
Cell Transfection and Cell lysis 레포트
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2024.08.31
문서 내 토픽
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1. Cell TransfectionCell transfection은 관심있는 외부 gene을 세포에 인공적으로 도입하여 외부 DNA가 세포 내에서 발현되도록 하는 과정입니다. 이를 통해 세포의 특성을 변화시켜 유전자나 단백질의 발현과 기능을 연구할 수 있습니다. 다양한 화학적, 물리적, 바이러스 매개 방법이 사용되며, 특히 HEK-293T 세포는 transfection 효율이 높아 널리 사용됩니다. 또한 epitope tagging 기술을 통해 단백질의 특성을 분석할 수 있습니다.
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2. Cell LysisCell lysis는 세포막이 파괴되어 세포 내용물이 분산 또는 용해되는 현상을 말합니다. Western blot 등의 실험에서 특정 단백질을 분석하기 위해 세포를 lysis하여 단백질 혼합물을 얻습니다. lysis buffer는 단백질 변성을 방지하고 안정성을 유지하기 위해 다양한 성분으로 구성됩니다. 실험 목적과 단백질 특성에 따라 적절한 lysis buffer를 선택해야 합니다.
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1. Cell TransfectionCell transfection is a critical technique in molecular biology and biotechnology, allowing researchers to introduce foreign genetic material into cells. This process enables the study of gene function, protein expression, and cellular pathways, as well as the development of therapeutic applications. The successful transfection of cells depends on various factors, including the choice of transfection method, the properties of the genetic material being introduced, and the characteristics of the target cells. Effective cell transfection can lead to valuable insights into cellular processes and the development of innovative treatments for a wide range of diseases. However, it is essential to carefully optimize the transfection protocol and consider potential off-target effects or unintended consequences. Overall, cell transfection remains a powerful tool for advancing our understanding of cellular biology and driving progress in the field of biomedical research.
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2. Cell LysisCell lysis is a fundamental technique in molecular biology and biochemistry, enabling the extraction and analysis of cellular contents, such as proteins, nucleic acids, and other biomolecules. This process involves the disruption of the cell membrane and the release of the cell's internal components, which can then be studied or used for various applications. The choice of cell lysis method depends on the specific cell type, the target analytes, and the downstream analysis or applications. Effective cell lysis is crucial for a wide range of research and diagnostic applications, including protein purification, gene expression analysis, and the development of therapeutic agents. However, it is essential to carefully optimize the lysis protocol to ensure the preservation of the integrity and functionality of the target biomolecules. Additionally, the potential for contamination or degradation of the cellular contents must be considered. Overall, cell lysis remains a fundamental technique that enables the exploration of cellular processes and the advancement of scientific knowledge and technological applications.
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서울대학교 생화학실험 - 동물세포 배양 & Transfection (실험3) 결과레포트 7페이지
생화학실험 실험3 결과 레포트1. Abstract이번 실험에서 3주에 걸쳐 동물세포의 배양과 transfection의 원리를 학습한다. 8주차엔 배양된 동물세포를 transfection 할 수 있도록 plating했고, 남는 cell을 subculture 하였다. 9주차엔 plating된 cell을 cationic polymer를 이용해 transfection 하였다. 마지막으로, 10주차 실험에서 transfection된 sample을 lysis 하고, BCA assay 및 luciferase assay로 이를 분석하였다. luc...2022.12.10· 7페이지 -
Transformation & Colony PCR 생물공학실험 보고서 7페이지
11주차 예비보고서 (Transformation)1. Transformation을 수행하는 목적이 무엇인지 설명하시오.: Transformation은 외래 DNA 단편분자가 세포에 도입이 되어 새로운 유전적 형질이 발현되도록 하는 방법으로, 주로 박테리아와 plasmid를 통해 유전자를 도입하는 기술로 사용되었지만 transfection과 같은 동물 및 식물에서도 이 기술이 사용되고 있다. 즉 알지 못했던 유전적 형질을 본래의 알고 있는 유전적 형질을 갖은 세포에 이 기술을 도입시키면 알지 못했던 유전적 형질을 알 수 있다. 이 목...2022.02.06· 7페이지 -
Virus replication assay 실험 및 고찰 7페이지
Virus replication assayDate : 2018.11.16Ⅰ Introduction1) ObjectCell viability 와 luciferase assay를 비교하여 어느 약품이 anti viral효과가 있는지 확인한다2) Theory①LuciferaseLuciferase는 ATP와 기질 인 luciferin 사이의 반응을 촉매 하여 빛을 생성시킨다. Luciferin 과 luciferase가 과량으로 존재할 경우 생성되는 빛의 량은 ATP의 양에 직 접적으로 비례한다. Luciferase enzyme을 이용한 빛...2021.04.12· 7페이지 -
[기초생화학]Transfection 2페이지
Transfection1. Introduction : Transfection은 진핵세포 안에 DNA을 집어넣는 방법이다. Transfection 에는 네 가지 방법이 있다. 하나는 화학 물질을 사용해서 세포막에 일시적 으로 구멍을 뚫은 다음에 vector을 이용해 DNA를 구멍으로 통과시키는 방법이고, 다른 하나는 세포에 전기·초음파·레이저 등의 물리적 자극을 주 어서 세포막의 투과도를 높인 다음에 DNA를 집어넣는 방법이다. 세 번째 는 gene gun등을 이용해 DNA의 이동 속도를 높여서 DNA가 세포막을 통과하게 하는 방법이...2018.06.04· 2페이지 -
DNAprep & luciferase assay & Real time PCR 10페이지
1. Introduction-DNA precipication-Mini prep은 Plasmid DNA를 분리하는 방법을 말하는데 prep이라는 표현은 플라스미드 준비(plasmid preparation)나 플라스미드 추출(plasmid extraction)의 약자를 일컫는 말이다. 앞에 mini-가 붙었으므로 소량의 plasmid를 추출한다는 것을 의미하며 pH를 이용하여 DNA를 분리하기 때문에 Alkaline lysis method이다.SDS와 NaOH가 들어간 용액은 두 가지 DNA변형을 일으키는데 chromosomal DNA...2019.08.26· 10페이지