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바이러스학 실험: Transfection과 Subculture2025.12.171. Transfection Transfection은 세포 내부에 외래 유전자를 인위적으로 도입하여 원하는 DNA를 발현시키는 실험 방법입니다. 본 실험에서는 polyethylenimine(PEI)을 transfection reagent로 사용했습니다. PEI는 중성 pH에서 높은 양전하 밀도를 가진 합성 polymer로, 음전하를 띤 DNA를 감싸 세포 내부로 전달하는 역할을 합니다. 293T cell line에 GFP 발현 plasmid DNA를 transfection한 결과, 형광현미경을 통해 녹색 빛을 띠는 세포들이 관찰되어...2025.12.17
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바이러스학 실험: Transfection 방법 및 원리2025.12.171. Transfection Transfection은 세포 내부에 외래 유전자를 인위적으로 도입하여 원하는 DNA를 발현시키는 실험 방법입니다. DNA 발현을 통해 단백질이 생성되며, 이를 이용하여 바이러스를 생산할 수 있습니다. 핵산의 음전하 특성으로 인해 세포막 통과를 위해 양이온, 양이온 중합체, 양이온 리포솜 등의 화학적 방법이 사용됩니다. 2. 인산칼슘(Calcium Phosphate) Transfection 인산 이온을 함유한 염수 용액과 염화칼슘 용액을 혼합하면 양전하의 칼슘과 음전하의 인산염 침전물이 형성되어 표적 D...2025.12.17
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[유전학] transfection method와 T7E12025.05.031. Transfection 방법 Transfection은 세포 내로 외부의 DNA나 RNA가 인위적으로 전달되는 과정을 의미한다. 핵산이 세포 내부로 들어가려면 세포막을 통과해야 하는데 이 방법에는 화학적, 생물학적, 물리학적 방법들이 이용된다. 대표적인 물리학적 방법으로는 Electroporation과 biolistics(유전자 총)이 있으며, 화학적 방법으로는 cationic lipid transfection이 있다. 각각의 방법들은 장단점이 있어 실험 목적과 이용하는 세포에 따라 선택하게 된다. 2. 새로운 Transfect...2025.05.03
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Trypsin EDTA와 Cell Transfection 기술2025.11.171. Trypsin EDTA Trypsin EDTA는 세포 배양 실험에서 필수적인 시약이다. Trypsin은 단백질 분해효소로서 collagen 등의 섬유성 및 당단백질을 분해하고, EDTA는 금속 이온을 킬레이트하여 세포의 접착을 제거한다. 이를 통해 플라스크 등의 배양기 표면에 부착된 세포를 효과적으로 떼어낼 수 있으며, 세포 수확 및 배양에 필수적이다. 또한 세포가 과도하게 밀집되는 것을 방지하고 단일 상태로 유지하여 실험의 정확성과 신뢰성을 높인다. 2. Cell Transfection - 화학적 방법 Cell Transfe...2025.11.17
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Cell Transfection and Cell lysis 레포트2025.01.211. Cell Transfection Cell transfection은 관심있는 외부 gene을 세포에 인공적으로 도입하여 외부 DNA가 세포 내에서 발현되도록 하는 과정입니다. 이를 통해 세포의 특성을 변화시켜 유전자나 단백질의 발현과 기능을 연구할 수 있습니다. 다양한 화학적, 물리적, 바이러스 매개 방법이 사용되며, 특히 HEK-293T 세포는 transfection 효율이 높아 널리 사용됩니다. 또한 epitope tagging 기술을 통해 단백질의 특성을 분석할 수 있습니다. 2. Cell Lysis Cell lysis는 ...2025.01.21
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Genome editing / knockout 벡터 확립 및 도입2025.05.031. Genome Editing Genome Editing은 생명체의 특정 염기서열을 교정하거나 편집하는 기술을 의미한다. 이러한 Genome editing 기술에는 과거부터 이용되었던 Zinc finger nucleases나 TALEN을 이용하는 방법이 있었으나 현재는 높은 정확도와 효율성을 갖추고, 비교적 쉽게 디자인할 수 있는 기술인 CRISPR을 주된 tool로써 사용하고 있다. CRISPR/Cas9 기술은 효소가 절단하는 부분의 염기서열을 guide RNA(gRNA)로서 인위적으로 제공해주어 원하는 부분의 DNA를 절단하도...2025.05.03
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Wnt/β-catenin signaling activation full report2025.01.141. Wnt 신호 전달 경로 Wnt 신호 전달 경로는 세포 운명 결정, 세포 이동, Ca2+ 유입, 기관 형성 등 다양한 세포 반응을 조절하는 경로입니다. Axin, PP2A, APC, CK1, GSK3로 구성된 파괴 복합체는 β-catenin 단백질의 분해를 조절하여 Wnt 신호 전달을 조절합니다. β-catenin은 Wnt 신호 전달에서 다양한 역할을 하는 단백질로, 유전자 발현 조절과 세포 간 부착 조절에 중요한 역할을 합니다. 2. Lithium chloride (LiCl) Lithium chloride (LiCl)는 파괴 ...2025.01.14
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DNA plasmid transfection, Immunoprecipitation)2025.01.231. DNA plasmid transfection DNA plasmid transfection 실험의 목적은 고분자-유전자 복합체를 이용하여 동물 세포에 plasmid DNA를 넣어 세포의 형질을 전환하는 것이다. 이를 위해 먼저 단백질 A에 대한 염기서열 옆에 epitope tag인 V5 폴리펩타이드에 대한 염기서열을 같이 붙여서 플라스미드 DNA를 세포 내에 넣어준다. 그러면 플라스미드가 핵내에 들어가서 DNA 역할을 할 수 있고, 이후 벡터 DNA가 mRNA로 전사되어 V5가 붙은 단백질 A가 발현된다. 2. Immunopre...2025.01.23
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분자생물학 실험 (A+) Mammalian cell cultrure and transfection 결과보고서2025.01.041. Mammalian cell culture 보고서에는 포유동물 세포 배양 실험에 대한 내용이 포함되어 있습니다. 실험에서는 포유동물 세포를 배양하고 형질 도입(transfection)하는 과정이 설명되어 있습니다. 실험 결과와 관찰 내용이 자세히 기술되어 있습니다. 2. Transfection 보고서에는 포유동물 세포에 유전자를 도입하는 형질 도입(transfection) 실험에 대한 내용이 포함되어 있습니다. 실험에서는 다양한 방법을 사용하여 세포에 유전자를 도입하고 그 결과를 관찰하였습니다. 실험 과정과 결과가 자세히 기술되...2025.01.04
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(RNA inteference를 사용한 유전자 억제 발현 시험)2025.01.231. Transformation Transformation은 분자생물학적 현상으로 박테리아 사이에서 외래 DNA 분자를 수평으로 전달하여 세포에 도입시켜 유전자가 재조합되는 현상이다. 실험실에서는 외부 DNA segment를 세포에 삽입하여 원하는 타겟 형질을 발현시키는 방법으로 사용하며, 최근에는 비세균성 세포인 animal/plant cell에 새로운 유전자를 삽입하는 경우까지 포함한다. 형질전환은 자연 상태에서도 일어나고 실험실에서도 유도할 수 있는데, 자연계에서는 starvation이나 cell density와 같은 조건에서...2025.01.23
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