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  • [생물학] 하디-바인베르크 법칙 평가D별로예요
    하디-바인베르크 법칙Hardy-Weinberg law한 개체군 내의 유전적 평형을 기술한 대수방정식.이 관계식은 1908년 독일의 의사인 W. 바인베르크와 영국의 수학자였던 G.H. 하디가 각각 따로 발견했다. 집단유전학이라는 학문은 이 원리에 기초를 두고 있다. 이 법칙은 무작위적 교배가 일어나고 있는 큰 집단에서, 유전자를 변화시키는 외부적 힘이 작용하지 않는 한 우성유전자와 열성유전자의 비율은 세대를 거듭해도 변하지 않고 일정하다는 것이다. 그러므로 소멸될 것으로 예상되는 아주 희귀한 유전자도 사라지지 않고 보존된다. 이러한 자연적 평형상태를 깨뜨리는 외부적인 힘으로는 선택·돌연변이·이동 등이 있다. 이 법칙의 발견은 진화의 주요 메커니즘인 자연선택을 설명하는 데 특히 중요한 역할을 했다. 만약 어떤 개체군의 유전자 비율이 변화되지 않고 항상 동일하다면 진화율은 0이다. 개체간의 변이는 무작위적 교배에 의한 다양한 유전적 조합 때문에 일어나지만 자연선택이 일어나기 위해서는 무작위적이 아닌 선택적 교배가 일어나야 한다. 어떤 유전형질은 배우자에 의해 선택되기도 하고 도태되기도 한다. 오랜 시간이 지나고 나면 이러한 선택압은 특정 유전자의 발현 빈도를 변화시키게 되고 따라서 이러한 유전자가 조절하는 형질은 개체군 내에서 흔해지거나 희귀해지게 된다. 의학유전학자들은 이 법칙을 사용하여 결함을 갖고 태어날 자손의 확률을 계산하기도 한다. 또 이 법칙은 산업공정·의학기술·낙진 등에서 나오는 방사선에 의한 개체군 내의 유해한 돌연변이의 발생을 예측하는 데도 유용하다.G. Hardy : 대립유전자 각각에 주어진 빈도, 즉 정상적인 손가락을 가진 사람과 짧은 손가락은 가진사람의 상대적 수는 자연선택이 수반되지 않는 한, 세대가 거듭되더라도 같게 유지될 수밖에 없음을 보여줌(유전적 평행genetic equilibrium)하디-바인베르크 법칙Hardy-Weinberg law외적 요인이 작용하지 않는다면 유전자와 유전자형 빈도 모두가 변하지 않고 평형을 이루게 됨(1) 하디-바인베르크 법칙은 어떻게 작용하는가생물학에서의 개체군 : 서로 교배하거나 교배가 가능한 개체의 집단을 의미F1 교배 후 F2 세대의 표현형을 보면 열성 대립유전자가 감소함을 제시해 준다. 그러나 대립형질의 수는 빈도가 P나 F1에서 같음을 입증F2 간에 가능한 교배를 모두 실시하면 F3가 나오는데 우성과 열성대립유전자의 총합은 열성대립유전자가 쉽게 감소하지 않음을 다시 한 번 입증F1 모두 Aa (A 대 a의 비율은 1 : 1)F2 AA-1/4, Aa-1/2, aa-1/4 (A 대 a의 비율은 1/2 : 1/2)(2) 대수적 설명대립유전자 A의 대립유전자 빈도를 P라 하고 대립유전자 a의 대립유전자 빈도를 q라 함⇒ p + q = 1 ( 1 = 전부 )하디-바인베르크 분포는 예상되는 AA 유전자형 빈도가 p2, Aa의 빈도는 2pq,
    자연과학| 2003.04.29| 2페이지| 1,000원| 조회(2,984)
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  • [생물] 배지,멸균 평가C아쉬워요
    미생물학-배지, 멸균에 대하여배지 ( Culture Medium)미생물이나 동식물의 조직을 배양하기 위해 배양체가 필요로 하는 영양물질을 주성분으로 하여 다시 고화, 그 밖의 목적을 위한 물질을 가한 것, 배양기라고도 한다.생물은 생존,발육에 필요한 물을 비롯하여 영양물질로서 다량요소, 미량요소등을 요구한다. 그 중 개체상으로 얻어지는 것을 제외하고는 모두 무기 또는 유기화합물로서 배양액에서 공급해주어야한다. 어떤 화합물이 필요한가는 독립영양,종속영양등 영양형식에 따라 여러가지다. 보통 영양원을 탄소원, 질소원, 무기염류, 발육인자등으로 나누어서 생각한다. 특히 발육인자와 관련하여 생물체 내에서 추출한 비교적 복잡한 조성을 가진 것을 주체로 한 것을 천연배지라 하며 세균은 육즙,혈청등 곰팡이는 맥아 엑스등이 흔히 사용된다. 이에 대하여 무기염류만 또는 맥아 엑스등이 아닌 탄소원 질소원을 가한, 조성이 명확한 경우를 합성배지라 한다. 대량 배양에는 액체배지가 적절하고 주의보존이나 분리에는 한천,젤라틴등을 가한 고형배지 사용.1. 배지의 조성적당한 영양분과 환경조건을 마련하여 줌으로써 많은 종류의 미생물들을 실험실내에서 인공적으로 기를 수 있다. 미생물이 자라 수 있도록 인공적으로 만든 영양 물질의 혼합물을 배지(culture medium)이라 한다.미생물 세포를 구성하고 있는 원소를 살펴보면 C, H, O, N, P, S, K, Mg, Fe, Ca등과 같이 대량 함유되어 있는 원소와 Co, Ni, Zn, Cu, Mo, Na 등과 같이 극미량 함유되어 있는 미량원柰?있다. 따라서 미생물은 이러한 원소로 되어 있는 화합물을 양적 차이는 있으나 모두 영양원으로 요구한다. 그러나 미생물이 요구하는 원소일지라도 그 화합물의 형태는 미생물의 종류에 따라 다르다. 무기물로부터 유기물을 합성할 수 있는 능력을 가진 독립영양체(autotroph)는 영양원으로서 무기화합물을 요구하고, 무기물로부터 유기물을 생합성할 능력이 없는 종속영양체(heterotroph)는 유기화합물을 영양원과 탄소원으로서 빛, Fe, Fe2+, S, S2O32-, NH3, NO2-, CO, CO2등을 요구하나 종속영양체는 각종 유기산을 비롯하여 알코올, 단당류, 다당류등을 요구한다.질소원으로는 질산, 아질산, 암모늄염과 같은 펩티드와 같은 유기질소원이 사용된다. 유기질소원으로는 각종 단백질을 산이나 알칼리 또는 효소로 가수분해하여 얻어지는 폴리펩티드, 디펩티드, 아미노산 등의 혼합물이 많이 사용된다. 가수분해물은 그 원료가 되는 단백질성 물질의 순도와 질 및 가수분해하는 방법에 따라 그 질이 달라진다. 산이나 알칼리로 단백질을 가수분해하면 재료에 포함되어 있던 모든 비타민과 일부 아미노산이 파괴되지만, 가수분해효소로 가수분해하면 이들이 파괴되지 않는다. 예컨대 순수한 카제인(casein)에는 탄수화물이 들어 있지 않고 트립토판(tryptophan)이나 비타민의 함량이 높은데 반하여, 이것을 산가수분해하여 얻은 카사미노산(casamino acid)에는 트립토판과 비타민이 전부 파괴되어 존재하지 않는다. 따라서 카사미노산은 비타민 정량용 배지의질소원으로 사용된다. 카제인을 트립신이나 판크레아틴(pancreatin)으로 가수 분해하여 얻은 트립톤(trypton)이나 카시톤(casiton)에는 비타민과 트립토판이 파괴되지 않은 채 잔존하므로 각종 당에 대한 발효시험이나 인돌(indol)시험 등과같은 생화학적 실험을 위한 배지의 질소원으로 사용된다. 같은 목적으로 사용되는 유기질소원으로는 젤라틴을 효소로 가수분해하여 만든 펩톤이 있는데, 이것은 트립토판이 함유되어 있지 않다. 이에 반하여 우유, 육류, 콩, 효모등으로 만든 펩톤에는 탄수화물을 비롯한 각종 비타민과 기타 영양물질이 함유되어 있으므로 당의 발효시험이나 인돌시험 등과 같은 생화학적 시험용 배지에 질소원으로 제공될 수는 없으며 단지 미생물의 증식용 배지에만 사용된다.무기염류로는 K, Na, Mg, Ca, Fe등의 인산염, 황산염, 염화물 등이 주로 사용되나 이외에도 Mn, Co, Zn, Mo, Cu 등의 미량정 아미노산이나 비타민 등을 배지에 첨가하기도 하나, 대개의 경우 여러 가지 생장인자가 모두 포함되어 있는 물질, 즉 육즙, 효모즙, 염통이나 뇌즙, 야채즙, 맥아즙 등을 사용한다. 좀 더 까다로운 영양물질을 요구할 경우에는 혈청, 혈액, 복수와 같은 조직액을 첨가하거나, 살아 있는 세포에 접종하여 배양하기도 한다.배지의 종류는 구성 성분, 성질, 실험의 목적에 따라 여러가지고 구분한다. 미생물이 요구하는 모든 필수 영양소를 그 조성에 따라 순수한 화학약품으로 만든 배지를 합성배지(synthetic medium)라고 하고, 동.식물의 조직이나 기관 또는 미생물체의 가수분해 산물이나 추출물을 시약과 혼합하여 만든 배지를 복합배지(complex medium)라고 한다. 복합배지는 정확한 배지성분의 조성을 모르기 때문에 증식용 배지로 많이 사용된다.실험의 목적에 따라 배지를 선택배지(selective medium), 성상확인배지(differential medium), 증균배지(enrichment medium)로 구분하기도 한다. 선택배지는 배지내 염료나 항생물질 또는 특수 화학물질을 첨가하여 특정한 미생물만 생장하도록 만든 배지이고, 성상확인 배지는 염료나 지시약 또는 특정 화학약품을 배지에 첨가하여 특정한 효소반응이나 그 균의 특성을 쉽게 판별할 수 있도록 만든 배지이고, 증균배지는 화학약품의 첨가나 환경조건의 조정하여 다른 종류의 미생물의 생장은 억제시키고 특정한 미생물의 생장만 촉진하도록 만든 배지이다.또한 배지는 그 성상에 따라 액체배지, 고체배지 및 반고체배지 등으로도 구분된다. 액체배지는 균체의 증식이나 생화학적 시험 또는 대사산물을 얻는 데 사용된다. 고체배지는 평판배지, 사면배지 및 고층배지가 있는데, 이들은 모두 미생물의 순수분리와 보존용으로 많이 쓰인다. 반고체배지는 운동성 실험과 미생물의 보존목적에 이용되고 있다. 배지의 고형화에 쓰이는 물질로는 한천(agar), 젤라틴(gelatin), 실리카겔(silica gel),계란알부민(egg album 되기 때문에 배지의 고형화 재료로서 가장 널리 사용되고 있다.한천 고체배지는 만들들기 위해서 사용되는 한천의 농도는 계절에 따라 다소 차이가 있으나 대체로 1.5-2.0%이다.일반적으로 배지는 물에 잘 녹는 물질로 만드나 배지의 조성에 따라서는 금속침전물이 생기는 경우가 있다. 이를 방지하기 위하여 EDTA(ethylenediamin tetraacetic acid)같은 킬레이트제(chelating agent) 를 첨가한다.2. 배지의 제조배지를 만들려면 각 미생물의 생육과 실험목적에 알맞도록 처방된 배지를 선택하고, 지시되어 있는 양을 달아 처방에 기재되어 있는 순서대로 물에 용해한다.사용되는 약품의 순도는 실험목적에 따라 달라야 한다. 즉, 증식용 배지에 사용되는 약품은 1급 정도의 순도로도 충분하나, 당분해 시험과 같은 생화학적 시험용 배지에는 특급 이상의 약품을 사용하여야 한다.천연영양원으로 만든 배지에는 찌꺼기가 부유하는 경우가 있다. 이때에는 거름 종이, 탈지면, 가제 또는 석면등으로 여과하여 부유물을 제거하여야 한다.대부분의 미생물은 pH 6.5-7.4범위의 중성배지에서 잘 자라나 콜레라와 같은 호염기성 미생물(basophiles)은 pH 8.5-9.5의 배니에서 잘 자란다. 또 호산성 미생물(acidophiles)인 Thiobacillus같은 것은 pH 4 에서, 곰팡이나 효모 같은 것은 pH 5인 약산성에서 잘 자란다. 따라서 미생물을 성공적으로 배양하기 위해서는 1N NaOH나 1N HCl로 배지의 pH를 그 미생물의 생육에 알맞도록 조정하여 주어야 한다. 만일 배지의 pH가 멸균시에 배지성분을 변화시킬 염려가 있을 경우에는 멸균 후 원하는 pH로 조정하여야 한다.처방에 따라 여양물질들을 혼합용해하여 만든 배지는 실험의 목적에 따라 적당한용기에 분주한다. 배지를 용기에 분주함에 있어서는 배지의 성격상 멸균전에 분주하여 멸균하는 방법과 멸균한 후 멸균된 용기에 분주하는 방법이 있다. 대체로 사면배지, 고층배지 또는 액체배지는 용기에 분주한 다음액체배양하기 위해서는 액체배지를 콜벤이나 플라스크와 같은 용기에 용량의 1/4-1/5정도가 되도록 분주하여 멸균해서 사용한다. 그러나 한천 평판배지를 만들 때에는 배지를 먼저 멸균한다음 15-20ml씩 분주하여 굳힌다. 굳은 한천 평판배지는 표면의 물기가 완전히 건조하도록 방치한 후 페트리 접시를 뒤집어 오염이 되지 않도록한다. 배지를 멸균한 다음 분주할 경우에는 잡균이 오염될 염려가 있으므로 무균실이나 무균상자 내에서 조작함이 바람직하다. 이렇게 만든 배지는 항온기 내에서 하루 방치하여 잡균의 오염 여부를 확인하고, 사용하는 것이 좋다.대체로 배지의 멸균은 고온 증기멸균법으로 행한다. 왜냐하면 배지에 함유되어 있는 유기영양물질 가운데는 열에 의하여 파괴되는 것이 많으나, 이 배지를 고온 증기멸균하면 배지의 영양물질들이 파괴되는 속도보다 잡균의 사멸속도가 빠르기 때문이다. 그러나 우레아와 티아민과 같이 열에 의하여 파괴되는 속도가 빠른 것, 글루코오스와 같이 열에 안정한 물질이라도 아미노산이나 펩티드와 함께 멸균하면 미생물의 생장을 억제하는 멜라노이딘(melanoidin)과 같은 물질을 생성하는 것, 또 인산염을 Mg2+또는 Ca2+와 함께 멸균하면 인산 마그네슘이나 인산 칼슘과 같은 불용성 염을 생성하게 하는 것들은 별도로 여과멸균이나 고온 증기멸균을 한 다음 혼합하여야한다.3. 순수분리여러가지 미생물들이 섞여 있는 재료로부터 한 종류의 미생물을 분리하는 방법을 순수분리법이라고 한다. 이 방법에는 여러가지가 있으나 흔히 많이 사용되고 있는 방법은 한천 평판배지의 표면이나 깊숙한 내부에서 독립된 콜로니(colony)를 형성하도록 한 다음 분리하는 방법이다. 전자를 도말 평판법(streak plate method)라고 하고 후자를 주입평판법(pour plate method)라고 한다.목적하는 미생물은 효과적으로 순수분리하기 위해서는 다음과 같은 예비조작을 시행하기도 한다. 즉, 증균배지를 순수분리하고자 하는 미생물의 개체수를 다른 잡균의 수보다 월등하게 많아지도다.
    자연과학| 2003.04.29| 5페이지| 1,000원| 조회(792)
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  • [미생물] 균수측정 평가B괜찮아요
    Title 균수 측정Date 2003 4 18NamePurpose평판배지에 소량의 시료를 넓게 펴서 세균의 밀도를 낮춰 단일 콜로니를 얻는 실험을 통해 검체 속의 생균수를 측정할 수 있다.Materials0.85% NaCl이 4.95ml 들어있는 tube 5개, 커피원액, Petridish, Pipette, Pippette tip, spreader, 알콜램프, 라이터,VoltexMethod① 0.85% NaCl이 4.95ml 들어있는 tube 5개를 준비한다.② 커피원액을 Pipette를 이용해 50㎕ 따서 준비된 tube에 넣어 희석시킨다.③ ②의 tube에서 50㎕ 따서 다음 tube에 넣어 잘 희석시킨다.④ 이 과정을 차례대로 5번째 tube까지 반복한다.⑤ Voltex mixer를 이용하여 균질화 시킨 후, 배지에 100㎕ 접종한다.⑥ 희석액을 화염멸균한 spreader를 이용하여 배지 표면에 고루 도말한다.⑦ 37℃ 온도에서 Overnight 배양하여, 배지에 발생하는 colony의 수를 측정한다.균수/1ml = 희석배수 × 균수 × 1/접종 volumeResult생균수의 측정이란 살아있는 균의 수만을 측정하는 방법이다. 생균 친화 염료로 균을 염색한 후 자외선 형광 현미경으로 측정하기도 하며, 균의 증식 능력에 근거한 배지상에 형성된 집락을 셈하므로 검체 속의 생균수를 측정하기도 한다. 한 평판에 대개 30~300개의 집락이 형성되도록 검체를 희석하면 좋다. 생균수 측정실험은 특정균의 검색, 항생물질의 연구, 식품의 멸균도 실험 등에 적당하게 쓰인다.이번 실험에서는 평판배지에 소량의 시료를 넓게 펴서 세균의 밀도를 낮춰 단일 콜로니를 얻는 실험을 하였다.멸균 증류수에 미지시료 x를 단계 희석하여 voltex mixer을 이용해 균질화 시킨 후 평판배지에 0.1ml 분주하고 콘라디봉을 이용하여 골고루 도말시켰다. 도말한 배지를 배양기에서 48시간 배양한 후 아래의 식에 대입하여 균수/1ml를 측정하였다.균수/1ml = 집락수 × 희석배수집락수는 3개가 나왔고 희석배수는 103이므로 결과는균수/ml = 3.0 × 103이 나왔다.Principle생균수 측정법① 주입 평판법(pour plate method)시료를 단계적으로 희석한 후 일정량(1ml)을 plate에 떨구고, 가열 살균한 표준한천배지(plate count agar, 45℃)를 부어주어 굳힌다.배양기에서 배양한 후 생성되는 colony의 수를 세고, 희석배수를 곱하여 시료내 존재하는 미생물 수를 측정.② 도말 평판법(spread plate method)한천 배지에 단계적으로 희석한 시료를 도말한 후 배양기에서 생육시킨다.③ 시험관 희석법(tube dilution method)시료를 액상으로 만들고 여과지(filter)를 통과시킨 후, 그 여과지를 배지 위에 올려놓고 배양한다. 여과지 위에 생성되는 colony 수를 측정.④ 최확수 검정법(method using most probable numbers)시험관 희석법을 변형. 동일 희석 시료를 여러 개 동일 실험하여 통계처리.⑤ 임피던스(impedance) 이용법대사에 따른 화학적 조성 변화를 impedance(Volt/Amp)의 변화로 측정* 평판 배양법(plate culture method)가. 검정하고자 하는 미생물(단세포 미생물)의 현탁액을 단계적으로 희석하고 그 일정량을 적당히 한천배지 위에 균일하게 퍼뜨려서 발생하는 균의 집락(colony)을 측정하고 균집락수 × 희석배수 = 생균수의 방법으로 측정하는 것이다. 그런데 이 방법은 모든 생균은 집락을 형성한다는 것과 하나의 균이 하나의 집락을 만든다는 가정아래서 출발한 것이다.나. 배지, 배양온도, 배양시간 등의 조건은 피검균의 발육에 가장 적합한 것을 선택한다. 서로 다른 미생물의 혼합물에 있어서는 최적조건이 다르므로 생균수 측정치에 차이가 있으며 이 점은 오히려 미생물의 분리에 응용된다.다. 희석 방법은 가장 중요한 조작이며 페트리 접시의 평판 1매에 대략균수가 10~100, 100~1,000이 되도록 희석하여야 하며 희석과정에 주의를 하여 두 가지 이상의 희석액을 만들고 평판배양은 여러 가지의 희석농도에서 얻은 생균수의 값을 평균하여야 한다. 희석할 때에도 시험관을 사용하여 10단계로 희석하는 것 보다도 큰 콜벤을 사용하여 1회에 10배 또는 100배로 희석함이 좋다.라. 페트리 접시에 한천 배지를 뜨거운 때에 일정량(10~15ml)붓고 냉각하기 전에(45℃로 온도가 내려간 것을 사용하도록 미리 연습할 것) 희석한 일정량의 균액(1ml 또는 0.5ml)을 넣고 충분히 혼합한다. 이때의 동작은 페트리 접시를 편편한 탁자면 위에서 천천히 돌려주면 배지가 흘러나오지 않고 잘 섞인다.마. 한천배지와 균이 잘 섞이고 굳은 다음에 또다시 45℃로 유지된 녹아있는 한천을 그 위에 붓는다.(3ml~5ml가 적당함)바. 일정한 온도에서 배양을 하게 되며, 접시를 거꾸로 놓고 밑의 접시를 뚜껑 접시 위에 비스듬히 걸쳐놓고 24시간 후에는 덮어둔다.사. 균수의 측정은 접시에 30~300개 정도의 집락이 생겼을 때에 가장 적합하며 균수(집락수)가 너무 많거나 또는 적은 것은 오차를 초래한다. 수를 헤아린 때에는 초자용 색연필로 균집락을 체크하면서 중복측정의 위험을 피하여야 한다. 여러개의 접시에서 얻은 값을 평균하는 것이 가장 신빙성이 있는 방법이다. 배지에 특수한 염색액이나 또는 탄산칼슘(젖산균 검색용) 산화환원약품 등을 섞어서 미생물을 구별하는 방법은 더욱 현명하다. 미생물 배지의 제조법에 따라서 이와 같은 약품을 섞어야 하며 자기 멋대로의 첨가는 학문적 근거에 의거하지 않는 이상 위험하다.* 시료의 처리 및 희석(1) 희석수희석수는 생리 식염수(0.85 NaCl 용액)나 인산 완충 희석수를 멸균하여 쓴다.(2) 시료의 채취 및 운반모든 시료는 멸균된 용기에 무균적으로 채취되어야 한다. 채취 후 실험까지의 경과시간이 짧을수록 시험결과는 더욱 정확한 것이 된다. 시료는 가능한 한 실험할때까지 본래의 상태를 유지하는 것이 좋으므로, 동결품을 동결된 상태로 실험실에 운반되어야 한다.동결되지 않은 시료를 곧 바로 실험에 착수할 수 없을 경우에는 반드시, 5℃정도로 냉각, 보관한다. 시료의 냉각 보관이 3일 이상이 되면 시료 중의 저온 세균이 증가하는가 하면, 중온 세균이나 고온 세균이 사멸하는 결과를 가져오므로 유의해야한다.* 희석균수가 많은 것으로 추정되는 시료는 희석을 하는데, 평판 당 균수가 30~300사이가 되도록 희석한다. 멸균된 희석수 90ml 당 시료 10ml를 가하여 단계 희석한다. 희석할 때에는 희석병을 단단히 잠그고 7초 동안에 약 30cm 간격으로 25번 정도 격렬하게 흔든 다음, 다음 단계로 희석을 되풀이한다.* 조작생균수를 측정할 때에는 시료를 단계 희석시키는, 희석 배율은 한 평판에 30~300개의 집락을 얻을 수 있도록 하는 것이 좋다. 단계 희석한 액을 멸균된 표준한천평판배지나 육즙 한천평판배지를 45℃부근으로 유지한 것을 20ml정도 무균적으로 petri dish에 부어 넣은 다음 조용히 흔들어서 시료액과 배지를 잘 혼합하여 냉각, 응고 시킨다. 이때, 시료 주입에서부터 한천을 부을 때까지 20분을 경과하지 않아야 한다. 냉각, 응고된 petri dish에 가한 다음, 같은 조작을 되풀이하여 희석수, 배지 및 조작이 무균적이었는가를 확인한다.* 평판 균수 산출법집락수를 산출하는 방법은 다음과 같다.(가) 한 평판에 30~300개 범위의 집락 수가 나타난 희석 단계의 것을 취하여 평균값을 내고, 희석배율을 곱하여 균수를 산출한다.(나) 모든 희석 단계에서 한 평판에 300개 이상의 집락이 형성되었을 경우에는 희석이 많이 된 평판의 것을 계산한다.(다) 균수의 계산결과는 보통 소수점 좌우 각 한자리의 유효숫자의 지수형태로 표기되는데, 균수 뒤에는 CPU(colony forming unit) 1g(또는 ml)로 나타낸다.(라) 모든 희석 단계에서 한 평판에 30개 이하의 집락이 형성되었을 경우에는 평균치를 구하지 않고,
    자연과학| 2003.04.29| 4페이지| 1,000원| 조회(1,101)
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  • [미생물] 미생물 염색법과 현미경을 이용한 관찰
    1. Title: 미생물 염색법과 현미경을 이용한 관찰Date:Name:2. Object1) 현미경의 조작 방법과 보관방법에 대해 알아보고자 한다.2) 박테리아, 조류, 균류, 효모, 원생동물의 형태학, 운동성 및 기타특징을 알아보고자 한 다.3) 우리 주변에 있는 미생물의 다양성 및 종의 수에 대해 알아보고자 한다.4) 대물렌즈의 100배와 400배의 사용법을 알아보고자 한다.5) 원핵동물을 관찰하기 위한 1000배의 oil-immersion렌즈의 사용법을 알고자 한다.6) 세균의 표본을 준비하는 방법을 알아보고자 한다.7) 세균의 표본을 염색하는 방법을 알아보고자 한다.8) 염색된 세균의 형태, 모양, 크기 및 분류의 결정방법을 알아보고자 한다.미생물은 우리 눈에는 보이지 않는 0.1mm이하의 미세한 크기로서, 현미경으로 보다 관찰을 쉽게 하기 위해서 염색을 하게된다. 미생물을 염색하는 방법의 하나인 simple staining은 염색법 중에서 가장 간단한 방법의 염색법이다. 단지 한가지 색소만으로 염색하는 단순염색은 세균의 크기, 형태, 배열상태만을 관찰할 수 있다. 그 중 Gram's staining은 미생물의 감별염색법으로 가장 널리 이용되는 방법이라 할 수 있다. Gram's staining은 서로 관련이 있는 균 종들 사이에 여러 가지 형태적인 특성과 서로 긴밀한 관련이 있으므로 세균분류의 지표가 된다. 이에, 이번 실험을 통하여 현미경의 사용법을 익히고, Gram's staining 방법 및 사상균법 등을 알아보고자 한다.3. Principle1) Simple staining염색 법 중에서 가장 간단한 방법의 염색법으로 단지 한가지 색소만으로 염색하는 단순염색은 세균의 형태, 크기, 배열상태만을 관찰할 수 있다. 세균의 세포학적 관찰은 사멸 고정 시킨 후 염색하여 세균의 모양과 배열을 볼 수 있는 것이다. 따라서 세균을 염색하기 전에 도말하고 열로 고정하여야 한다. 여기에서 도말이란, 깨끗한 slide glass위에 세균 부유액을 펴서 공기 중에서 건조시키는 것을 말한다. 건조시킨 도말 slide glass를 3∼4번 불 꽃 위를 통과시키면서 가열하는 과정을 열고정이라 한다. 열고정은 세균의 효소를 번성시켜, 자가 융해가 일어나지 않도록 한다. 또한 열처리는 slide glass에 부착성을 좋게 하여 준다.2) Gram's staining1884년 덴마크의 의사 H. C. J. Gram(1853∼1938)이 고안한 특수 염색법으로, 표본을 아닐린수·겐티아나액으로 물들여서 요오드·요오드화 칼륨액으로 처리한 후, 순 에탄올로 씻으면, 조직은 탈색되지만 균은 탈색되지 않고 자주색으로 보인다. 그러나 그후 여러 가지 균 종이 발견되자 그 속에는 조직과 마찬가지로 에탄올 세정에 의하여 탈색되는 균도 있다는 것이 밝혀졌다. 이때 탈색되는 균을 Gram negative균, 탈색되지 않는 균을 Gram positive균이라 부르기로 하면서 이 염색법은 당초의 목표와는 달리 세균의 분류에 이용되기도 하였다. 그후 positive·negative균은 화학 요법제에 대한 감수성뿐만 아니라, 균의 증식에 필요한 영양소의 종류, 물리·화학적 자극에 대한 반응, 생산하는 독소, 병변 등 각 방면에서 차이가 있다는 것을 알게 되면서 Gram's staining의 의의는 증대하였다.현재는 염색법도 많이 개량되었는데, 그 표준적인 방법은 다음과 같다. 세균을 슬라이드글라스에 놓고 건조 고정시킨 후 crystal violet으로 30초 동안 염색한 후, 경사지게 하여 Iodine을 약 1분 동안 작용시킨 다음 alcohol로 탈색하여 물로 씻은 후 safranin 등의 적색 계통 색소로 1∼3분 동안 염색을 하고 물로 씻어 말린 후에 현미경으로 관찰한다.이때 Gram positive균은 crystal violet의 청색 또는 보라색으로 나타나고 Gram negative균은 safranin O으로 염색되므로 분홍 혹은 붉은 색으로 나타난다. Gram positive균은 염색한 세균을 alcohol같은 탈색제로 탈색하여 crystal violet 혹은 메틸 알코올렛-요오드 복합물이 세포 속에 그대로 멈추어 있게 된다. 그 반대로 Gram negative균은 염색한 후 alcohol에 의하여 완전히 탈색된다. 색소-요오드 복합물을 탈색 액으로 처리했을 때 그대로 균체 안에 멈추어 있게 하는 것은 세포벽의 역할이다.2) Gram positive bacillus그람염색법에 의하여 보라색으로 변하는 세균으로, 포도상구균·연쇄상구균·폐렴균·나병균·디프테리아균·파상풍균·탄저균·방선균 등이 여기에 해당된다. 색소나 약제에 대한 감수성이 높으며, 대사작용에는 아미노산과 비타민을 필요로 한다.3) Gram negative bacillus그람염색법으로 염색하였을 때 보라색은 탈색되고 safranin으로 붉게 염색되는 세균으로, 종류로는 살모넬라균·이질균·티푸스균·대장균·간균·콜레라균·페스트균·임균·수막염균·스피로헤타 등이 포함된다. 생존에 필요한 영양요구가 간단하여 단순한 구성의 배양액에서도 잘 자라며, 독소는 균체 내 독소로 가열에 의해서도 잘 파괴되지 않는다. 균체 항원의 주체가 되지만 면역성은 약하다.4. Materials1) Reagentscrystal violet, safranin O, Ethanol-alcohol, Iodine, Phosphate Buffered Saline(완충용액), distilled water2) Apparatusslide glass 3, cover glass 1, pipette 1, alcohol lamp 1, microscope 1, platinum loop 1, straining tray 1, pincette 15. Proceduresmearing → drying → fixing → staining → washing → drying → microscopy1) microorganism① slide glass 위에 PBS(Phosphate Buffered Saline)를 한 방울씩 떨어뜨린다후 두가지 세균을 각각 도말한다.② alcohol lamp로 달군 loop로 균체를 잘 푼다. (이때, 너무 많이 묻히지 않도록 주의한다!)③ 공기 중에서 건조시켜 균체의 물기가 마른 후 alcohol lamp에서 3∼4회 통과시키면서 Heat fixing을 한다. (이것은 균체가 죽어서도 살아있는 그대로의 모습을 관찰할 수 있도록 열 고정을 하는 것이다.)④ 표본에 충분한 양의 crystal violet을 첨가하고 30초 후 물로 crystal violet을 닦아낸다.⑤ Iodine 용액으로 slide glass를 덮은 다음 1분 후 물로 헹군다.⑥ slide glass를 비스듬히 잡고 약 30초 동안 Ethanol-alcohol로 헹구고, 더 이상의 탈색을 방지하기 위해서 즉시 물로 헹군다.⑦ 대조염색으로 safranin O를 30초 동안 slide에 첨가하고, 물로 헹군 후 말리고 현미경으로 Gram's staining을 관찰한다. (대물렌즈×접안렌즈 = 40×10 = 400배의 배율로 관찰)
    자연과학| 2003.04.29| 8페이지| 1,000원| 조회(807)
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  • [회화] 회화 평가A좋아요
    회화(繪 )▣회화의 구분회화는 그 지역적 특수성으로 동양화와 서양화로 구별된다.서양화란 보통 유화를 가리키는 것으로 일반적으로 알려져 오고 있는데, 좀더 자세히 말한다면, 유럽이라는 풍토적인 조건과 역사적 사회적 배경에서 창조된 회화를 말하는 것이다.회화라는 근본적인 뜻에서는 같으나 그 시초의 배경이나 또 자라 나오는 고정에서의 특수한 점을 인정하기 때문에 다음과 같은 기준으로 구별하고 있다.1. 정신적인 기준으로 볼 때,▶서양화- 유럽 정신(헬레니즘, 크리스트교, 로마의 법정신)을 토대로 한 합리주의 정신▶동양화- 유교나 노자와 장자의 도가사상을 중심으로 분석보다는 종합을, 합리보다는 실천을, 또 생각하는 대상을 늘 현실의 인간 행위에 두는 중용을 정신 내용으로 하고 있다.2. 재료적인 기준으로 볼 때,▶서양화- 시대에 따라 변화하였으나 대체로 유채을 많이 사용.▶동양화- 주로 먹과 수채를 많이 사용, 종이나 비단에 그림을 많이 그림.3. 표현방식으로 볼 때,▶서양화- 논리적이고 구축적임, 화면에 층을 만들어 바르고 깎기 때문에 되풀이가능.▶동양화- 직관적이며 되풀이가 없음. 다시 말해, 붓을 한번 댐으로써 결정이 나는 것으로 종합적이고 순간적으로 조형을 이룩.그러나 회화에 동양화, 서양화의 구별이 있는 것은 중국, 한국, 일본, 인도 등 근대화에서 뒤떨어진 지역에서만 볼 수 있는 현상이고 현대에 와서는 회화라는 한 가지로 지향되고 있는경향이다.▣한국의 전통회화.1.한국화란?한국인의 손으로 그려진 회화를 총칭하는 희미로 확대 해석할 수도 있으나, 일반적으로 한국의 전통적 기법과 양식에 의해 다루어진 회화를 말한다. 종래까지 '서양화'에 대응되는 개면으로 통용되던 '동양화'라는 명칭을 일제에 의해 타율적으로 조성된 용어로 비판, 이를 주체적 입장에서 개칭하여 최근에 사용하기 시작했다.동양 회화권에 있어 중국의 전통회화는 '중국화'로, 일본의 전통회화는 '일본화'로 불리어졌으나 일제는 한국 고유의 전통과 민족성의 자각을 꺼려 1921년의 제 1 회 서화협회전람회와 청록산수화, 그리고 불교회화가 활발히 제작되었을 것으로 추측된다. 솔거는 이 시대에 활동했던 화가로 믿어지는데, 그가 그렸다고 전해지는 황룡사의 노송도에 관한 일화를 통해 볼 때 이 당시 사실적인 화풍이 크게 진작되었던 것으로 생각된다.▶ 고려시대에 이르자 한국화는 보다 다양하게 전개되어 나갔다. 그림의 소재도 인물·초상·산수·영모·화조·궁중누각·묵죽·묵매·묵란 등 순수한 감상의 대상이 되는 거의 모든 분야의 작품이 제작되었다. 이 시대의 가장 대표적 화가였던 이영은 우리 나라 산천을 소재로 하는 실경산수화인 「예성강도」와 「천수사남문도」로 화명을 중국에까지 떨치기도 하였다. 이 밖에 문인화가로 이준이·이전·이존부·정득공·정지상·차원부·정서·안치민·정홍진·김군수 등의 이름을 기록에서 찾아 볼 수 있으나, 현재 이들의 그림은 한 점도 남아 있지 않다. 고려시대의 화적으로 일컬어지고 있는 작품은 이제현의 「기마도강도」와 공민왕의 「수렵도」등이 있는데, 이는 모두 북종적인 원체화풍을 보이고 있다.▶ 조선시대에 이르러 고려시대에 확산된 한국화의 전통은 더욱 활발하고 폭넓게 전개되면서 확고한 기반을 형성하였다. 이 시대의 회화 역시 중국회화를 선별적으로 수용하고 소화하여 구도·공간 처리·필묵법·준법·수지법 등에서 독자적인 양식을 이룩하였으며, 이렇게 확립된 회화 전통은 후대의 한국적 화풍창조의 기초가 되었다.조선시대의 회화는 대체로 화풍의 변천에 따라 초기(1392-1550),중기(1550-1700),후기 (1700-1850),말기(1850-1910)로 나누어 볼 수 있다.☞초기에는 북송대의 곽희파 화풍을 토대로 발전된 안견파 화풍이 가장 유력하였으며, 이 밖에 강희안을 중심으로 명대의 절파 화풍과 이상좌를 중심으로 남송대의 마·하파 화풍, 그리고 최숙창 등을 중심으로 미법산수화풍 등이 화단의 일각에서 그려졌다.☞중기에는 안견파 화풍을 비롯한 초기의 화풍들이 계승 지속되었으나 그 중에서도 절파계의 화풍이 가장 크게 유행되었으며, 김식·조속 등에 의해 영모나 화조화 조석진을 비롯한 근대 초기의 작가들과 그들의 문하에서 배출되어 독자적인 세계를 형성한 이상범·노수현·변관식·김은호 등에 의해 현대 화단에까지 그 맥락이 이어질 수 있었다.그러나 오늘날의 한국화는 전통성의 올바른 회복과 이를 창조적으로 계승·발전시켜야 할 과제와 함께 많은 문제점을 안고 있다.3.한국화 감상법♣서양화와 한국화를 비교한다면 서양화는 대체로 캔버스(천)에 유화 물감으로 그려진다. 거기에 비하면 동양화로 알려진 그림들은 주로 화선지(종지)에 먹으로 그려진다.예컨데 수묵 산수란든가, 사군자(四君子), 화조(花鳥), 어개(魚介), 금수(禽獸), 지명절지(器皿折枝) 등 이런 내용물들은 서양화에서는 흔하게 볼 수 없는 것들이다. 또 동양화에는 병풍이라든가 족자(걸개 그림), 부채와 같은 묵난십곡병 특별한 형식의 그림도 있다. 캔버스나 유화 물감은 그림 그리기 위한 단순한 물질적이 수단일 수 있겠으나 화선지와 먹의 경우 그렇게 볼 수 없다. 화선지와 먹은 과거의 동양 문화권에서는 하나의 물질이 동시에 정신적인 어떤 것이었다. 말하자면 물질과 정신이 결합되어 있는 제3의 어떤 것, 그것이 수묵사상(水墨思想)이고 동양 사상이었다.불과 물이 혼재되어 있는 것이 술이고 그것을 마실 때 취하듯이, 수묵도 그것에 익숙해있는 사람들에게는 취하게 만드는 어떤 신비한 힘이 있다고 믿는 것이다. 수묵에 대한 이런 신념을 가진 사람들이 서양화와 자신들이 그린 그림 을 동일한 범주 속에 넣으려 하지 않는다는 것은 당연하다.♣수묵화와 문인정신한국화에서 그림을 말하고자 할 때 가장 큰 줄기로 문인화 계통과 고분 벽화 계통이 거론될 것이다. 문인화는 과거 제도를 도입한 고려시대 이후부터 조선조 말에 이르기까지 우리의 미술 문화의 흐름을 이어온 큰 맥락이며, 고분 벽화는 우리 토착 문화의 줄기로서 그 뒤 불교 미술과 절충되며 흘러온 본격적인 채색화이다.문인화와 고분벽화를 비교해 보았다.☞문인화-먹의 그림, 사대부의 그림, 정신적인 것을 추구하는 그림 양식....☞고분벽화(채색화)-색채의 그려서 후세에 전한다든지 또는 그림이 장식으로서 이용된다는 세속적인 유용성에는 선비들이 전혀 무관심했으며 단순히 교양을 확보하는 하나의 도구에 만족했기 때문이다. 따라서 이야기를 전하거나 또는 기념비적인 의미로 남기 위해서는 직업화가(관화원)들에 의해 그려질 수밖에는 없는 일이었다.♣한국화의 두가지 관점여기서 한국화를 말할 때 두 가지 관점을 이끌어 낼 수 있다.▶하나는 그림이 신선들의 여러 고사에 얽힌 이야기를 전하는 수단이었다는 것이며▶다른 하나는 신선들이 신봉했던 자연 철학(음양 오행설)을 실감해 보이는 일이다.안견이 그린 '몽유도원도'는 안평대군의 꿈을 도원경이 그리긴 했으나 그 원행은 도연명의 의 영향이고 다시 도연명은 이미 진대로부터 전해진 신선의 이야기를 그 나름대로 재구상하여 전한 것이다. 진나라 무릉에 살던 한 어부가 배를 타고 계곡을 오르다가 복숭아 나무가 즐비하게 서있는 곳에서 갑자기 길을 잃었다. 살펴보니 그곳에 굴이 있었는데 그 속으로 들어가 보니 기름진 논밭과 들판이 전개되고 있었다. 뽕나무, 대나무 밭 사이에는 닭소리, 개소리가 들리고 곧 사람들이 나타나 인사를 했다. 내력을 물으니 진나라의 난을 피해 처자와 함께 이곳에 들어와 산다고 했다. 그들은 그 뒤 진나라 다음에 한나라, 위나라, 그리고 다시 진이 들어선 것도 모르고 살고 있었다. 잔뜩 주육으로 대접받은 후 그곳을 나왔는데 그 뒤에 사람들을 데리고 다시 그곳을 찾아갔으나 끝내 찾지 못한다. 그러나 중요한 것은 이 이야기에는 둔세사상이 내포되어 있다는것이다. 이른바 도교에서 말하는 무위 자연의 사상이 암시되어 있다. 사 이야기의 전달이 독창적인 양식에 의해서가 아니라 단순한 전승이나 답습에 의해 이루어진다는 점이다. 이 점은 박제가의 소를 타고 가는 그림도 마찬가지다. 소 그림은 원천적으로 선종의 '십우도'에서 비롯하기 때문이다. 한편 자연철학의 그림들은 처음부터 이야기에 관심이 없거나 아니면 이야기의 내용보다 는 이야기를 나타내는 붓질 행위 자체에 관심을 쏟게 된다. 역대의과 그 지위를 검증하는 자기실현의 한 수단이었다. 이런 양상은 고분 미술과의 대등 관계로 이해된다. 왜냐하면 문인화가 김부식의 사대주의와 함께 부각되고 동시에 묘청의 몰락과 함께 고분문화가 역사 무대에서 사라졌기 때문이다. 벽화의 세계는 기운 생동이 이야기로 발전하는 세계이다. 문인화에 있어서는 기가 자기 안 에서 어떻게 인식되는가를 표현하지만 벽화에서는 기가 비유나 기호로 나타나며 기념비적인 사건으로 전승된다. 고분 벽화의 '사신도(四神圖)'는 기운 생동의 우주적인 원리가 기호로 설 명된 그림이며, 인물화는 기운 생동의 원리를 터득한 시선의 모습이다. 벽화를 말하기 위해 서는 고분 속에 그려진 풍속을 알아야 하고 벽화 양식은 공간 양식이라고 말 할 수 있다. 벽화의 세계가 기운 생동을 행위와 행위의 관계로 발전시켜 나가기 때문이다. 행위와 행위의 발전은 그것이 발전할수록 더 많은 공간을 요 구하게 되고 급기야 사회와 역사의 문제로 확대되기에 이른다. 벽화가 상대적으로 표현에 있어서 설명적이고 그 물감의 양감이나 질감이 증대되고 무거워 지며 공간을 가득히 채우려는 공간 공포의 증세가 나타나게 되는 것도 기운 생동의 원리가 역사와 사회로 확장하려는 본질을 지니고 있기 때문이다.4. 한국화의 대표적 작품한국화의 대표로써 나는 조선시대의 작품을 몇개 들려한다.조선 시대는 가장 개성적이고 민족적 자아 의식이 강한 시대로서 화풍의 변천에 따라 초기(1392-1550), 중기(1550-1700), 후기 (1700-1850), 말기(1850-1910)로 나뉜다.신사임당의 〈초충도〉는 비슷한 구도의 초충이 그려진 여덟 폭의 병풍인데, 현재는 열 폭으로 꾸며져 있다. 그림이 아닌 나머지 두면에는 신경과 오세창의 발문(跋文)이 적혀 있다. 각 폭마다 화면의 중앙에 두 세 가지의 식물을 그린 다음에, 그 주변에 흔히 볼 수 있는 각종 풀벌레를 적당히 배치하여 좌우 균형과 변화를 꾀하였다. 이 〈초충도〉는 형태가 단순하고 간결하여 규방(閨房)의 여성들이 필수적으로 하던 자수(刺繡)
    예체능| 2002.05.07| 12페이지| 1,000원| 조회(517)
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2026년 05월 03일 일요일
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