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세포 배양 시 배지 교체 방법2025.01.081. 세포 배양 세포 배양은 생명체를 구성하는 조직으로부터 세포를 분리한 후 체외(in vitro) 환경에서 배양하는 것을 의미한다. 세포를 지속해서 배양하기 위해서는 세포를 떼어내어 세포 현탁액으로 만들고, 희석하여 새로운 배양용기에 plating하게 되는데 이를 계대배양(subculture)이라고 한다. 세포 배양에서 media 교체는 세포의 생존에 중요한 영향을 미치는데, 이는 media에 영양소가 풍부하게 들어있어 세포 증식에 필수적이며, 동시에 세포의 대사 활동으로 인해 발생한 노폐물이 배출되어야 하기 때문이다. 2. PB...2025.01.08
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THP-1 세포 배양 및 세포 계수 실험2025.12.161. 세포 배양(Cell Culture) 세포 배양은 생물체의 조직에서 분리된 세포를 체외에서 배양하는 과정이다. In vitro 방식으로 수행되며, 세포는 부착세포(adherent cell)와 부유세포(suspension cell)로 나뉜다. 부착세포는 배양 용기 표면에 단층으로 부착하여 증식하고, 부유세포는 배지 내에서 부유 상태로 성장한다. THP-1 세포는 부유세포로 분류되며, RPMI 1640 배지에 FBS 10%와 항생제 1%를 첨가하여 배양된다. 2. 세포 계수(Cell Counting) 혈구계산기(hemocytomet...2025.12.16
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동결 보존된 세포의 해동2025.01.021. 세포 동결 보존 세포 기반의 생물 실험에서는 동결 보존된 세포 stock을 해동하여 배양하는 것이 중요한 과정이다. 동결 보존 시 동결 보호제를 사용하지 않으면 세포가 손상될 수 있으며, 해동 과정에서도 신속한 진행이 필요하다. 동결 보호제로 자주 사용되는 DMSO는 세포에 독성을 가질 수 있어 주의가 필요하다. 2. MCF-7 세포주 MCF-7 세포주는 유방암 환자의 유선 조직에서 얻어낸 상피세포로, transfection host로 사용하기 적합하며 estrogen과 progesterone receptor를 발현하는 Lum...2025.01.02
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Cell seeding 및 세포 배양 방법2025.12.161. Cell Seeding (세포 파종) 세포 배양 용기에서 세포를 부드럽게 분리한 후 2% FBS 배지(RPMI1640)에 재현탁합니다. 세포 수를 계산한 후 적절한 부피의 세포를 2% FBS 배지에 추가하여 멸균 96-well 세포 배양 플레이트의 각 웰에 100 µL의 세포 배양액(5,000 cells/well)을 분주합니다. 이는 세포 배양의 초기 단계로 정확한 세포 수 조정이 중요합니다. 2. Cell Culture Media (세포 배양 배지) RPMI 1640 Medium은 인간 세포주 배양을 위한 기본 배지로 사용되...2025.12.16
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[A+ 리포트] 세포생물학실험 - 세포배양배지의 종류와 특성, DMSO의 세포 독성, 70 EtOH 사용 이유2025.04.251. 세포배양배지의 종류와 특성 세포의 배양을 위해선 세포가 생장할 수 있는 특정한 환경의 조성이 필요하다. Growth media라고도 불리는 세포배양배지는 액체 혹은 고체 상태로써 세포가 생장하는데 필요한 여러 종류의 아미노산, 무기염류, 비타민, 생장인자, 완충제 등이 포함되며 특히 미생물 배지와는 가장 큰 차이점이라고 할 수 있는 5~20%의 혈청(serum)이 추가되는 등의 각종 성분들이 포함되어 있다. 일반적으로 사용되는 세포배양배지의 종류로는 BME, MEM, DMEM, RPMI 1640 등이 있으며 각각의 특성이 다르...2025.04.25
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포유동물 세포 배양 및 형질전환 결과2025.11.131. 포유동물 세포 배양 포유동물 세포 배양은 생체 외에서 포유동물 세포를 인공적인 환경에서 성장시키는 기술입니다. 적절한 배양 배지, 온도(37°C), 이산화탄소 농도(5%) 등의 조건을 유지하여 세포의 생존과 증식을 촉진합니다. 이는 의약품 개발, 백신 생산, 기초 생명과학 연구 등 다양한 분야에서 필수적인 기술입니다. 2. 형질전환 형질전환은 외부 DNA를 세포 내로 도입하여 세포의 유전적 특성을 변경하는 기술입니다. 포유동물 세포의 경우 전기천공법, 미세주입, 리포펙션 등의 방법이 사용됩니다. 이를 통해 특정 단백질을 발현하...2025.11.13
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포유동물 세포 배양 및 형질전환 실험2025.11.131. 포유동물 세포 배양 포유동물 세포 배양은 생체 외에서 포유동물 세포를 인공적인 환경에서 증식시키는 기술입니다. 적절한 배지, 온도(37°C), 이산화탄소 농도(5%) 등의 조건을 유지하여 세포의 생존과 증식을 도모합니다. 이는 생명과학 연구, 의약품 개발, 백신 생산 등 다양한 분야에서 필수적인 기초 기술입니다. 2. 형질전환(Transfection) 형질전환은 외부 DNA를 포유동물 세포 내로 도입하는 기술입니다. 전기천공법, 리포펙션, 미세주입 등 다양한 방법이 있으며, 목적 유전자의 발현, 단백질 생산, 유전자 기능 연구...2025.11.13
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포유류 현탁액 세포 배양 기술 및 세포 생존율 평가2025.12.191. 현탁액 세포 배양 기술 포유류 현탁액 세포는 부유 상태로 성장하는 세포로, THP-1 cell line이 사용되었습니다. 현미경 관찰, 원심분리, 세포 펠릿 희석 등의 과정을 통해 배양됩니다. RPMI 1640 배지는 비부착성 세포 배양에 최적화되어 있으며, FBS는 성장인자를 공급하여 세포 생존 및 성장을 돕습니다. 현탁액 세포는 추가적인 효소적 또는 기계적 분리 과정이 필요 없어 배양 과정이 비교적 간단합니다. 2. Trypan Blue를 이용한 세포 생존율 측정 Trypan blue는 960KDa 크기의 음전하 수용성 분...2025.12.19
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[약대 실습 레포트] 면역학 실습 레포트_Hybridoma cell & antibody purification2025.01.211. Hybridoma cell Hybridoma cell은 항체를 생산하는 B 림프구와 myeloma cell을 융합하여 얻은 세포로, 단일클론항체를 생산하는 세포주입니다. 이 세포주는 한 종류의 항체를 생산하는 능력과 반영구적으로 세포를 증식하는 능력을 동시에 갖고 있습니다. 2. Antibody purification Antibody purification의 원리는 Protein A나 G와 항체의 Fc region의 친화력을 이용하여 affinity chromatography를 시행하여 항체를 분리하는 것입니다. 이때 pH를 ...2025.01.21