11. 57번 해설 E2 반응의 필수조건은 periplanar(준평면) 기하구조이다. 즉, 제거반응에 참여하는 네 원자(수소, 이탈기, 2개의 탄소)가 전이상태에서 한평면에 존재할 수 있어야 한다. 이 기하구조는 syn periplanar와 anti periplanar 구조가 가능한데, anti periplanar 구조에서는 제거되는 화학종들이 서로 staggered(엇갈린) 관계가 되므로 에너지상으로 유리하기 때문에 더욱 선호된다. 문제에서 주어진 구조에서는 Br과 H는 Bridgehead 고리구조의 특성상 회전이 불가능하므로 periplanar 위치에 있을 수 없다. 따라서, periplanar 조건을 충족시키는 Br과 D이 제거되는 E2반응으로 진행하게 된다.(syn periplanar route)
Thin-Layer Chromatography◈ TLC의 원리 및 특징얇은 층 크로마토그래피(Thin Layer Chromatography, TLC)는 깨끗한 유리판 위에 흡착제 알맹이의 층을 만들어 용제증기를 포화시킨 공기중에 세우고 한 끝을 용제속에 담구어 모세관현상으로 용제를 위쪽으로 이동시키면 판 아래쪽에 부착시켜 놓았던 시료는 흡착제를 정지상, 용제를 이동상으로 해서 혼합성분이 크로마토그래프적으로 전개되어 분리시키는 것을 원리로 하는 분리방법이다.TLC에 있어서 고정상은 불활성 지지체에 입자성 물질을 한 층으로 입힌것이며 지지체는 초기에 주로 유리를 사용했으나 지금은 주로 플라스틱이나 알루미늄을 사용한다. 상업적으로나 실험실에서 만들어지는 판은 고정상으로 지지물질이나 결합제를 용매로 사용하여 표면처리하고 상온이나 오븐에서 말려서 제작한다. 크로마토그래피의 분리능력은 고정상의 입자크기에 의존하므로 TLC에서 입자크기 분포를 좁히며 평균입자크기를 5㎛ 감소시키면 어느 정도 증가된 분리력을 얻을 수 있다.TLC는 크로마토그래피의 특정 방식에 제한되지 않고 분석하고자 하는 물질의 안정한 층을 찾을 수 있게 하였다. 가장 흔히 접할 수 있는 고정상은 실리카겔인데 이는 극성에 따른 용매의 강도 변화로 광범위한 혼합물을 분리 할 수 있다. 한 쪽 끝에는 triacylglycerol이 hexane, diethyl ether와 같은 용매로 분리될 수 있고, 다른 끝에서는 sulphonic acid와 같은 극성 물질이 수성알코올과 같은 극성 용매로 염색된다.TLC 판은 한 번만 사용하므로 비록 HPLC 컬럼에서는 이런 상황이 일어나지 않지만 수용성 용매를 높은 pH에서 사용함에 따른 실리카겔의 용해가 문제되지는 않는다. TLC로서 흡착 크로마토그래피를 할 수 있는 더 좋은 물질은 알루미나인데 이는 실리카겔의 성질을 많이 가지고 있으나 실리카겔과 달리 산성보다 알칼리성을 띤다. TLC 기법을 사용한 다른 크로마토그래피 기법들이 제한적으로 사용되어 왔었다. 그래서 단백질 분자량 물질과 서로 비교함으로써 분자량을 결정하는데도 쓰이고 있다.유사한 방법으로 역상을 위한 소수성 표면 또는 이온 교환 작용을 가지는 변형된 층도 이용되고 있다. 분리방식에 관계없이 이러한 기법들은 같은 방법으로 사용될 수 있다. 시료 용액과 관련된 표준물들을 판의 끝에서 1cm 떨어진 곳에서 점을 찍게 되어 있다. 그리고 가해진 용매는 평형을 이룬 밀폐용기내의 이동상 위에 두기전에 증발시켜 제거한다. 판이 평형을 이룬 후 모세관 현상에 의해 전개시키기 위해 용매 속으로 판을 내린다.전개면으로부터 용제의 증발을 방지하기 위하여 전개는 용제를 바닥에 넣은 간단한 투명상자 속에서 하게 되므로 완전한 개방은 아니더라도, 기체 크로마토그래피나 컬럼 크로마토그래피(통상의 액체크로마토그래피)에 비하여 개방된 크로마토그래피이다.그 장?단점은 다음과 같다.(1) 장 점① 분석이 신속하다. - 용제가 판의 상단에 도달하면 전개는 끝난다. 30분이상 걸리지 않 는다.② 동시병렬분석이 가능하다. - 5mm 간격으로 시료를 부착시키면, 10개의 시료를 동시에 전개할 수 있다. (표준시료를 동시에 전개하는 것은 보통 상례, GC, LC에서는 1회 1시료밖에 분석하지 못한다)③ 모든 성분이 확실하게 나타나 있다. - 판 위에는 시료의 모든 성분이 반드시 나타나 있다. (GC나 LC와 같이 컬럼의 말단에서 모니터하는 방식은 시료 의 모든 성분이 유출하였는지의 여부는 실제 명확하지 않으며, 분석 의 종말점을 모른다)(2) 단 점① 정밀도 ? 재현성이 일정하지 않다. - TLC의 판은 분석할 때 조제한다는 것은 TLC 분 석에서 통례로 되어 왔다. 이것은 크로마토그래피의 심장부의 본질이 흡착제층 성층 기술에 의존하고 있는 것을 뜻하므로, 정밀도 ? 재현성 에 대하여는 문제가 있어 이 분석법이 모니터적, 스크리닝적, 전처리 적인 것으로 간주되는 요인이 되어왔다.② 조작이 불편하다. - 전개판을 필요로 할때 조제하는 것은 다른 기기분석법에 비교하면 매우 불편한 일이다.③ 정량성에 문제점이 로 발색시킨다)의 정량은 눈으로 관찰하여 정량하기에는 수 량화하기 어렵고, 통상의 덴시토미터(농도계)로 쪼이는 면적의 평균값 을 얻기 때문에, 반점이 완전하게 분리되지 않는 한 정확하지 않다. 반점을 긁어 내어 용매에 녹여서 다른 기기분석법으로 정량하는 방법 은 긁어 내는 기술, 추출효율 등의 문제점이 있다.◈ TLC 기구와 재료(1) 흡 착 제TLC는 개방된 액체 크로마토그래피이므로 컬럼 크로마토그래피에 사용하는 흡착제는 그대로 적용할 수 있다. 그러나 얇은 층에 형성시켜야 하므로 바인더가 첨가된 것을 사용한다. 뿐만 아니라, TLC의 흡착제는 기체 크로마토그래피와 같이 완전히 흡착제로서 작용하는 것이 아니고 잔류, 보전된 수분도 정지상으로 거동하여 분배 크로마토그래피적 요소를 가미하고 있다.① 실리카겔가장 일반적으로 사용되는 것. 200mesh 정도로 입도를 고루 갖춘 것을 쓴다. 농약이나 PCB, 페놀류, 지방산 등 중성 및 산성물질의 분리에 적합하다.② 알루미나실리카겔과 같은 입도로 조제된 것. 여러 고리 방향족탄화수소, 지질, 알칼로이드 등 중성이나 염기성물질의 분리에 적합하다.③ 셀룰로오스분말알칼로이드 등의 분리에 쓴다. 무수아세트산으로 일정비율의 아세틸화된 부분 아세틸화 아세틸셀루로오스는 알루미나와 같이 사용되어 여러 고리 방향족탄화수소의 2원 TLC 전개를 한다.④ 그 밖의 흡착제규조토, 프리지질, 산화마그네슘, 탄산마그네슘, 황산칼슘, 인산칼슘, 이온교환수지으 l가는 가루 등의 예가 있다.⑤ 역상 크로마토그래피TLC를 완전한 분배 크로마토그래피로서 전개시키기도 한다. 실리카겔 등의 얇은 층에 미리 유동파라핀이나 실리콘오일의 용액을 전개시키고 말려서 흡착체입자의 표면에 이들의 액상을 침윤시켜 역상 전개에 사용한다. 이 방법은 조작이 복잡하나 최근에는 실리카겔 표면에 디메틸시릴(C2), n-옥틸디메틸시릴(C8)을 화학결합시킨 것이 시판되어 손쉽게 적용할 수 있게 되었다.(2) 용 매시료를 전개, 분리시키는 용매는 신속한 분석의 관점에서 확산이 좋은 않고 용매 앞부분과 같이 이동하여 분리 안되며, 난용성 용매에서는 반대로 시료가 움직이지 않는다. 이 중간에서 분리를 고려하여 용매 조성을 결정한다. 무극성 용매의 대표는 석유에테르, 헥산, 극성용매의 대표는 메탄올, 물, 피리딘, 유기산 등이고 그 중간에 사염화탄소, 클로로포름, 에틸에테르, 에스테르, 아세톤 등이 있다.(3) 발색시약전개 후, 성분의 분리를 눈으로 보고 확인할 때, 유색성분이면 문제가 없으나, 색이 없는 성분에서는 적당한 발색시약을 분무하여 해당성분의 반점의 위치를 확인한다. 대표적이 예를 다음에 설명한다.① 황산분무 후 전개판을 120℃ 정도로 가열하고 유기물을 검게 만든다.② 삼염화안티몬-클로로포름용액(포화)스테로이드, 비타민 A등을 푸른색으로 발색시킨다.③ 요오드, 브롬C=C, P=O, P=S 등의 이중결합에 흡수되어 갈색을 나타낸다. 요오드 결정이나 브롬수를 가열해서 증기를 발생시켜 판에 접속시킨다.④ 질산은-에탄올 용액AgNO3 0.5% 용액은 유기인제, 2% 용액은 PCB의 확인에 쓰인다.⑤ pH 지시약pH 지시약의 메탄올 용액은 산, 염기의 확인에 쓰인다.(4) 기 구① 전개판보통 20×20 cm의 깨끗한 두꺼운 유리판을 쓴다.② 유리모난 막대(두꺼운 판)흡착제 도포시 엣지로 사용하는 길이 20cm, 너비 5cm 정도의 두꺼운 유리판③ 어플리케이터흡착제 슬러리를 도포하기 위하여, 하부에 슬릿 모양 출구를 가진 슬러리 용기④ 플라스틱 판판이 그 위에 직렬로 몇 장을 나란히 세울 수 있는 크기의 판, 칠할 때의 깔개⑤ 정기정온 건조기⑥ 전개통바닥에 전개 용매를 넣고 판을 세워둘 수가 있으며, 또한 갈아맞춘 뚜껑을 할 수 있는 유리통⑦ 마이크로피펫, 마이크로시린지⑧ 정량 정성용 분석기기발색된 성분반점에 빛을 쪼여 평균농도를 측정하는 덴시토미터, 가는 빛살을 쪼여 농도분포를 측정하는 크로마토스캐너가 있다. 이때 가시부에 발색하지 않아도, 자외선에 흡수가 있을 때는 자외광에 의한 흡광도를, 또한 형광성 성분은 들뜬 빛을 쪼여 형광세기를착성분을 추출하여 다시 각종 분석 기기에 의한 분석을 할 수 있는 것도 큰 특징의 하나이다.◈ 전개판의 제작슬러리를 준비하기 전에 혼합플라스크와 유리막대를 깨끗이 세척한 후, 흡착제의 슬러리를 준비한다. 실리카겔이나 알루미나를 사용하는 경우에는 아래의 표를 참고하여 슬러리의 비율을 결정한다. 적당한 양의 흡착제를 혼합 플라스크에 넣은 후 필요한 양의 물을 넣고 완전히 섞이도록 5초간 흔들어준다.판의 두께 (㎛)흡착제의 양 (g)물 (㎖)1503.04.02505.07.03757.510.050010.013.0판의 두께 (㎛)흡착제의 양 (g)물 (㎖)1503.06.02505.07.03757.515.050010.018.0깨끗하고 건조된 판을 종이 타월위에 올려 놓고, 슬러리를 판을 따라 평평하게 부은 다음 유리막대를 이용하여 판의 끝까지(넘지 않도록) 침착하고 차분하게 슬러리를 펴준다. 이때 유리막대를 굴리지 않는다. 상업적인 spreader를 사용하기도 한다.- TLC의 판 - 기구를 이용 흡착제 도포이러한 조작은 부드럽게 코팅될 때까지 여러 번 반복하여야하며, 한번에 굳히지 않는다. 다음 바인더에 의해 바람으로 말리고 층이 굳은 다음부터 건조기에 넣고 100℃에서 30분~2시간 가열하여 흡착제를 활성화한다. 이어서 방냉한 다음 사용하나, 온도가 높을 때는 건조기 속에서 방냉하는 편이 좋다. 이 조작에서 두께의 균일도, 활성화 정도에 따라 분석의 재현성이 많이 좌우된다. 최근에는 공장생산에 따라 두께 정밀도가 좋은 얇은 층을 형성시킨 TLC 판이 시판되고 있고 이 점에서 TLC의 신뢰성이 증가하였다.◈ 전 개? 시료의 점적점적은 TLC 판의 끝쪽에서 2cm 되는 곳에 출발선을 표시하고, 그 위에 1cm 간격으로 시료 용액을 점적한다. 그리고 출발선에서 10cm 되는 곳에 전진선을 표시해 둔다.전개통에 적당히 선택한 용매를 넣는다. 판의 한 변에 끝에서 10~20mm 인 곳에 일정한 간격으로 시료용액을 마이크로시린지 등으로 점적한다. 이 때, 양쪽 끝을 기지시료의 된다.
Ⅰ. 실험 목적우리 생활주변에서 흔히 접할 수 있는 원료로부터 비누(soap)를 만들어 보고, 이의 합성에 이용되는 비누화반응(saponification)에 대해 이해한다.Ⅱ. 이 론비누는 일반적으로 고급 지방산의 알칼리 금속염(보통 나트륨염)이다. 비누는 주로 C16과 C18 염을 함유하나, 몇 가지 낮은 분자량의 탄산염도 함유할 수 있다.대부분의 고체비누는 이 실험에서 만들고자 하는 것과 같은 나트륨 염이다. 출발물질은 지방산의 글리세롤에스테르인 지방이나 기름이다. 면실유 같은 대표적인 식용 기름 또는 동물성 지방과 진한 수산화나트륨용액이 주요 반응물질이다.1. 비누의 구조{비누(Soap)는 긴 사슬을 갖는 카르복시산(carboxylic acid)과 나트륨(sodium) 혹은 칼륨(potassium)이 이루는 염(salt)을 말한다. 다시 말해, 비누분자는 탄화수소 사슬(hydrocarbon chain)과 카르복시기(carboxylate group)로 구성되어 있다. 예를 들어, stearic acid의 나트륨 염(C17H35COONa)은 아래 그림과 같이 두 부분으로 나눌 수 있다.지 질지질이라는 말은 물에 녹지 않는 물질에 대한 총칭으로, 세포로부터 클로로 포름, 에테르, 벤젠 등의 유기 용매를 이용하여 추출이 가능한 것이다. 이 것은 크게 비극성 지질과 극성지질의 2가지 부류로 나눌 수 있다.비극성 기질전기적으로 극성을 띠지 않는 중성이고, 상당히 많은 탄소와 산소를 함유한 분자구조로 이루어져있다. 이것들은 물에 난용성이라는 점에서 탄화수소와 유사하기 때문에 소수성이라고도 한다.극성 지질한쪽에는 OH와 같은 극성기나 또는 적기적으로 극성을 띤 부분이 존재 하고, 다른 부분은 탄화수소 사슬로 되어 있는 화합물로 구성되어 있다. 극성을 띤 부분은 수소결합을 하거나 정전기적으로 물과 친화력이 있으므로, 극성 지질의 한쪽 부위는 친수성이라고 한다.지방의 가수분해는 비극성 지질의 좋은 예이다. 중성지방인 글리세롤삼스테아르산으로서, 동물지방에 흔히 존재하는 지질로 분해되는데, 이것을 가수분해라고 한다.2. 비누의 성질비누는 세탁효과가 좋고 거품이 잘 생기지만 헹굴때는 사라지며, 세탁한 직물의 촉감이 좋고 피부를 거칠게 하거나 환경을 오염시키는 일이 비교적 적어서 많이 사용된다.· 수용액에서는 유리지방산을 생성하고 알칼리성을 나타낸다.· 산성용액에서는 사용할 수 없다. 이때 생성된 유리지방산은 물에 용해되지 않고 세탁물에 부착된다.· 약알칼리성에서 효과가 좋다. 약간의 알칼리를 첨가하면 비누의 가수분해를 방지하고 유리지방산의 생성을 방지할 수 있다.· 경수(센물)와 반응하여 칼슘비누 침전이 생긴다. 경수중의 칼슘, 마그네슘, 철 이온과 결합하여 불용성 금속비누를 만들어 침전한다.알칼리비누의 주체는 나트륨염인데, 소다비누 또는 경성비누라고 하며, 칼륨염은 칼륨비누 또는 연성비누라 한다. 비누는 무수 상태에서는 일반적으로 에탄올 이외의 유기용제에는 잘 녹지 않으나, 함수비누는 벤진·크레졸 등에 녹는 것도 있다.비누는 함수량, 대기의 상대습도, 온도 등에 따라 습기를 흡수하기도 하고 건조하기도 한다. 이 성질은 구성 지방산의 종류에 따라 현저하게 다른데, 일반적으로 저급 지방산과 불포화 지방산인 경우와 칼륨염인 경우에 습기를 흡수하기 쉽다.비누는 수용액 속에서 농도가 낮으면 분자상태로 분산되어 있으나, 농도가 높아지면 분자와 회합하여 미셀을 형성하고 콜로이드와 같은 행동을 한다.비누는 물 속에서 가수분해하며 용액의 pH는 일반적으로 9가 넘는다. 수용액에 알칼리나 알칼리염을 가하면 비누분이 위층으로 분리된다. 이 조작을 염석이라 하며, 경성비누의 제조공정상 중요하다. 또, 비누 분자는 이 친수기와 소수기를 동시에 가지고 있기 때문에 큰 계면활성을 지니며, 전형적인 계면활성제로서 기포성·에멀젼화 및 큰 세정 작용을 가진다.3. 비누의 작용비누의 분자에는 기름에 잘 섞이는 친유성이 있는 탄화수소 부분과, 물기에 잘 녹는 친수성이 있는 카르복시기의 두 부분으로 이루어져 있다. 비누가 물에 잘 풀리면 비누 분자들의 친수성 부분이 극성이므로 물에 용해되지 않는다. 그런데 비누화 반응을 통해 말단에 Na를 붙임으로 해서 극성부분을 갖게 되고, 극성 용매인 물은 친화성을 갖게된다.비누 분자가 가수분해되면 알칼리성이 되므로 옷에 묻은 때가 녹아서 기름방울이 나온다. 때의 기름방울은 비누 분자의 친유성 부분으로 둘러싸여 콜로이드 입자가 되어 옷이나 피부에서 떨어져 나가게 된다.{비누는 칼슘이나 마그네슘 이온이 녹아 있는 센물에서는 물에 녹지 않는 고급 지방산의 칼슘이나 마그네슘의 염이 생기므로 비누가 잘 풀리지 않으며, 세탁 작용을 잃게 되는 단점이 있다. 이러한 단점을 개량한 세탁제가 새로 합성되었는데, 이 세탁제는 수용액 속에서 중성이 되며, 센물에도 영향을 받지 않는다.4. 비누화 반응 (Saponification)동물성 지방이나 식물성 기름 속에는 글리세릴 트리스테아레이트(glyceryl tristearate)와 같은 글리세릴 에스테르(glyceryl esters)라고 하는 화합물이 포함되어 있다. 자연에서 발견되는 대부분의 글리세릴 에스테르는 한 종류 이상의 카르복시 부분(moiety-fatty acid)을 가지고 있다. 이런 에스테르 화합물을 염기용액(sodium hydroxide in water)과 함께 가열하게 되면 글리세롤(glycerol -alcohol 성분)과 지방산 염(carboxylic acid성분)으로 가수 분해 된다. 이러한 과정을 비누화반응(saponification)이라고 한다. 다음은 glyceryl tristearate의 비누화 반응을 나타낸 것이다. 비누를 만들 때는 수산화 나트륨이나 지방이 남아 있지 않도록 하는 것이 좋다.{{CH2O2C(CH2)16CH3 CH2OHCHO2C(CH2)16CH3 + 3NaOH → CHOH + 3CH3(CH2)16CO2-Na+CH2O2C(CH2)16CH3 CH2OHglyceryl tristearate glycerol sodium stearate일단 비누화가 완료되면, 비누의 침전을 돕기 위해 염을 넣고 글리세롤을 함유하는 물층cation value)유지 1g을 비누화하는데 필요한 수산화나트륨의 양을 비누화 값이라고 한다. 유지의 카르복실기(carboxyl group, -COOH) 1개에 대해서 NaOH 1mol이 당량이다. 따라서 유지의 지방산의 알킬기가 작을수록 비누화값은 커진다. 또 같은 탄소수의 알킬기일 때는 이중결합이 많을수록 비누화값도 크게 된다.염석 효과 (salting-out effect)용액 중에서 만들어진 비누를 분리하기 위해서는 염화나트륨과 같은 전해질을 용액에 넣어준다. 전해질은 물속에서 모두 해리하기 때문에 전해질의 이온보다 극성이 작은 비누 분자들은 서로 엉키게 된다. 이런 현상을 염석효과(salting-out effect)라고 한다.5. 계면활성제 (surfactant)비누와 세제는 계면활성제라고 하는 화합물의 한 종류에 속하는데, 물의 표면장력을 낮출 수 있는 화합물이다. 어느 계면활성제 분자도 소수성 말단(하나 혹은 그 이상의 탄화수소사슬)과 친수성 말단을 갖는다. 계면활성제 분자의 탄화수소 부분은 효과적으로 작용하려면 12 혹은 그 이상의 탄소 원자를 가져야 한다.다음은 계면활성제의 일반적인 구조를 나타내었다.{계면활성제는 친수성기의 성질에 따라 음이온성, 양이온성 혹은 중성으로 분류할 수 있다. 카르복실기를 갖는 비누는 음이온성 계면활성제이다. 중성 계면활성제는 비이온성으로 물과 수소결합을 할 수 있는 극성기를 갖는다. 이것은 합성섬유의 세척에 우수하기 때문에 점점 수요가 올라가고 있다.계면활성제의 성질계면활성제의 친수기는 물과 잘 화합하는데 비해 친유기는 물과 화합하지 못하며 계면활성제 분자의 일부는 물을 피해서 용액의 표면이나 용기와의 계면에 몰리게 되므로 친수기는 수용액 내부로 향하고 친유기는 액체 밖으로 향하는 배열을 가지게 된다.이처럼 계면활성제 분자가 표면 혹은 계면에 몰려서 규칙적인 배열을 갖는 현상을 계면흡착이라 한다.계면활성제 농도가 높아지면 계면은 계면활성제 분자로 완전히 덮이며 농도가 더 높아지면 액체 내부에서도 계면활성제의 친유, 그리고 소수성 꼬리는 수면에서 멀리 있게 함으로서 이런 파괴를 일으킨다.실험에 사용된 시약산화 아연 (ZnO)아연화 또는 아연백이라고도 한다. 옥살산염, 염기성 탄산염 등을 가열하면 생기는 가벼운 백식분말으로, 녹는점 1800℃, 비중 5.78(결정성)이다. 백색색소로 중요하고, 화장품, 의약, 촉매 등으로 쓰이며 물에는 거의 녹지 않으며, 양쪽성 산화물이다.lanoline양털에 붙어있는 지방질 분비물을 비누 또는 용제로 분리 정제한 것으로, 여러 가지 복잡한 지방산과 1가 고급알콜과의 에스테르로서 화학적으로는 왁스에 속한다. 2-3배의 물과 섞어도 연고모양을 유지하고 피부에 흡수기 쉬우며 점막에 잘 붙는 성질이 있어서 연고의 기제로 쓰인다.Borax (붕사)Na2B4O7·H2O(붕산염)인 단사결정계 기둥모양 결정. 붕소,붕산의 중요한 원료로서 덩어리 모양 또는 곡식알 모양으로 산출된다. 비중 1.69 - 1.72 용해도 4.7 g/100g H2O이고, 무색 또는 백색, 반투명 또는 불투명인 붕사는 에나멜·특수유리의 원료나 세탁용 또는 방부제로서 식품 저장용으로도 쓰인다.Ⅲ. 실험 기구 및 시약가. 실험기구- beaker 1000㎖- pipet- 가열장치- glass stick- balance나. 시 약- 동물성 지방 50g- NaOH 8g- ZnO 0.2g- lanolin 0.5g- Borax 2.0g- 증류수Ⅳ. 실험 방법 및 순서1) 동물성 지방 50g을 비이커(1L)에 담는다.2) 50㎖의 물을 가하고 가열하여 약 5분간 끓인다.3) 차가운 물 25㎖를 가하고 기름이 굳을 때까지 혼합물을 방냉한다.4) 기름층이 굳으면, 구멍을 내어 아래의 수용액 층을 따라낸다.5) 증류수 50㎖에 수산화나트륨 8g을 넣어준 후 잘 저어 준다.6) 비이커에 남은 기름을 바닥으로 모으고 가열하여 녹인다.7) 위의 수산화나트륨 용액을 조금씩 천천히 가하면서 저어 준다.8) 혼합물을 85∼90℃로 가열하고 진한 꿀처럼 될 때까지 계속 저어준다.9) Zinc oxide 0.