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2022년 1학기 서울대 생물학실험 모듈 3 실험보고서2025.01.231. 형질전환 본 실험에서는 재조합된 플라스미드로 대장균을 형질전환하고, PCR과 전기 영동을 통해 형질전환의 결과를 DNA 수준에서 확인하고자 하였다. 여러 종의 플라스미드를 대장균에 도입해 형질전환을 유도했으며, colony PCR을 통해 도입된 플라스미드를 대량으로 복제한 후 확인했다. 2. PCR PCR은 DNA 중합 효소와 프라이머를 이용해 DNA의 특정 부분을 대량으로, 인공 환경에서 복제하는 기술이다. PCR을 통해 실험에서 활용되는 DNA를 대량으로 복제해 사용할 수 있으므로 PCR 기술은 유전 공학에서 매우 중요하다...2025.01.23
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[A]서강대학교 현대생물학실험2_1차 풀레포트_PCR과 Agarose gel electrophoresis and gel purification2025.01.181. Basic Laboratory Techniques 배지는 세포 배양을 위한 필요물질이 들어있는 것으로 LB broth와 LB agar plate를 이용한다. 수용성 세포를 형질전환 하고 선택배지로 제조된 LB agar plate를 이용해 생성된 colony로 형질전환 효율을 계산한다. 2. Competent Cell 수용성 세포(Competent cell)란, 외부의 DNA를 수용할 수 있는 상태의 박테리아로, 자연적으로 유도될 수 있지만 본 실험에서는 Ca2+ 용액 처리와 냉각과 열 충격을 주어 인위적으로 유도한다. 3. P...2025.01.18
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서울대 생물학실험 DNA Techonology (A+)2025.01.291. DNA 기술의 원리와 분석 방법 본 실험에서는 DNA와 관련된 기술과 분석 방법을 파악하고 대장균에 특정 유전자를 삽입하는 것이 목표이다. 실험을 통해 DNA 클로닝, 형질전환, PCR, 젤 전기영동, 제한효소 처리 등 다양한 DNA 기술을 학습하고 이해할 수 있었다. 2. 대장균을 이용한 DNA 기술 실험 본 실험에서는 대장균 세포에 다양한 플라스미드를 도입하여 형질전환을 유도하고, 이를 통해 DNA 기술의 원리와 분석 방법을 확인하였다. 실험 결과 플라스미드가 성공적으로 도입된 대장균 colony에서는 흰색이 나타났으며, ...2025.01.29
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식물분자생물학실험 Genotyping 결과보고서2025.01.181. Genotyping 이 보고서는 식물 샘플에서 추출한 Genomic DNA를 PCR로 증폭하고 gel electrophoresis를 통해 DNA 삽입 여부를 확인하는 실험 결과를 다루고 있습니다. 실험 결과, T-DNA-specific primer를 사용한 샘플에서 600~700bp 사이의 밴드가 검출되었으며, 이는 해당 식물에 T-DNA가 Homozygote 상태로 삽입되었음을 의미합니다. 이러한 실험 기법은 형질전환 식물에서 유전적 특성의 안정적인 유지를 증명하고 연구 및 상업적 활용에 있어 예측 가능성을 제공하는 데 중요...2025.01.18
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PCR 관련 퀴즈 및 정답(생화학) A+ 과제레포트2025.01.201. PCR의 3단계 procedures PCR 반응요소에는 Target DNA, Primers (oligonucleotides complementary to target), Nucleotides(dATP, dCTP, dGTP, dTTP), Thermostable DNA polymerase가 있다. PCR의 세 가지 반응 단계는 DNA 변성 (Denaturation), primer 의 Annealing, 신장 반응 (Extension)이다. DNA 변성 단계에서는 95℃의 열을 가해 DNA 이중 가닥을 분리시킨다. Annealing...2025.01.20
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[생명공학 레포트] gDNA isolation 및 T7E1 assay를 통한 genome editing 확인2025.05.031. gDNA isolation gDNA는 plasmids와 같은 extra-chromosomal DNAs와는 다르게 chromosomal DNA를 의미한다. gDNA를 분리하는 단계에서는 cell과 CLS(Cell Lysis Solution), proteinase K를 섞어 DNA 추출을 위해 cell을 파괴하는 역할을 한다. CLS에는 SDS, Tris-HCl, EDTA 등이 들어가 있으며, SDS는 cell membrane의 lipid를 제거하고, Tris-HCl은 pH 변화를 방지하며, EDTA는 세포 내의 DNases의 역...2025.05.03
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[유전공학] CRISPR/Cas9 system과 관련논문 분석2025.05.031. CRISPR/Cas9 System CRISPR/Cas9 System은 현재 가장 많이 사용되고 있는 3세대 Genome Editing 기술입니다. CRISPR은 박테리아에서 발견되는 짧은 회문서열을 의미하며, 이는 박테리아가 박테리오파지에 대해 가지고 있는 adaptive immunity에서 중요한 역할을 합니다. CRISPR 부위 사이에는 spacer라는 부위가 있는데, 이는 이전에 박테리아 내부에 침입한 경험이 있는 파지의 서열 일부를 저장해 둔 것을 의미합니다. pre-crRNA가 생성되고 tracrRNA가 결합하면 gu...2025.05.03
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PCR을 이용한 유전자 증폭 실험 예비 보고서2025.01.031. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 단백질(표적 핵산)을 증폭해서 검출하는 검사법으로, 두 개의 primer(시발체) 사이에 낀 DNA를 시험관 내에서 대량(20만~50만배)으로 증폭시킬 수 있는 혁명적인 방법입니다. PCR은 DNA의 해리(denaturation), primer와 주형 DNA의 결합(Annealing), DNA의 신장(Extension)의 3단계로 이루어지며, 이를 1 cycle로 하여 2의 제곱으로 증폭됩니다. PCR은 생물의 분류, 의료(유전병 진단), 범죄 수사(DNA 지문 분석) 등 DNA를 취급하는 ...2025.01.03
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PCR을 진행하기 위한 Primer design 및 전기영동 레포트 (A+ 평가자료)2025.05.081. Primer design Primer를 designing 하는 과정에서 Primer와 template DNA의 특이적인 결합이 가능할 수 있는 이유에 관하여 의문을 가져볼 수 있었고, Primer의 결합이 정상적으로 이루어지기 위해서는 어떤 조건을 갖추어야 하는지에 관하여 탐구해볼 수 있었다. Primer의 길이, 염기서열 구성, Tm 값 등의 조건을 고려해야 한다는 것을 알 수 있었다. 2. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR 과정을 거쳐 target으로 하는 DNA A를 전기영동을 해보았고, 그...2025.05.08
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[유전학] DNA sequencing, vector의 제작, NGS2025.05.031. DNA sequencing DNA는 단백질을 암호화 하고있는 물질로 A,T,G,C라는 기본 단위로 이루어진다. 어떤 서열을 갖고 있는 지에 따라 결과적으로 생산되는 단백질이 달라지게 되는데 이 서열을 확인하는 것은 분자생물학에 있어서 큰 의미가 있다. DNA sequencing은 그 DNA 서열을 확인하는 방법이다. 과거에는 그 방법으로 sanger method를 사용했지만 현재는 더욱 빠르고 신속하게 원하는 DNA서열을 확인할 수 있는 방법인 NGS를 통해 염기서열을 확인한다. 2. Vector 제작 우리는 DNA 재조합 기...2025.05.03
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