PBS는 Sodium Phosphate Dibasic과Potassium Phosphate Monobasic을 넣어 buffering capaci...2025.05.11
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[생화학실험] Western blot Analysis 완충용액 제조와 시약 제조 시 유의사항2025.01.291. Western Blot Analysis Western Blot은 전기영동을 통해 분리된 단백질 중 항원-항체 반응을 이용하여 특정 단백질의 존재를 확인하는 방법입니다. 실험 과정 중 과도한 pH 변화를 안정화시키기 위해 완충용액(Buffer)를 사용하는데, Western Blot Analysis에 필요한 완충용액은 Tris-Buffered Saline, Tris-Glycine, Transfer Buffer 등이 있습니다. 2. Tris-Buffered Saline Tris-Buffered Saline은 용액의 pH를 조절하는 ...2025.01.29
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Restriction Enzyme Digestion and Gel Electrophoresis 레포트2025.01.211. Plasmid DNA와 Vector Plasmid DNA는 박테리아 세포 내에 염색체와 별도로 존재하면서 독자적으로 복제, 증식할 수 있는 원형 DNA 분자를 말한다. Plasmid Vector는 원하는 특정 유전자를 운반할 수 있고, 한 세대의 박테리아로부터 다음 세대로 전달되기 때문에, DNA 클로닝을 위한 핵심적인 도구이다. Vector에는 restriction enzyme이 작용하는 multicloning site과, 클로닝이 이루어진 후 많은 박테리아 중에서 vector를 가지고 있는 박테리아만 분리할 수 있도록 하는...2025.01.21
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2주차_pipetting, 50X TAE buffer preparation2025.05.141. Pipetting 사용법 및 주의사항 피펫은 액체 시료를 옮길 때 사용하는 실험기구로, 일체형으로 구성된 유리 피펫부터 전자 피펫까지 그 종류가 매우 다양하다. 피펫은 부분적으로 진공을 만들고, 선택적으로 진공을 풀 때 액체가 끌려오는 현상을 이용한다. 마이크로 피펫의 경우 1~1000 μL 범위에 해당하는 액체를 옮길 때 사용하며, 세부적으로 P10, P20, P200, P1000 등으로 구분할 수 있다. 피펫의 구조는 버튼(plunger), volume adjustment knob 등으로 구성되어 있으며, 용액을 옮길 때는...2025.05.14
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Mini-prep 및 전기영동을 통한 Plasmid DNA 추출2025.12.121. Alkaline Lysis Alkaline lysis는 pH 변화를 이용하여 대장균에서 plasmid DNA를 추출하는 화학적 방법입니다. 세포벽과 세포막을 파괴한 후 염색체 DNA와 plasmid DNA를 크기 차이에 따라 분리합니다. 4가지 buffer(Solution 1-4)를 순차적으로 사용하여 plasmid DNA를 정제합니다. Solution 1은 세포벽 파괴와 RNA 분해를 촉진하고, Solution 2는 세포막을 깨며, Solution 3은 pH를 중화하여 plasmid DNA만 원래 형태로 복구되도록 하며, S...2025.12.12
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A+ 생화학실험 <퀴즈&기말고사 대비 정리노트>2025.01.201. Pipette Pipette는 액체의 부피를 정확히 측정하고 이동하기 위한 도구입니다. 다양한 종류의 pipette이 있으며, 사용 시 주의사항이 있습니다. 예를 들어 사용 전후로 pipette tip을 교체하여 샘플 간 교차오염을 방지해야 하며, 지정된 범위 내에서 적정 부피의 액체를 취급해야 합니다. 2. Micropipette 사용법 Micropipette 사용법은 다음과 같습니다. 1) 옮기고자 하는 용액의 부피에 적합한 pipette 선택 후, plunger를 돌리며 용량 조절. 2) Top holder에 적합한 멸균...2025.01.20
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분자생물학실험 Gene cloning_TAE buffer 제작2025.04.271. TAE buffer 제작 TAE buffer 제작(30ml 50X TAE buffer)의 목적, 재료, 방법 등을 자세히 설명하고 있습니다. TAE buffer는 DNA 전기영동에 사용되는 완충액으로, Tris, acetic acid, EDTA 성분으로 구성됩니다. 제작 방법은 각 성분의 양을 계산하여 증류수와 혼합하고 멸균하는 과정으로 이루어집니다. 2. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 증폭 기술로, DNA 중합효소를 사용하여 원하는 DNA 염기서열을 대량으로 증폭시킬 수 있습니다. PCR에 필요한 주요 요소는 주...2025.04.27
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