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DPPH를 이용한 천연물의 항산화능 및 라디칼 소거능 측정
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DPPH이용 흡광도 및 라디칼 소거능(천연물학 A+)
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2023.12.13
문서 내 토픽
  • 1. DPPH 라디칼 소거능 측정
    DPPH는 보라색을 띠는 안정적인 라디칼로, 항산화물질과 반응하면 색이 변한다. 517nm 파장에서 흡광도를 측정하여 라디칼 소거능을 평가한다. 흡광도 값이 작을수록 항산화능이 우수하다. 실험 결과 Ascorbic acid(소재 1)와 Quercetin(소재 5)이 가장 높은 라디칼 소거능을 보였으며, 농도에 따른 반응 차이가 명확하게 나타났다.
  • 2. NO 활성산소 측정 및 염증반응 평가
    그리스 시약을 사용하여 시료들의 NO(활성산소) 생성량을 540nm 파장에서 측정한다. 흡광도 변화가 크면 NO 억제 효과가 있음을 의미한다. 실험 결과 Quercetin(소재 5)만 유의미한 흡광도 변화를 보였으며, 나머지 소재들은 NO 억제 효과가 미미한 것으로 나타났다.
  • 3. 천연물 소재의 항산화 활성 비교
    Ascorbic acid, Octocosanol, Fucoidan, Fucose, Quercetin, Glucosamine, Laminarin 등 7가지 천연물 소재를 0.1mg/mL, 0.01mg/mL 두 가지 농도에서 비교 분석했다. Ascorbic acid와 Quercetin이 우수한 항산화능을 보였고, 나머지 소재들은 대조군과 유사한 반응을 나타냈다. 농도에 따른 반응 차이 분석을 통해 최적 농도 결정의 필요성이 확인되었다.
  • 4. 분광광도계를 이용한 흡광도 측정
    분광광도계는 특정 파장에서 시료의 흡광도를 측정하는 기기다. DPPH 실험에서는 517nm, NO 측정 실험에서는 540nm 파장을 사용했다. 시료와 시약을 1:1로 혼합하여 실온에서 반응시킨 후 흡광도를 측정하여 항산화능과 염증 억제 효과를 정량적으로 평가한다.
Easy AI와 토픽 톺아보기
  • 1. DPPH 라디칼 소거능 측정
    DPPH 라디칼 소거능 측정은 천연물의 항산화 활성을 평가하는 가장 기본적이고 널리 사용되는 방법입니다. 이 방법은 간단한 절차, 빠른 측정 시간, 그리고 재현성 있는 결과를 제공하여 초기 스크리닝에 매우 유용합니다. 다만 DPPH는 지용성 라디칼이므로 수용성 항산화제의 활성을 과소평가할 수 있다는 한계가 있습니다. 따라서 다른 측정 방법과 병행하여 더욱 정확한 항산화 활성 평가가 필요합니다. 표준화된 프로토콜 준수와 적절한 양성 대조군 선택이 결과의 신뢰성을 높이는 데 중요합니다.
  • 2. NO 활성산소 측정 및 염증반응 평가
    NO(일산화질소)는 생체 내 중요한 신호전달 분자이면서 동시에 과도한 생성 시 염증을 유발하는 활성산소입니다. NO 측정을 통한 염증반응 평가는 천연물의 항염증 효능을 객관적으로 판단하는 데 매우 중요합니다. Griess 시약을 이용한 측정법이 일반적이며, 세포 모델을 활용한 평가가 생체 관련성을 높입니다. 다만 NO의 짧은 반감기와 측정의 기술적 어려움을 고려하여 신중한 실험 설계가 필요하며, 다양한 염증 마커와의 통합 평가가 더욱 신뢰할 수 있는 결과를 제공합니다.
  • 3. 천연물 소재의 항산화 활성 비교
    천연물 소재의 항산화 활성 비교는 기능성 식품 개발과 신약 개발의 기초 연구로서 매우 중요한 의미를 가집니다. 다양한 천연물 간의 항산화 활성을 객관적으로 비교하기 위해서는 여러 측정 방법을 병행하는 것이 필수적입니다. 각 방법의 원리와 한계를 이해하고 적절한 방법을 선택하여 종합적으로 평가해야 합니다. 또한 활성 성분의 동정, 용매 추출 조건, 농도 의존성 등을 고려한 체계적인 비교 연구가 필요하며, 이를 통해 우수한 천연물 소재를 효율적으로 발굴할 수 있습니다.
  • 4. 분광광도계를 이용한 흡광도 측정
    분광광도계를 이용한 흡광도 측정은 항산화 활성 평가의 핵심 기술로서 정량적이고 객관적인 데이터를 제공합니다. 이 방법은 비용 효율적이고 빠른 측정이 가능하며, 다양한 파장에서의 측정으로 여러 항산화 평가 방법을 동시에 수행할 수 있습니다. 정확한 측정을 위해서는 기기의 정기적인 보정, 적절한 큐벳 선택, 그리고 표준화된 프로토콜 준수가 중요합니다. 다만 탁도나 색상이 있는 시료의 경우 배경 흡광도 보정이 필요하며, 측정 결과의 신뢰성을 위해 반복 측정과 통계 분석이 필수적입니다.
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