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단백질의 정량 분석

REPORT유전생화학 실험(단백질의 정량분석)제출일자 : 2001. 09. 27담당교수 :학과 : 생명과학과학번 :성명 :*결과보고서*Title : 단백질의 정량분석Date : 2001. 09. 20coworker :Theory : 단백질 정량 실험을 통해 미지 시료 내의 단백질의 존재 유무 뿐 만 아니라 존재량의 측정도 가능하다.Mat : 단백질 표준용액(BSA) 3.0㎎/㎖, 미지 시료 용액, 증류수(DW), Biuret시약, 마 이크로 피펫, Spectrophotometer, Polyglove, 방안지, pincet, cubette, 티슈, 비이커, spueeze buttle, 계산기, 컴퓨터 등Introduction.note.정량 : 어떤 물질이 어느 정도의 양으로 존재하는가를 확인Protein .아미노산이 펩티드결합(peptide bond)에 의해 연결된 폴리펩티드 사슬 (polypeptidebond).1) 펩티드결합(peptide bond)R R{{{*peptide결합NH2 - C - COOH H2N - C - COOH{{H2O 빠져나감H H{{peptide bond{R O R{{{{NH2 - C - C - N - C - COOH{{{{H H H2) 폴리펩티드(polypeptide) & 단백질(protein){- 폴리펩티드(polypeptide) :500개 이하의 아미노산이 결합된 것.- 단백질(protein) : 600개 이상의 아미노산이 결합된 것.3) 단백질의 구조{- 1차 구조 : peptide에 의한 아미노산의 배열상태- 2차 구조1 α- helix(α- 나선구조), β- preated sheet(β- 병풍구조)2 protein 사슬이 수소결합에 의해 꺾임.3 구조 단백질 : 케라틴, 피브로인4 규칙적인 수소결합- 3차 구조1 불규칙적으로 꼬여있거나 감겨있는 상태수소결합, 이온결합, 공유결합, 소수성 상호작용에 의해 불규칙 적으로 감 긴 구조3 효소(enzyme), 호르몬(hormone)등의 기능적인 단백질- 4차 구조 : 폴리펩타이드(subunit)가 2개 이상 ex) 헤모글로빈 (α, β)4) 단백질의 변성(denaturation).- 열을 가하거나 알칼리성 물질을 처리할 경우 단백질의 구조가 변함{{* protein 변성(꼬임이 풀림) - 재생 ○ (→가역적)heat, NaOH - 재생 × (→비가역적)cf) renaturation(재생) : 변성된 단백질이 변성 요인 제거시 다시 원상태로 돌아가는 현상, 가역적 변성5) 단백질의 특징.{{peptide bond{{{R O R O{{{{{NH2{{{- C - C - N - C - C - N{H H H H- peptide bond : 단백질의 가장 특징적인 특성*단백질의 아미노산이 peptide 결합한다는 특징을 이용해 정성, 정량 분석을 할수 있다.단백질의 정량실험 법.1) Biuret 반응 ; 시료 속에 다량의 단백질이 녹아 있을 때 측정이 가능{{{{{NH2 O C{O{{{C Cu2+ NH{{{{NH HC R1{{{O C OH-{{{{NH2 (알칼리) O C NH뷰렛시약단백질의 peptide bond과성질이 유사NH2 NH2{{{{O = C C - O알칼리 조건에서 구리가{{{{{NH NH 배위 결합을 통해착 화합물을 형성한다.{{{O = C Cu2+ C = O → 청자색, 적자색{(발색 반응을 통해 정성이NH2 NH2 가능하다)2) Beer - Lambert law; 정량을 위한 방법.{{색{(청자색,{{{{적자색) A = α c ℓA : Ahsorburceα : 흡광계수(상수)c : 시료 concentration{{{{ℓ : cuvette width{0 1㎎/㎖ 2㎎/㎖ 3㎎/㎖ 농도흡열도와 농동와의 관계로 이동의 측정이 가능 ( 그래프가 직선 관계일 때 )3) Lowry의 법; tyrosine, trytophan 검출 가능10 ~ 20㎎단위로 적은 양 측정시 사용 가능(∵양이 200㎍이상 일때는 함수가 비 례관계가 안됨){- 1 Know concentration : 알려진 농도의 단백질 시료 사용, 함수를 그린다.- 2 Unknow concentration : 흡광도를 이용한 농도를 역추적Procedure.1. 아래의 표와 같이 시험관 8개에 단백질 표준용액, 미지 시료용액 및 물을 넣어 총 3㎖를 만든다.{시약시험관 번호12345678단백질 표준용액 3.0㎎/㎖(㎖)-0.20.40.71.02.03.0-미지 시료 용액(㎖)1.0Hl2O3.02.82.62.32.01.0-2.02. 위 8개의 시험관에 각각 마이크로 피펫을 이용하여 Biuret 시약 3㎖씩을 첨가한 다.3. 준비된 시험관을 약 30분간 반응하도록 둔다.4. 각각의 시험관의 혼합액을 Spectrophotometer을 이용하여 흡광도를 측정한다.1 polyglove를 착용한다.2 파장을 540㎚에 고정시킨다.3 아무것도 넣지 않은 상태에서 흡광도(A)가 , 투과도(T)가 0이 되도록 영 점을 조 정한다.4각각의 흡광도를 측정한다5. 방안지에 측정되어 나온 값(흡광도)을 y축에 각각의 시료의 농도를 x축에 표시하 여 Standard 곡선을 그린다.6. 측정된 미지시료의 흡광도를 이용하여 그래프를 통해 농도를 유추해본다.7. 좀더 정확한 미지시료의 농도를 측정하기 위하여 컴퓨터를 이용한 회귀분석을 한다.1 y = ax + bA = α c ℓ2 각각의 측정값들을 대입하여 a와 b의 값을 구하고 미지시료의 흡광도를 x에 대입하면 구하고자 하는 시료의 농도를 측정할 수 있다.Result.1. Biuret{시약시험관 번호12345678단백질 표준용액3.0㎎/㎖(㎖)-0.20.40.71.02.03.0-미지 시료용액(㎖)1.0H2O3.02.82.62.32.01.0-2.0측정한 흡광도(A)00.010.0120.0160.0280.0580.10.032. 회귀분석에 의한 방정식 풀이C = aA + bC = 30.53476A + 0.065745측정한 미지시료의 흡광도 0.03을 A에 대입하면미지시료의 농도는 0.9817878Discussion.

자연과학| 2001.11.26| 6페이지| 2,000원| 조회(1,021)

단백질, 정량 분석, 뷰렛 시약

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스쿼시 평가A좋아요

REPORT스쿼시(스쿼시의 기본 기술과 용어 및기본 규격)제출일자 : 2001. 11. 02담당 교수 :학과 : 생명과학과학번 :성명 :Ⅰ. 스쿼시의 기본기술1. 그 립(grip:라켓 쥐는법)우선 왼손의 엄지와 인지로 라켓의 어리 부분을 잡고, 악수를 하듯이 오른손을 내밀어 라켓을 쥔다. 마치 못을 박을 때 망치를 잡는 것과 같다. 1) 엄지를 펴서 우선 잡고 2) 인지의 위치가 엄지보다 위로 가도록 한다. 이 인지가 라켓 조작의 열쇠이다. 3) 엄지와 인지로 v자를 만들어야 한다. 그리고 4)손목이 콕 되듯이 잡고, 플레이 중에도 라켓을 이 처럼 콕된 상태로 잡고 흔드는 것이 중요하다. 5) 콕이 풀리는 것은 금해야 한다.2. 스윙과 스탠스(stance)스윙에서 중요한 것은, 항상 리스트가 콕된 상태에서 움직여야 한다는 점이다. 따라서 백스윙을 개시할 때는 이미 콕되어 있는 상태에서 폴로슬로(follow-through) 완료시까지 그것이 유지되어야 한다. 유일한 예외로 예상치 않게 볼이 너무 몸에 가까워 콕된 상태에 서는 치기 어려울 때 콕을 푸는 경우가 있으나, 쇼트의 정확성을 내기 위해서는 보통 스 윙의 처음부터 최종단계까지 콕된 상태가 필요하다.3. 백핸드 스윙백핸드 스윙은 포어핸드 스윙과 마찬가지로 라켓은 신속히 들고 스윙 도중에도 라켓 헤 드는 몸의 뒷편에 남도록 흔든다. 무론 리스트는 마지막까지 콕되어 있어야 하고, 팔꿈치 는 몸 가까이에 둔다. 백핸드 스윙에서 리스트의 콕이 풀리면 임팩트시 약간 오픈되어 있 어야 할 라켓 면이 닫히는 형태가 되어 볼이 아래 방향으로 날아가 버리고 만다. 따라서 콕을 절대로 잊지 않도록 한다.볼을 치는 위치는 앞발보다 약간 앞이다. 보통 볼이 바운드 된 뒤 어느 지점에서 쳐야 좋은가는 바운드가 정상에 달한 뒤 볼이 떨어지기 시작하는 지점이 가장 좋다. 그때 몸은 가능한 한 볼에서 떨어져 있는 것이 바람직하다. 물론 시합에서는 고의로 게임의 스피드 를 높이기 위해 바운드가 정상에 달하기 전에 친다거나, 페인트를 쓰기를 가진 볼로 사이드 월에 맞도록 서브하는 것 이 중요한데, 그것은 상대방이 발리로 리시브하는 것을 막기 위함이다.5. 서비스 리턴{보통 핸드 인이 좌측 사이드 서비스 박스에서 서비스를 행할 때 핸드 아웃은 포어 핸드 로 리시브를 하게 된다. 반대로 우측 사이드 서비스 박스에서 서비스를 받을 때는 백핸 드로 받게 된다. 따라서 어느 경우라 도 포어핸드, 백핸드가 각각의 쇼트 자세로 기다리는 편이 좋다.서비스 리턴의 좋고 나쁨이 그 다음 랠리에 주는 영향은 대단히 크다. 서 버는 리시버에 비해 이점을 가지고 있으므로, 그대로 수비 자세만 지키 지 않도록 주의한다.핸드 아웃이 우선 고려해야 할 점은 서브가 끝나 코트내의〈T〉로 이동한 핸드인을〈T〉에서 쫓아내는 일이다. 그러기 위해서는 자신이 서 있는 쪽 사이드 월을 따라 깊은 쇼트를 치는 것이 가장 좋다. 그것에 의해 핸드인은 〈T〉에서 백코너로 몰리 게 된다. 리시브일 때도 앞에서 말했듯이 리스트는 콕된 상태로 라켓을 들어야 한다.서브를 기다릴 동안 발뒤꿈치를 살짝 들고 핸드 인의 동작을 주시하는 것이 중요하다. 그리고 발리로 리시브할 수 있을 경우에는 가능한 한 발리로 공을 치도록 한다. 핸드인 의 위치에 따라서는 크로스 코트로 받아쳐서 핸드 인의 머리 위를 넘는 리턴도 유효한데 그럴 때는 핸드 인이 발리로 컷트할 수 없는 높이로 볼을 백코너까지 도달시킬 필요가 있다. 또한 발리로 보드 가까이 리턴하는 것도 때때로 유효하다. 그러나 이 쇼트는 충분 한 연습을 거쳐 사용하지 않으면 어렵다.6. 포핸드 드라이브포핸드 드라이브는 가장 기본적인 쇼트로, 방법은 앞에서 설명한 바와 같다. 몸을 움 직이는 순서는 1몸통 2위팔 3아래팔 4손목의 순으로, 스피드를 높일 때는 리스트가 가장 빠르게 움직인다. 역시 1∼3까지 스피드가 서서히 높아짐으로써 가속도가 가장 커지기 때문이다.많은 선수들이 4리스트의 움직임을 잊기 쉬운데, 최고의 스피드를 생각한다면 이 리스 트의 움직임이 중요한 포인트가 된다.완만한 볼을 치고 싶을 의 공격 차단 을 피하기 위하여 볼이 앞벽을 맞은 후 바운드되어 서비스 박스 뒤쪽 옆벽을 맞도록 한 다.백핸드의 핵심요소1 볼과 관련된 자세- 측방자세(Sideways stance)- 볼을 주시, 바운드 정점에서 친다.- 오른 무릎 바로 앞 편안한 거리에서 볼을 친다.2 발동작- 오른발을 앞으로 내딛는다.- 오른 무릅을 구부린다.3 스윙- 팔꿈치를 구부린 채로 라켓을 미리 뒤로 보내 백스윙을 한다.- 손목을 젖힌다.- 긴장을 풀고 팔을 직선으로 끝까지 휘둘러 라켓이 11시 방향을 가리케게 한다.4 라켓면 조작- 라켓 면이 약간 오픈된다.5 균형과 체중이동- 발은 어깨넓이 정도로 벌린다.- 왼발에서 오른발로 체중 이동을 시킨다.8. 크로스 코트 드라이브요령은 앞의 드라이브와 비슷하나, 이 쇼트의 목적은 프런트 월에 맞은 볼이 사이드 월 과 플로어의 경계점에 덜어지도록 치거나(이 모서리를 닉이라고 하고 이 쇼트를 닉쇼트라 한다.) 반대쪽 백코트로 몰아 넣기 위해 치는 것이다.닉쇼트의 경우 볼이 죽기 대문에 상대는 볼을 거두지 않는다. 그때 상대에게 발리로 볼 을 도중에 커트당하지 않기 위해서라도 낮고 바르게 상대에게서 떨어진 볼을 쳐야 한다. 앞에서 말한 어떤 목적이든 볼을 낮게 쳐서 사이드 월에 도달했을 때는 닉 도는 닉 부근 에 떨어뜨리는 것이 바람직함.스트레이트 드라이브 쇼트 때보다 약간 전방에 맞도록 친다. 폴로슬로도 끌어올리듯이 한다. 이때 중요한 점은 발의 위치가 사이드 월을 따라 쇼트를 치는 경우와 똑같은 위치 에서 몸도 사이드 월을 향해 치고, 앞서 말한 보통의 드라이브 쇼트와 구분 할 수 없도록 하는 점이다.9. 드롭 쇼트포어핸드 드롭 쇼트드롭쇼트를 칠 때는 왼발을 충분히 앞으로 내디뎌 몸을 전방으로 기울인다. 라켓 해드 는 어깨 높이까지 올리고, 내리칠 때는 라켓 면을 약간 오픈으로 하여 임팩트시 라켓의 움직임에 맞추어 볼을 거의 슬라이스하는 듯이 친다. 라켓 면은 스트로크의 첨부터 마지 막까지 오픈으로 하는 것이 바람직하다. 플로슬로는 드라이브로우로, 가능하면 라켓 헤드를 볼이 날아갈 방향에 남도록 하는 것이 효과적이 다. 물론 리스트의 콕은 풀지 않는다.드롭 발리는 드롭 쇼트와 같은 효과가 있다. 그러나 대단히 리스크가 크므로, 보드를 치는 미스를 생각한다면 스매시 발리를 많이 치는 것이 효과적이다. 발리의 최대 이점 은 상대에게 시간적 여유를 주지 않는다는 점과, 자신도 그다지 뛸 필요가 없다는 것 이다.백핸드 발리볼에 임팩트하는 순간 팔을 곧게 뻗는다. 단, 백핸드 발리가 모든 스트로크중에서 가장 난해한 기술 중 하나라는 점을 보도, 충분히 연습한 필요가 있다.11. 하프 발리하프발리란 바닥에 볼이 바운드됨과 거의 동시에 볼에 라켓을 대는 것을 말한다. 타이 밍이 대단히 어려우므로 이 쇼트를 잘하기 위해서는 충분한 연습이 필요하다. 리스트는 콕 시킨 상태에서 단지 라켓 헤드를 아래쪽으로 내려친다. 드라이브를 치는 요령으로 좀 더 볼에 가깝게 친다.이것은 프론트코트에 있을 때 치는 쇼트로, 특히 하프 발리의 드롭 쇼트는 자주 위닝 쇼트가 된다.12. 로 브보통은 공격에 쓰이는 것이 아니라 프런트 월 주변으로 밀려났을 때 높은 볼을 백코너 로 쳐서 그 사이에 〈T〉로 되돌아오기 위해 쓰는 방법이다. 라켓 페이스는 로브를 치는 동안 오픈으로 한다. 보통 웨스트 위치나 그보다 아래 위치에 볼이 있을 때 치는 쇼트이 다.앞발은 보통 때보다 가까운 위치에 둔다. 그리고 스트레이트로 타구하는 것이 아니라 크로스 코트로 타구하여 백코너에서 볼이 죽는 경우가 가장 바람직하다. 또한 상대를 잘 못 봤을 때나 시합의 페이스를 바꿀 때 자주 이용되는데, 많이 쓰는 것은 바람직하지 않 다.13. 보스트(앵글 쇼트)보스트는 앵글 쇼트라고도 불리우는데, 처음에 사이드 월에 볼이 맞고 다음으로 프런트 월에 맞는 쇼트를 말한다. 보통 상대가 뒤에 있을 때 한다.예외로서 앞에 있는 상대가 코트 전방에서 코트의 중앙부로 되돌아올 때 드롭 쇼트와 함께 이것이 효과를 나타낸다. 가장 위력이 있는 것은 사이드 월에 이어 프런트 월에분한 간격을 두고 다가가 이미 라켓을 쳐든 상태에서 볼이 바운드되어 올 라오기를 기다릴 때, 이미 양발이 코너를 향해 있다면 양발 위에 체중이 균등히 걸려 있 으므로, 만일 볼이 예상했던 대로 바운드하지 않는다 해도 능히 칠 수 있는 것이다.이상은 사진에 나타난 포어핸드와 백핸드의 백코너에서의 스윙을 보면 된다. 코너에 너 무 접근하지 않는 것이 라켓의 완전한 스윙을 가능케 한다. 몸은 코너 쪽을 보고 양발의 발가락은 코너를 향한다. 체중이 양발에 균등히 걸린 상태에서 볼을 친다. 라켓 헤드는 볼에 대해 오픈되어 있고 보스트를 치는 스윙 때는 위를 향해 라켓을 쳐 올린다.백코너에서의 베스트 쇼트로는 역시 긴 발의 드라이브를 들 수 있다. 만약 드라이브를 칠 수 없는 상태에서는 보스트를 치도록 한다.16. 닉 쇼트쇼트 중에서도 가장 어려운 쇼트의 하나가 닉 쇼트이다. 닉 쇼트에는 그랜드 스트로크 와 발리가 있다. 그러나 발리로 하는 닉 쇼트가 보다 효과적이다. 이유는 볼이 커트되지 않으므로 닉에 들어갔을 때 바닥을 구르기 쉽기 때문이다. 프런트 월 코너에서 보드 위 10cm 정도의 거리가 되는 것에 볼이 맞고 그대로 사이들 월과 바닥의 모서리에 떨어지 도록 되풀이하여 연습한다. 특히 백핸드의 닉 쇼트가 어렵다. 이것을 칠 때 볼은 다른 어떤 쇼트보다도 몸 앞에 있어야 하고, 당연히 앞발보다 앞에 있을 때 치는 것이 바람직 하다.절대로 피해야 할 것은 프론트 월에 맞은 볼이 플로어에서 바운드되어 사이드 월에 맞 는 경우이다. 그것보다는 비록 닉에 들어오지 않았어도 볼이 닉의 상단, 즉 상단 사이드 월의 낮은 위치에 맞는 것이 훨씬 좋다.17. 기본적인 전략끝까지 볼에서 시선을 떼지 않는다많은 사람들이 볼을 칠 때 이미 자신의 치고자 하는 벽면의 위치로 눈이 가 있는 경우 가 많다. 볼을 헛치거나 제대로 맞지 않는 경우 이런 경우가 대부분이다.코트 중앙 T-Zone을 장악해라코트의 중앙을 점유하면 상대가 앞에서 Drop Short를 치거나, Back Corner로 얻는다.

예체능| 2001.11.26| 13페이지| 2,000원| 조회(1,121)

스쿼시, 스쿼시 코트 규격, 스쿼시 용어 해설

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